본 연구에서는 녹차(Camellia sinensis)잎 추출물, 구아바(Psidium guajava)잎 추출물 그리고 장미(Rosa hybrida)꽃잎 추출물로 이루어진 식물추출 복합물(PEM381)에 대하여 제I형 알레르기 반응 억제 효능 및 생화학적 기전을 밝히기 위하여 COX 억제 활성, LO 억제 활성, compound 48/80에 의한 랫드 복강 비만세포의 탈과립과 히스타민 유리에 미치는 영향 그리고 수동피부아나필락시스 반응 억제효능을 측정하였다. 그 결과 PEM381은 5-LO $IC_{50}$ 값이 $14.11{\pm}0.51ppm$으로 나타났고, COX-1에 비해 COX-2를 선택적으로 억제하는 것으로 나타났다. 또한 PEM381은 compound 48/80에 의한 비만세포의 탈과립과 히스타민 유리를 농도 의존적으로 억제할 뿐만 아니라 수동피부아나필락시스 반응도 억제하였다. 이상의 결과로 PEM381은 알레르기성 비염, 아토피 피부염 및 기관지천식 같은 제I형 알레르기 질환에 대하여 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 생각된다.
Objectives: Rehmannia glutinosa pharmacopuncture solution (RGPS) was investigated to determine both its anti-allergic inflammatory effects on mast cells and its detailed mechanism of actions. Methods: We investigated whether RGPS suppress cytokines, enzymes, $Fc{\varepsilon}RI$ expression and $Fc{\varepsilon}RI$-mediated signaling in RBL-2H3 cells stimulated with anti-DNP IgE/DNP-HSA. The suppressive effects of RGPS on the levels of cytokines such as IL-$1{\beta}$, IL-6 and GM-CSF were measured using emzyme-linked immunospecific assay (ELISA). The mRNA expression levels of cytokines, enzymes (HDC2, COX-1, COX-2 and 5LO) and $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}{\beta}{\gamma}$ subunits were measured using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method. The activation of $Fc{\varepsilon}RI$-mediated signaling was examined using Western blot analyses. Results: RGPS suppressed production of proinflammatory cytokines (IL-$1{\beta}$, IL-6, and GM-CSF) in stimulated RBL-2H3 cells significantly (p < 0.05). RGPS also suppressed mRNA expression of inflammatory enzymes (HDC2, COX-1, COX-2, 5LO). In addition, mRNA expression levels of $Fc{\varepsilon}RI{\alpha}$, $Fc{\varepsilon}RI{\beta}$and $Fc{\varepsilon}RI{\gamma}$ were lowered by treatment with RGPS. Finally, RGPS prevented phosphrylation of Lyn, Syk, LAT, Gab2, PLC ${\gamma}1/2$, PI3K, Akt, cPLA2 and $I{\kappa}B{\alpha}$. Conclusions: RGPS effectively suppresses mast cell activations such as degranulation and inflammatory response via down-regulation of the $Fc{\varepsilon}RI$-mediated signaling pathways in IgE/Ag-stimulated mast cells.
The present study was conducted to investigate the anti-allergic reaction with Glycyrrhiza uralensis. We examined cell viability, $\beta$-hexosaminidase release, IL-4 and IL-13 mRNA expression from RBL-2H3 cell after pre-treatment with 0, 100, 250, 500, 1000${\mu}g/m{\ell}$ of Glycyrrhiza uralensis water extracts. Effects of Glycyrrhiza uralensis on the degranulation and pro-inflammatory cytokines (IL-4 and IL-13) expression were evaluated with $\beta$-hexosaminidase assay, and RT-PCR analysis. We observed that Glycyrrhiza uralensis concentrations from 100${\mu}g/m{\ell}$ to 1000${\mu}g/m{\ell}$ had no effect on cell survival. The release of $\beta$-hexosaminidase decreased significantly with all concentrations of Glycyrrhiza uralensis extracts. The expression of the IL-4 and IL-13 mRNA were decreased by Glycyrrhiza uralensis in dose-dependent manner. These results that Glycyrrhiza uralensis has an anti-histamin effects and controls IL-4, IL-13 secretion on allergic reaction.
