Alvarez, Vanessa Marques;Santos, Silvia Cristina Cunha dos;Casella, Renata da Costa;Vitae, RonaIt Leite;Sebastin, Gina Vazquez;Seldin, Lucy
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.12
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pp.1966-1974
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2008
A typical tropical soil from the northeast of Brazil, where an important terrestrial oil field is located, was accidentally contaminated with a mixture of oil and saline production water. To study the bioremediation potential in this area, molecular methods based on PCR-DGGE were used to determine the diversity of the bacterial communities in bulk and in contaminated soils. Bacterial fingerprints revealed that the bacterial communities were affected by the presence of the mixture of oil and production water, and different profiles were observed when the contaminated soils were compared with the control. Halotolerant strains capable of degrading crude oil were also isolated from enrichment cultures obtained from the contaminated soil samples. Twenty-two strains showing these features were characterized genetically by amplified ribosomal DNA restriction analysis (ARDRA) and phenotypically by their colonial morphology and tolerance to high NaCl concentrations. Fifteen ARDRA groups were formed. Selected strains were analyzed by 16S rDNA sequencing, and Actinobacteria was identified as the main group found. Strains were also tested for their growth capability in the presence of different oil derivatives (hexane, dodecane, hexadecane, diesel, gasoline, toluene, naphthalene, o-xylene, and p-xylene) and different degradation profiles were observed. PCR products were obtained from 12 of the 15 ARDRA representatives when they were screened for the presence of the alkane hydroxylase gene (alkB). Members of the genera Rhodococcus and Gordonia were identified as predominant in the soil studied. These genera are usually implicated in oil degradation processes and, as such, the potential for bioremediation in this area can be considered as feasible.
The efficiency of bioremedation can be measured by the enumeration of microorganism, respiration rate and decomposition rate. The side-effect can be measured by using Daphnia, oyster larvae and rainbow trout. Oxygen transfer could be a problem in the on-site treatment. For these, hydrogen peroxide can be used for solvents such as benzenes. Oleophilic nitrogen and phosphorus can be added for the treatment of oil pollution. Mixed microbial population or pure culture can be used for the inoculum. The pure culture used is Pseudomonas and Phanerochate. Sometimes enzymes are added and Photodegadation is coupled to increase the efficiency. For the treatment of oil pollution residue on soil such as waste lubrication oil and machine oil sludges, top soil of 15cm∼20cm depth is plowed and oil residue with approximately 5% concentration is applied. The optimum pH range is 7∼8, the ratio of phosphorus to hydrocarbon is 1:800. Appropriate drainage is necessary. For the treatment of marine oil pollution residue, addition of oleophilic fertilizer is effective. Air pollutiant such as oder can be treated by bioremediation. In this case, biofilters or biosrubbers are used for the reactor.
The bioremediation potential of crude oil by Polyporus sp. S133 pre-grown in wood meal was investigated in two separate experiment trials; liquid medium and soil. The effect of three nutrients (glucose, polypeptone, and wood meal), oxygen flow, and some absorbent on the efficiency of the process was also evaluated. Degradation of crude oil in soil was significantly increased with an addition of oxygen flow and some absorbent (kapok and pulp). The highest degradation rate of crude oil was 93% in the soil with an addition of 10% kapok. The present study clearly demonstrates that, if suitably developed, Polyporus sp. S133 could be used to remediate soil contaminated with crude oil.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2003.04a
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pp.360-363
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2003
Bioremediation is often used for in situ remediation of petroleum-contaminated site. We studied the microbial degradation of hydrocarbon in an artificially diesel contaminated soil in laboratory microcosm. In control soil, about 30% of the initial TPH was diminished and the degradation of diesel oil was significantly enhanced by the addition of bioremediation agent (70% of TPH reduction).
Ogbeh, Gabriel O.;Tsokar, Titus O.;Salifu, Emmanuel
Environmental Engineering Research
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v.24
no.3
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pp.484-494
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2019
This paper presents a preliminary investigation of the optimum nutrients combination required for bioremediation of spent-engine oil contaminated soil using Box-Behnken-Design. Three levels of cow-manure, poultry-manure and inorganic nitrogen-phosphorus-potassium (NPK) fertilizer were used as independent biostimulants variables; while reduction in total petroleum hydrocarbon (TPH) and total soil porosity (TSP) response as dependent variables were monitored under 6-week incubation. Ex-situ data generated in assessing the degree of biodegradation in the soil were used to develop second-order quadratic regression models for both TPH and TSP. The two models were found to be highly significant and good predictors of the response fate of TPH-removal and TSP-improvement, as indicated by their coefficients of determination: $R^2=0.9982$ and $R^2=1.000$ at $p{\leq}0.05$, respectively. Validation of the models showed that there was no significant difference between the predicted and observed values of TPH-removal and TSP-improvement. Using numerical technique, the optimum values of the biostimulants required to achieve a predicted maximum TPH-removal and TSP-improvement of 67.20 and 53.42%-dry-weight per kg of the contaminated soil were as follows: cow-manure - 125.0 g, poultry-manure - 100.0 g and NPK-fertilizer - 10.5 g. The observed values at this optimum point were 66.92 and 52.65%-dry-weight as TPH-removal and TSP-improvement, respectively.
