• Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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• 제35권3호
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• pp.143-154
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• 2013

Purpose: This study was to find efficacy of integrin alpha2 (${\alpha}_2$) and epidermal growth factor receptor (EGFR) as tumor marker of oral squamous cell carcinoma (SCC) and clarify the selective cell death effect of anti-integrin ${\alpha}_2$ and anti-EGFR on SCC cells, additionally testify conjugated gold nanoparticles (GNP) with air plasma for selective cell death of oral SCC. Methods: Expression of integrin ${\alpha}_2$, EGFR on human SCC cells (SCC25) were examined by western blot. SCC25 cells were treated with anti-integrin ${\alpha}_2$, anti-EGFR and analysed by Hemacolor staining, immunoflorescence staining, FACS flow cytometry. Conjugated GNP with integrin ${\alpha}_2$, EGFR antibody were treated by air plasma on SCC cells. Results: Integrin ${\alpha}_2$ and EGFR were over-expressed on SCC25 cells than normal lung WI-38 cells. The cell viability rate of SCC25 cells treated with anti-integrin ${\alpha}_2$, anti-EGFR was lower than WI-38 cells. The concentration changes of nucleus, releasing cytochrome c and apoptosis inducing factor (AIF) from mitochondria to cytosol were observed. The changes of proteins related with apoptosis were observed. Increase of bax, bcl-xL, activation of caspase-3, -7, -9, and fragmentation of PARP, DFF45 and decrease of lamin A/C in SCC25 cells were observed. In FACS, increase of sub-$G_1$ and S phase was observed. Cell cycle related proteins, Such as cyclin D1, cyclin dependent kinase (CDK) 4, cyclin A, cyclin E, CDK 2, p27 were decreased. After SCC25 cells treated with conjugatged GNP-Integrin ${\alpha}_2$, GNP-EGFR, additionally air plasma, the cell death rate was significantly increased. Conclusion: Integrin ${\alpha}_2$, EGFR were over-expressed in oral SCC cells. Anti-integrin ${\alpha}_2$, anti-EGFR in SCC25 cells induced apoptosis selectively. When GNP-anti integrin ${\alpha}_2$, GNP-anti EGFR were treated with air plasma on SCC25 cells, cancer cells were died more selectively. GNP-anti integrin ${\alpha}_2$, GNP-anti EGFR with air plasma could be treatment choice of oral SCC.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제15권1호
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• pp.55-66
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• 1998

사람과 동일한 증상을 나타내는 동물 모델이 없는 신증후출혈열의 병리 기전을 이해하기 위하여 in vitro culture system을 이용하였다. 신증후출혈열의 주된 병변이 혈관내피세포외에 섬유아세포가 많이 존재하는 신세뇨관 간질 및 폐간질임을 기초로 하여 계태아와 Mongolian gerbil의 섬유아세포에서 fibronectin에 대한 수용체인 ${\alpha}_5{\beta}_1$, integrin에 대한 항체를 처리하여 한탄바이러스 감염에 대한 영향을 관찰하였다. 초대 배양하여 사용한 계태아 섬유아세포 및 MGF 모두 한탄바이러스가 잘 감염되었으나 계태아 섬유아세포에 비하여 MGF에서 바이러스의 증식이 더 우수하였다. 계태아 섬유아세포와 MGF에서 ${\alpha}_5{\beta}_1$, integrin에 대한 항체 처리 5일 후 바이러스의 N 단백의 역가는 항체를 처리하지 않은 대조군에 비하여 각각 32.6%, 72.6%로 virion의 역가는 26.8%, 28.7%로 감소하여 두 세포에서 모두 감염력을 가진 바이러스의 양은 거의 동일하게 감소 되었다. 또한 ${\alpha}_5$ subunit와 ${\beta}_1$, subunit에 대한 항체를 MGF 세포에 처리한 후 바이러스의 N단백의 역가는 65.2%, 59.7%로 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin에 대한 항체 처리하였을 때(72.6%)와 거의 유사하게 감소하였고 감염력을 가진 바이러스의 양도 26.5%, 29.4%로 감소하여 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin에 대한 항체 처리시(28.7%)와 거의 유사하게 감소하였다. 이러한 결과는 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin이 한탄바이러스에 대한 수용체로써 작용할 가능성을 시사하였으며 또다른 기전으로는 ${\alpha}_5{\beta}_1$ integrin의 차단에 의한 이차적인 영향으로 한탄바이러스의 증식에 커다란 영향을 미치는 것을 생각할 수 있었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제17권4호
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• pp.409-420
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• 2013