Objectives : The objective of present study is to evaluate anti-inflammatory and anti-allergic effects of Perilla(Perilla frutescens; Labiatae, PF), the roots of Peucedanum praeruptorum(PP) and the root of Scutellaria baicalensis(SB) in vitro and anti-asthmatic effects of mixture of PF, PP and SB(PS) on ovalbumin (OVA)-induced asthma in BALB/c mice. Methods : Anti-inflammatory and anti-allergic effects were observed on the lipopolysaccharide(LPS) treated RAW 264.7 cells through Nitric Oxide(NO) production and RBL-2H3 cells through ${\beta}$-hexosaminidase. Anti-asthmatic effects were observed on the number of inflammatory cells in bronchoalveolar lavage fluid(BALF) and the level of IgE in serum on OVA-induced BALB/c mice. Results : The treatment of PF, PP and SB(12.5, 25, 50, $100{\mu}g/m{\ell}$) resulted in a significant inhibition of NO production in RAW 264.7 cells and mast cell degranulation in RBL-2H3 cells. Oral administration of PS(400mg/kg/day) resulted in a significant reduction in the numbers of eosinophils in BALF and level of IgE in serum. Conclusion : The oral administration of PS is effective in ameliorating the eosinophilic infiltration in vivo and thus can be a good therapeutic candidate for allergic asthma.
본 연구에서는 표고버섯(Lentinula edodes)을 자외선 조사를 통한 ergocaciferol (비타민 D2) 함량을 증진시킨 추출물을 이용하여 염증 및 알레르기 반응에 미치는 효과를 확인하였다. 표고버섯 추출물의 항염증 및 항알레르기 효능은 LPS로 활성화된 대식세포(RAW 264.7)와 PMA와 A23187에 의해 활성화된 비만세포(RBL-2H3)로부터 분비 또는 발현되는 TNF-α, IL-6, IL-1β, IL-4와 같은 cytokine과 histamine 분비량을 측정하여 관찰하였다. LPS에 의해 활성화된 대식세포에서 자외선 조사 표고버섯 추출물 처리에 의해 pro-inflammatory cytokine인 TNF-α와 IL-6의 분비량을 ELISA 방법으로 측정하였을 때 현저히 감소함을 확인하였고 mRNA 발현 또한 감소됨을 확인하였다. 비만세포에 자외선 조사 표고버섯 추출물과 PMA, A23187을 함께 처리한 경우 비만세포의 탈과립에 의해 분비되는 histamine의 양이 유의적으로 감소함을 확인하였고 IL-4의 발현양 또한 감소함을 확인할 수 있었다. 이상의 결과는 자외선 조사에 의해 비타민 D2 함량을 증진시킨 표고버섯 추출물이 염증과 알레르기 반응의 cytokine의 발현을 저해하는 것으로 보아 염증 및 알레르기 질환의 예방과 치료에 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Lorz, Laura Rojas;Kim, Donghyun;Kim, Mi-Yeon;Cho, Jae Youl
Journal of Ginseng Research
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제44권3호
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pp.453-460
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2020
Background: BIOGF1K, a fraction of Panax ginseng, has desirable antimelanogenic, anti-inflammatory, and antiphotoaging properties that could be useful for treating skin conditions. Because its potential positive effects on allergic reactions in skin have not yet been described in detail, this study's main objective was to determine its efficacy in the treatment of atopic dermatitis (AD). Methods: High-performance liquid chromatography was used to verify the compounds in BIOGF1K, and we used the (3-4-5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide method to determine its cytotoxicity in RBL-2H3 and HMC-1 cell lines. RBL-2H3 cells were induced using both anti-DNP-IgE/DNP-BSA and calcium ionophore (A2187) treatments, whereas HMC-1 cells were induced using A2187 alone. To measure mast cell degranulation, we performed histamine (enzyme-linked immunosorbent assay) and β-hexosaminidase assays. To quantify interleukin (IL)-4, IL-5, and IL-13 levels in RBL-2H3 cells, we performed quantitative polymerase chain reaction (PCR); to quantify expression levels of IL-4 and IL-13 in HMC-1 cells, we used semiquantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Finally, we detected the total and phosphorylated forms of extracellular signal-regulated kinase, p-38, and c-Jun N-terminal kinase proteins by immunoblotting. Results: BIOGF1K decreased the AD response by reducing both histamine and β-hexosaminidase release as well as reducing the secretion levels of IL-4, IL-5, and IL-13 in RBL-2H3 cells and IL-4 and IL-13 in HMC-1 cells. In addition, BIOGF1K decreased MAPK pathway activation in RBL-2H3 and HMC-1 cells. Conclusions: BIOGF1K attenuated the AD response, hence supporting its use as a promising and natural approach for treating AD.
