This study was carried out with the detection for multiresidue of the organophosphorus pesticides such as malathion, parathion. diazinon, and carbamate pesticide such as carbaryl, by enzyme-inhibition method. The acetylcholinesterase (AChE) and cholinesterase (ChE) activities in chicken brain determined by the Ellman's method were 166.6 and 5.8 $\mu$mol/min/g protein, and in chicken plasma were 23.1 and 8.3 $\mu$mol/min/g protein, respectively. The optimum pH of AChE and ChE was 8.2 and 7.8, respectively. The Km of AChE and ChE was 0.034 and 0.045 mM, respectively. I$\_$50/ for AChE and ChE by some organophosphorus was 55.82 and 99.42 mg/L of malathion, 31.16 and 29.13 mg/L of parathion, and 17.89 and 19.62 mg/L of diazinon, respectively. I$\_$50/ for AChE and ChE by carbaryl of carbamate was 0.10 and 0.05 mg/L, respectively. The 0.07 mg/L of drinking water advisory level for carbaryl could be detected with I$\_$50/ of AChE and ChE. Enzyme-Inhibition (EI) method with AChE and ChE was used the multiresidue method to detect the 1 mg/L of the carbamate pesticides.
Esterase activity was observed after pesticides treatment in eggs of H. axyridis to select low toxicity pesticide. Egg esterases of H. axyridis were examined using an esterase substrate(${\alpha}$-naphthyl acetate). Three esterase isozymes were detected and the activities were inhibited by organophosphorus insecticide (Chlorpyrifos and Phenthoate), organochlorine insecticide(Methidation), triazole fungicide(Hexaconazole and Triflumizole), and pyrimidine fungicide(Nuarlmol). Fecundity and hatchability in adults and eggs of H. axyridis were examined on selected pesticides. Fecundity and hatchability were significantly reduced from H. axyridis adults and eggs treated with the pesticides and the fungicides showed strong inhibition of esterase isozymes activities. However, we also observed the pesticides and the fungicides showed low or non-inhibition of esterase isozymes activities affected on fecundity and hatchability in adults and eggs.
The monitoring of pesticide residues was performed on 33 fruit commodities collected in Gyeonggi-do, Korea from 2006 to 2010. Pesticide residues were detected in 431 samples (16.8%) of total 2,558 samples and violated in 12 samples (0.5%). Annual detection rate showed 6.9%~19.4% with the rate of violation of 0.3%~0.9%. Twenty three samples (69.7%) of 33 commodities were detected and 4 samples (12.1%) were violated. Eight pesticides (EPN, dicofol, carbaryl, procymidone, methidathion, prothiofos, fenitrothion and phenthoate) were violated and 62 pesticides were detected. Chloropyrifos was detected most frequently. The rate of detection and violation of citrus fruits in fruits showed the highest level. Organophosphorus pesticides (35%) and insecticide (57%) were detected most frequently. The hazard index (%ADI) of chronic dietary risk assessment by deterministic approach showed that the lower limit value and upper limit value for the whole population were 0.0000~0.7526 and 0.0000~1.3237 respectively. For the only consumer group, the lower limit value and upper limit value were 0.0006~9.7801 and 0.0058~15.9258 respectively. Therefore the hazard index for the whole population and the only consumer group were evaluated as a safe level.
Exposure measurement of agricultural worker to pesticide is one of important part of health risk assessment of pesticide. Therefore exposure matrices, apparatus, instruments and methods must be validated in advance to field experiment. In this study, method validation with an organophosphorus insecticide fenthion was carried out for exposure monitoring of agricultural worker. LOD and LOQ were 0.01 and 0.05 ng, respectively. Calibration curve linearity ($R^2$ > 0.999) and reproducibility (C.V. < 3%) were also excellent. Recovery at LOQ, 10LOQ and 100LOQ levels from gloves, socks, mask, patch, solid sorbent, glass fiber filter was 76~113% (C.V. < 3%). Trapping efficiency was 95~105% while no breakthrough was observed. Method validation for the exposure monitoring was established successfully through several experiments. Such method validation can be usually performed in laboratory and not much different for each pesticide so that, this techniques will be applied widely in research for pesticide exposure monitoring by combination with body surface area and respiration rates.
