연구배경 : 수술을 시행했던 비소세포폐암에서 유체세포계산법(flow cytometry)으로 DNA ploidy를 측정했을때 aneuploid 종양이 diploid 종양 보다 생존기간이 짧은 것으로 보고되어 있는데, 소세포폐암을 포함한 폐암에서 기관지 솔질에 의한 세포학적 표본을 이용하여 측정한 DNA ploidy가 치료에 대한 반응을 잘 예측할 수 있을 것인지 알아보고자 연구를 하였다. 방법 : 기관지내시경검사시에 기관지 솔질을 해서 얻은 표본으로 DNA ploidy 검사를 시행하였고 조직학적으로 폐암으로 확진되었던 109예를 대상으로 해부적 생리적 병기와 DNA ploidy와의 관계를 검토하였고, 치료를 시작한지 8주 이상 지나서 반응을 검토할 수 있었던 58예를 대상으로 DNA ploidy에 따른 반응의 차이를 검토하였다. 결과 : 1) 세포 형태에 따라 aneuploid 혹은 고증식력(S+G2M>22%)의 발현 빈도는 차이가 없었다. 2) DNA ploidy와 해부적 생리적 병기는 유의한 관계에 없었으나 비소세포폐암에서 고증식력군때는 저증식력군에 비해 해부적 병기가 진행된 경우가 많았다(p<0.05). 3) 치료에 대한 반응은 해부적 병기에 따라 차이가 있었으며(소세포폐암 p=0.10, 비소세포폐암 p<0.005), 생리적 병기에 따라서는 비소세포폐암에서만 차이가 있었다(p<0.05). 4) DNA ploidy와 증식력에 따라서는 치료에 대한 반응에 유의한 차이는 없었다. 결론 : 기관지 솔질 표본을 이용하여 시행한 DNA ploidy 검사는 고증식력 유무가 해부적 병기와 관계가 있었으나 치료에 대한 단기 반응을 예측하는 데는 해부적 생리적 병기만큼 유용하지는 않았다.
연구배경: 종양세포는 세포의 비정상적인 분열성장이 증가되므로, 세포내의 DNA가 양적인 변화를 일으킨다. DNA의 양적변화인 DNA ploidy 여부는 종양의 생물학적 특성을 반영하므로, 소세포 폐임에서 DNA ploidy의 변화와 생존기간을 비교하였다. 방법: 1990년 1월부터 1991년 12월까지 원광의대 부속병원에서 원발성 소세포 폐암으로 조직병리학적 진단을 받고나서, 2회 이상의 화학요법을 실시받은 후, 최소 2년이상의 후향적 추적에 의해 사망이 확인된 42례를 대상으로 하였다. DNA ploidy 분석방법은 paraffin에 보관된 병리조직을 이용하여 유식세포 분석법에 의한 DNA histogram으로 분석하였다. DNA ploidy 여부와 평균 생존기간을 비교하였으며, 다시 TNM 병기, PS scale, 화학요법 실시 횟수 등으로 세분하여 DNA ploidy 여부와 생존기간과의 관계를 재비교하였다. 결과: 1) 전 군의 평균 생존기간은 190(${\pm}156$)일이었으며, TNM 병기, PS scale이 진행할 수록 생존기간은 단축되었다. 2) 전 군에서 DNA aneuploidy의 발현 비율은 60%(26/42)였으며, 암의 진행정도와는 관계없었다. 3) 전 군에서의 평균 생존기간은 diploidy군이 272(${\pm}197$)일로서 aneuploidy 군의 138(${\pm}90$)일보다 유의하게 연장되었다(p<0.001). 4) DNA ploidy 여부에 의한 생존기간의 차이에 대한 TNM 병기, PS scale의 영향은 없었다. 결론: 소세포 폐암 환자에서 DNA aneuploidy 군은 diploidy 군보다 유의하게 생존기간이 짧았으며, DNA ploidy 여부는 TNM 병기, PS scale과는 무관한 예후추정 인자로서 임상적 이용아 가능하다고 생각된다.
목적 : 여러 종양에 있어 DNA ploidy 양상은 여러 임상조직학적인 소견과의 연관성을 보여주어 왔다. 이에 본 연구에서는 대장직장암에 있어서의 이러한 연관성에 대해 알아보고 직장 5상 결장암에 있어서 치료 실패율과의 연관성에 대해 알아 보고자 하였다. 대상 및 방법 : 본 연구에서는 대장 직장암으로 진단 후, 근치적 절제술을 시행받은 환자 117명을 대상으로 하였고 Medley method에 따라 파라핀에 고정 후 flow cytometry를 사용하여 DNA ploldy와 여러 임상조직학적인 소견들과의 연관성을 밝히고자 하였다. 이 중 Duke 병기 B, C 직장 5상 결장암 환자 75명을 대상으로 하여 치료실패 양상과 DNA ploidy 간의 상관관계를 알아 보았다. 결과 : 종양분석 결과 40예(34.2%)에서 aneupioldy histogram을 얻을 수 있었다. DNA aneuploidy와 나이, 성별, 침범 깊이, 위치 그리고 Dukes' 병기와는 유의한 상관관계를 보이지 않았다. 그러나 Dukes 병기 B 직장암에 있어서는 치료 실패율과 DNA ploidy 사이에 유의한 상관관계를 보였다(p=0.048). 결론 : 대장 직장암에서 DNA ploi텀는 다른 임상조직학적 소견들과 관련이 없었고 직장 5상 결장암 병기 B에서는 치료 실패율과 연관성을 보였으나 보다 많은 수의 환자를 대상으로한 검증이 필요하다고 생각된다.