본 실험에서는 MRF가 다량 존재하는 RBL-2H3 세포주에 다양한 PKC isotype별 억제제를 처리하여 in vitro상에서 Na, K-ATPase $\alpha$1L3를 이용한 pull-down assay와 RBL-2H3 세포를 이용한 membrane fractionation을 실시하였다. 그 결과 HRF는 in vitro에서 $\alpha$1L3와 결합한다는 사실을 재확인 할 수 있었고 실제 세포주 내에서 Na,K-ATPase와 결합한다는 것을 알 수 있었다. 사용한 약물로부터 PKC $\alpha,\;\beta,\;\delta$뿐 아니라 protein phosphatase 2B(PP2B)도 HRF와 $\alpha$1L3의 결합에 관여한다는 사실을 알 수 있었다. 또한 이들 PKC, PP2B에 의해 인산화된 HRF 분자는 cytosolic fraction으로 이행할 수 있으며 이러한 결과는 탈인산화된 HRF가 Na,K-ATPase와 결합하여 Na, K-ATPase의 기능을 조절한다고 추정할 수 있다. 그러나 약물자체가 histamine 분비에 영향을 미칠 수 있으며 cytosolic HRF보다 exocytosis된 HRF가 histamine를 더 분비하도록 할 수 있으므로, 약물을 전처리한 세포에 외부에서 HRF를 첨가하여 histamine이 유리되는 정도가 어떻게 변화하는지를 HRF를 가하지 않은 결과와 비교해야 할 것이다.
본 실험에서는 HRF의 조절단백질을 알아보기 위해 HRF를 bait로 한 yeast two hybrid assay를 실행한 결과 해당과정에 관여하는 TPI(triosephosphate isomerase)라는 효소를 발견하였으며, 가장 많이 중복되어 있었다. In vitro에서 HRF는 TPI의 C말단 잔기 부근(아미노산 156-249)이 상호작용에 주로 관여하는 부위임을 알 수 있었다. 또한, HeLa 세포에서 immunoprecipitation을 이용하여 HRF와 TPI의 상호작용이 실제 in vivo에서도 일어나는 현상이라는 것을 밝혔다. 결과적으로 HRF와 TPI 상호작용은 세포내 일정량이 존재하며 여러가지 신호전달에 의해 동시에 Na,K-ATPase와도 상호작용하는 것으로 생각된다.
This experimental research has been done to study the effects of Gmibojungikgi-tang(GBJIKT) on the anti-allergic reaction. We found the several important results from the research which has been performed by two experiments toward immediately type and delayed type in order to study the effects of GBJIKT on hypersensitivity response to mice. The results obtained from our research are as following: The survival rate of one group to which we injected only the compound 48/80 is almost 0% according to its density and timing test. In the other hand, the survival rates of the other group to which we injected both of the compound 48/80 and GBJIKT are 10%, 10%, 20%, 30%, 20%, and 40% according to 0.025, 0.05, 0.1, 0.25 0.5 and 1(mg/g) of compound 48/80. Time dependency test also shows the 0% survival rates in 5 and 10 minutes. GBJIKT revealed the significantly inhibitory effect on Compound 48/80 induced Mast cell degranulation. GBJIKT showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to picry1 chloride GBJIKT showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to sheep red blood cell. Our research provides the important evidence that GBJIKT is benificial to the prevention and treatment of allergy related diseases.
This experimental research has been done to study the effects of Sipjeondaebo-tang(SOT) on the anti-allergic reaction. We found the several important results from the research which has been performed by two experiments toward immediately type and delayed type in order to study the effects of SDT on hypersensitivity response to mice. The results obtained from our research are as following. The survival rate of one group to which we injected only the compound 48/80 is almost 0% according to its density and timing test. In the other hand, the survival rates of the other group to which we injected both of the compound 48/80 and SDT are 20%, 10%, 30%, 10%, 40% and 70% according to 0.025, 0.05, 0.1, 0.25 0.5 and 1 (mg/g) of compound 48/80. Time dependency test also shows the 30% and 20% survival rates in 5 and 10 minutes. SDT revealed the significantly inhibitory effect on Compound 48/80 induced Mast cell degranulation. SDT showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to picry1 chloride. SDT showed the significantly inhibitory effect in the delayed type hypersensitivity response to sheep red blood cell. Our research provides the important evidence that SDT is benificial to the prevention and treatment of allergy related diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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