$^{31}P$ NMR and ESI-MS studies of $Cu^{2+}$ binding to Fenitrothion (FN) were performed by experimentally and theoretically. The calculated $^{31}P$ NMR chemical shifts for FN-$Cu^{2+}$ complexes are in good agreement with experimental chemical shifts in order, and the results present an important information for organophosphorus pesticide metal complexes. ESI-MS and low energy CID MS/MS experiments of FN-$Cu^{2+}$ complexes combined with accurate mass measurements give insight into the metal localization and allow unambiguous identification of fragments and hydrolysis products.
A potentiometric flow injection biosensor for the analysis of anti-cholinesterases (anti-ChEs), based on inhibition of enzyme activity, was developed. The sensor system consists of a reactor with acetylcholinesterase (AChE) immobilized on controlled pore glass and a detector with an $H^{+}-selective$ PVC-based membrane electrode. The principle of the analysis is based on the fact that the degree of inhibition of AChE by an anti-ChE is dependent on the concentration of the anti-ChE in contact with AChE. The sensor system was optimized by changing systematically the operating parameters of the sensor to evaluate the effect of the changes on sensor response to ACh. The optimized biosensor was applied to the analysis of paraoxon, an organophosphorus pesticide. Treatment of the inhibited enzyme with pyridine-2-aldoxime fully restored the enzyme activity allowing repeated use of the sensor.
The electron-capture detector (ECD) of gas chromatographs (GC) has been used widely in pesticide analysis. However, as ECD relies on radioactive material, it is troublesome to purchase and maintain. Therefore, potent replacements for ECD were investigated. A Pulsed-discharge detector (PDD) for ECD was tested and the analytical results of PDD (ECD mode), ${\mu}ECD$, and nitrogen-phosphorus detector (NPD) were compared for 107 pesticides including organochroline, organophosphorus, pyrethroids etc. The number of pesticides identified at the lowest limit of detection (LOD) was 36, 29, and 2 for PDD, ${\mu}ECD$, and NPD, respectively. The remaining pesticides showed same response to PDD and ${\mu}ECD$. The GC-PDD analysis of pesticides spiked into representative agricultural products (brown rice, spinach, and mandarin oranges) also showed good and/or equivalent recoveries using $GC-{\mu}ECD$.
In a previous study, we obtained polyclonal antibodies against the organophosphorus insecticide fenitrothion and developed an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for this pesticide. Using these antibodies and an enzyme tracer, a direct competitive ELISA method specific for fenitrothion using a dipstick format was developed. Dipstick ELISA using antibodies to fenitrothion immobilized on an Immunodyne membrane allowed the quick visual detection of fenitrothion at concentrations above $10\;{\mu}g/L$. The $IC_{50}$ value of dipstick ELISA using reflectance detection was $27\;{\mu}g/L$ with a detection limit of $2\;{\mu}g/L$. The recovery of fenitrothion from spiked lettuce and rice samples using the dipstick ELISA ranged from 87-107%.
Mandarin orange fruits were artificially contaminated with an organophosphorus insecticide phenthoate by dipping and the residue level of phenthoate was investigated during the purification steps of dietary fiber or bioflavonoid. The removal rate of phenthoate at 8 and 0.5 ppm levels was 98% in the total dietary fiber, 99% in the insoluble dietary fiber and 99.8% in the soluble dietary fiber preparations. Kuring the preparation of biflavonoid from peels at a 5 ppm pesticide level, the removal rate was 90% in the intermediate extract and 99.9% in the final extract. In conclusion, phenthoate residues in the peels of mandarin orange were mostly removed during the preparation processes of dietary fiber of bioflavonoid and its residue level would not raise any problem in safety aspects of the purified products.
In order to evaluate the degradation organophosphorus pesticide, EPN, in water environment, the effects of water temp.(10$^{circ}C,\;30^{\circ}C$), pH(3-11) and sunlight on its degradation were investigated during 10 days. The degradation rate of EPN(200 rpm) was faster at higher water temp. and higher pH, i.e., its degradation rate at pH 3, 5, 7, 9, 11 was 57, 63, 66, 69, 75%(1$0^{\circ}C$), and 70, 74, 79, 91, 97%(3$0^{\circ}C$) after 10 days, respectively. The effect of water temp. on its degradation was little in acidic condition, but was rather great in alkaline condition, with time. EPN was degraded fast at the alkaline condition by photolysis. At the condition of pH 11, EPN was degraded fast at the early stage in the first 2 days, but after that the degradation rate was weakened.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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