Efficient plant regenerationsystem from cell suspension cultures was established in D. acicularis (2n = 90) by monitoring ploidy level and visual selection of the cultures. The highly regenerable cell lines selected maintained original ploidy level and consisted of compact cell clumps with yellowish color and relatively moderate growth, suggesting that it is possible to select visually the highly regenerable cell lines with the original ploidy level. All the regenerated plantlets from the highly regenerable cell cultures exhibited normal phenotypes and no variations in ploidy level were observed by flow cytometry (FCM) analysis.
This study was performed to compare DNA content by flow cytometer (FCM) and glutathione S-transferase placental form (GST-P) positive foci for searching objective and accurated properties of tumor. Sprague-Dawley rats aged six weeks were divided into three groups and group 1 and 2 of rats were given an intraperitoneal injection of diethylnitrosamine at 200mg/kg body weight and group 3 of rats were given saline. Three weeks after beginning of the experiment, all groups were performed partial hepatectomy. Group 1 of rats were begun to feed on diets containing 0.02% 2-acetylaminofluorene as a promoter for six weeks, group 2 and 3 of rats were begun to feed on basal diets. At 4, 6, and 8 weeks after initiation, all groups of rats were killed, livers were extracted for H & E stain, immunohistochemical stain, and DNA ploidy analysis. In quantitative analysis for GST-P positive lesion number and area by using Image Analyzer, group 1 and 2 represented significant difference in comparison with group 3. In ploidy distribution, diploid cells of group 1 and 2 were increased significantly in comparison with those of group 3 at 4, 6, and 8 weeks after initiation, respectively tetraploid cells were reduced. But S-phase cells were not changed significantly. It is concluded that ploidy change by FCM is useful as objective data for early detection in hepatocarcinogenesis. Therefore, methodology and study of DNA content are carried out for more objective and accurate ploidy analysis in liver tumor.
The triploid Pacific oyster, which is produced by mating tetraploid and diploid oysters, is favored by the aquaculture industry because of its better flavor and firmer texture, particularly during the summer. However, tetraploid oyster production is not feasible in all oysters; the development of tetraploid oysters is ongoing in some oyster species. Thus, a method for ploidy verification is necessary for this endeavor, in addition to ploidy verification in aquaculture farms and in the natural environment. In this study, a method for ploidy verification of triploid and diploid oysters was developed using multiplex polymerase chain reaction (PCR) panels containing primers for molecular microsatellite markers. Two microsatellite multiplex PCR panels consisting of three markers each were developed using previously developed microsatellite markers that were optimized for performance. Both panels were able to verify the ploidy levels of 30 triploid oysters with 100% accuracy, illustrating the utility of microsatellite markers as a tool for verifying the ploidy of individual oysters.
The objective of this study was to determine a simple and reliable ploidy identification protocol for the rainbow trout (RT), Oncorhynchus mykiss, in the field condition. To evaluate the ploidy level and compare different detection protocols, triploid RT and gynogenesis were induced by UV irradiation and/or heat shock. The hatching rate at day 30 was 85.2% and the survival rate at day 90 was 69.4% (fingerling). The sex ratio of female RT was 93.75% in the gynogenesis group, illustrating that the UV irradiation inactivated the sperm DNA. The hatching rate and survival rate were 82.0 and 74.7%, respectively, in the triploid-induced group. The triploid induction rate by heat shock procedure was 73.9%. Cytogenetic protocols for ploidy identification such as chromosome counting, erythrocyte nuclear size comparison, and analysis of nucleolar organizing regions (NORs) by silver staining were compared. Silver nitrate staining showed the greatest success rate (22/23 and 32/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively), followed by erythrocyte nuclear size comparison (16/23 and 19/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) and, lastly, chromosome preparation (2/23 and 6/32 for the triploid-induced group and gynogenesis group, respectively) with the lowest success rate. Based on our findings, silver staining for RT ploidy identification is speculated to be highly applicable in a wide range of research conditions, due to its cost-effectiveness and simplicity compared to other numerous ploidy detection protocols.
Anaplastic carcinoma of the thyroid gland is one of the most malignant tumors. Recently, DNA ploidy measured by flow cytometry and image analysis has been suggested as an additional useful indicator of tumor behavior. Studies on the occurrence and clinical significance of DNA aneuploidy in anaplastic carcinoma of the thyroid are rare. In this study, the pattern of DNA ploidy was measured by image analysis on Papanicolaou stained slides in four cases of anaplastic carcinoma and also measured by flow cytometry using paraffin blocks in two cases. In all cases of anaplastic carcinoma, DNA aneuploidy was found by image analaysis. By flow cytometry, one case had a diploid peak and the other case had an aneuploid peak. According to the above results, we conclude that anaplastic carcinoma of the thyroid glands have a high incidence of DNA aneuploidy and image analysis using Papanicolaou stained slides is a useful method in detecting DNA aneuploidy.
We cytogenetically analyzed a triploid King-Nupchi strain of the olive flounder Paralichthys olivaceus to define the simplest, most rapid, and most effective method of ploidy analysis in aquaculture farms. Female triploidy of the flounder King-Nupchi strain was induced by cold shock (3 min post-fertilization at 2-4℃ for 45 min). Triploid induction was confirmed by erythrocyte measurement (nuclear volume, 29.15±2.10 μm3); flow cytometry (2.14±0.03 pg/cell); chromosome count (3N=72); Ag-NOR banding; and silver staining. Silver staining of finned cells obtained using a solid tissue technique was the most effective method of ploidy verification.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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