A psychrotrophic bacterium was isolated from oil-contaminated groundwater and identified as Rhodococcus sp. YHLT-2. Growth was observed at the temperature of 4 to $30^{\circ}C$. This strain degraded various petroleum hydrocarbons such as crude oil, diesel oil, and gasoline over the whole range of temperatures tested. The Rhodococcus sp. YHLT-2 was capable of growing even at $4^{\circ}C$, exhibiting 90% of oil biodegradation after 20 days. Degradation of crude oil occurred at low temperature in nature. This strain was also able to grow at 7% NaCl, and utilized not only short chain alkenes $(C_9\;to\;C_{12})$, but also a broad range of long chain alkenes $(C_{19}\;to\;C_{32})$ present in crude oil at $4^{\circ}C$. The Rhodococcus sp. YHLT-2 is expected to be of potential use in the in situ bioremediation of hazardous hydrocarbons under low-temperature and high-salt conditions.
The objective of this study was to survey the oil contamination around the Mountain Baegun at Uiwang city to obtain the preliminary data for bioremediation. For measuring the oil concentrations and physical properties from soil, we analyzed BTEX. TPH and pH, organic content, water content, pormeability coefficient, gravity, porosity and used the purge & trap method for analyzing BTEX. Using the Accelerated Solvent Extractor, we pretreated the samples and then analyzed TPH using GC-FID as soon as possible. From the analysis results, maximum concentration of TPH was 24.773mg/kg and BTEX was 101.7mg/kg. The results of TPH at the Mountain Baegun were higher than the enforcement standard of soil contamination(Korea) and the BTEX concentrations were also higher than the advisory standard of soil contamination(Korea). From these results, the Mountain Baegun may requires to remedy the oil-contaminated soil. In addition, we performed the field bioremediation test for five weeks at the Mountain Baegun using the microbial additives that were developed by our laboratory. From the results of the field test, we could find the about 95% of the oil was removed from the contaminated soil in five weeks. So we consider that it is the one of the useful solutions to remedy the oil-polluted site.
We evaluated the activity and abundance of the crude-oil-degrading bacterium Nocardia sp. H17-1 during bioremediation of oil-contaminated soil, using real-time PCR. The total petroleum hydrocarbon(TPH) degradation rate constants(k) of the soils treated with and without H17-1 were $0.103\;d^{-1}$ and $0.028\;d^{-1}$ respectively. The degradation rate constant was 3.6 times higher in the soil with H17-1 than in the soil without H17-1. In order to detect and quantify the Nocardia sp. H17-1 in soil samples, we quantified the genes encoding 16S ribosomal RNA(16S rRNA), alkane monooxygenase(alkB4), and catechol 2,3-dioxygenase(23CAT) with real-time PCR using SYBR green. The amounts of H17-1 16S rRNA and alkB4 detected increased rapidly up to 1,000-folds for the first 10 days, and then continued to increase only slightly or leveled off. However, the abundance of the 23CAT gene detected in H17-1-treated soil, where H17-1 had neither the 23CAT gene for the degradation of aromatic hydrocarbons nor the catechol 2,3-dioxygenase activity, did not differ significantly from that of the untreated soil($\alpha$=0.05,p>0.22). These results indicated that H17-1 is a potential candidate for the bioaugmentation of alkane-contaminated soil. Overall, we evaluated the abundance and metabolic activity of the bioremediation strain H17-1 using real-time PCR, independent of cultivation.
To evaluate the effects of microorganism agents on oil biodegradation, treatability and microcosm studies were conducted. Petroleum oil degrading bacteria were isolated from enriched cultures of oil-contaminated sediment samples using a mineral salts medium (MSM) containing 0.5% Arabian heavy crude oil as the sole carbon source. After a 5 day-incubation period using MSM, mixed microorganisms of three species (strains BS1, BS2 and BS4) degraded 48.4% of aliphatic hydrocarbons and 30.5% of aromatic hydrocarbons. Treatability and microcosm tests were performed in the three different treatment conditions (AO: Arabian heavy crude oil, AO+IN: Arabian heavy crude oil+inorganic nutrient, AO+IN+MM: Arabian heavy crude oil+inorganic nutrient+mixed microorganism agents). Among these, significantly enhanced biodegradation of aliphatic hydrocarbons were observed in AO+IN and AO+IN+MM conditions, without showing any different biodegradation rates in either condition. However, the degradation rates of aromatic hydrocarbons in an AO+IN+MM condition were increased by 50% in the treatability test and by 13% in the microcosm test compared to those in an AO+IN condition. Taken together, it can be concluded that mixed microorganism agents enhance the biodegradation of aliphatic and aromatic hydrocarbons in laboratory, a treatability test, and a microcosm test. This agent could especially be a useful tool in the application of bioremediation for removal of aromatic hydrocarbons.
Diesel oil-degrading bacterial strains were isolated from diesel oil contaminated soil and called HS series (HS1, HS2 and HS3). These strains were identified as Acinetobacter sp. (HS1) and Pseudomonas sp. (HS2 and HS3) based on Biolog test, cellular fatty acid composition, and 16S rDNA sequence analysis. These strains were coltivated in liquid minimal media containing 2% diesel oil, and diesel oil-degrading activity was measured. As result, all strains degraded over 70% of total diesel oil. But PAH (polycyclic aromatic hydrocarbon)- and pris- tane-degrading rate of these strain was below 20% of total PAH and pristane. The HS 1 strain showed highest hydrophobicity and low emulsifying activity among the experimental strains and high diesel oil-degrading activity. From the above-mentioned result, microcosm experiment was performed with the HS1 strain. The HS1 strain showed a degrading activity of over 80% of total diesel oil in microcosm test. And microbial activity was correlated to diesel oil-degrading activity. Therefore, it is suggested that the HS1 strains could be effectively used for the bioremediation for diesel oil.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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