Human serum (HS) has been reported to induce aggregation of human eyelid adipose-derived stem cells (HEACs) during high-density culture in vitro. The present study focused on the role of cell adhesion molecules and gelatinases during HS-induced aggregation of HEACs. HS-induced aggregation occurred between 9-15 days of culture. Cells aggregated by HS medium (HS-agg) showed stronger expression of ${\alpha}2$, ${\alpha}2B$, ${\alpha}X$, and CEACAM1 genes compared to non-aggregated cells in HS medium (HS-ex) or in control FBS-cultured cells. HS-agg were distinctly labeled with antibodies against ${\alpha}2$, ${\alpha}2B$, and ${\alpha}X$ proteins. Western blot results demonstrated that the two integrin proteins were greatly expressed in HS-agg compared to HS-ex and control FBS-cultured cells. Treatment of HEACs with anti-integrin ${\alpha}2$ antibody during culture in HS medium delayed aggregation formation. HS-agg exhibited strong expression of MMP1 and MMP9 compared to HS-ex or FBS-cultured cells. Conditioned media from HS-culture showed remarkable increase of MMP9 gelatinolytic activity in comparison to those from FBS-culture. However, there was no change of TIMP mRNA expression in relation to the HS-induced aggregation. Based on these results, it is suggested that integrin ${\alpha}2$, ${\alpha}2B$, and ${\alpha}X$, and MMP9 might play an important role in the HS-induced aggregation of HEACs.

• 대한두경부종양학회지
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• 제13권2호
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• pp.169-179
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• 1997

서론 : Laminin의 수용기로 알려진 Integrin $\alpha6\beta4$의 세포내 표현 정도는 편평상피암을 위시한 여러 악성종양의 전이능력 및 예후와 밀접한 상관관계가 없다고 알려져 있다. 이 Integrin은 Laminin과 같은 세포와 리간드와 결합하면 상피세포의 기저막 지주 구조물인 hemidesmosome의 세포체질 요소(cytoskeletal element)와 연관되어 그 결과 세포의 기저막과 세포내 케라틴을 연결하는 역할을 한다. Integrin $\alpha6\beta4$는 구조적으로 다른 많은 integrin들과 달리 $\beta$4의 세포질내 영역(cytoplasmic domain)이 특징적으로 크다. 이 세포질내 영역 $\beta$4 integrin의 기능은 아직 밝혀지지 않고 있으나 아마 세포 성장의 신호전달 및 악성종양의 특징인 침윤 전이에 관련할 것으로 보아지고 있다. 재료 및 방법: 저자들은 우선 $\beta$4 integrin의 wild type s-DNA와 $\beta$4 세포질내 영역(cytoplasmic domain) 및 $\beta$4의 tyrosine 인산화 반응 부위가 각각 결손된 c-DNA를 PCR을 통하여 합성하여 pRc/CMV 벡터에 삽입한 후 원래 $\beta$4 integrin의 발현이 결집된 인간 방광암 세포에 Calcium phosphate precipitation 방법으로 주입(transfection)시켜 형질변환된 세포를 면역형광법, Flow cytometry 및 Immunoprecipitation 방법으로 클로닝하여 wild type $\beta$4-full length(Clone FL), truncated $\beta$4-cytoplasmic domain(C1one CD), 및 mutated $\beta$4-tyrosine phosphorylation site (Clone M)을 얻었다. 암 세포의 부착 및 침투 능력의 기능적 연구로 모노 클로날 항체와 fibronectin, laminin, Matrigel을 단백질 기질로 사용하였으며 결과 비교를 위하여 pRc/CMV 벡터만 주입시켰던 클로운과 방광암 세포주를 $\beta$4 integrin 음성 대조군으로 또한 이 Integrin의 높은 발현을 보이는 두경부 편평상피암 세포주를 양성 대조군으로 이용하였다. 결과 : 세포부착능력에 있어서 온전한 $\beta$4 cytoplasmic domain이 존재하는 클로운이 laminin에 강한 부착능력을 보였으나 fibronectin의 부착정도는 $\beta$4 integrin의 표현정도와 관계없이 모든 클로운에서 비슷하였다. Matrigel을 투과하는 암세포 침윤 능력에서는 $\beta$4 integrin의 표현이 존재하는 클로운들이 투과 능력이 높았으나 세포외 리간드가 없는 control membrane을 사용하였을 때와 비교하여 투과능력의 차이를 보이지 않았다. 결론 : 유전자 주입(transfection) 방법으로 integrin의 다양한 클로운의 합성이 가능하여 이 Integrin의 암 세포의 부착 및 침투 능력에서의 기능을 규명 할 수 있게 한다. $\beta$4 integrin은 편평상피 암세포의 부착에 있어서 세포외 리간드 laminin과 특이 결합하여 부착 능력을 높이는 중요한 역할을 하며 편평상피 암세포의 침투에 있어서는 $\beta$4 integrin의 표현이 침투 능력을 높이는 역할을 하나 이때에는 laminin과 같은 리간드와의 특이 결합에 의존하지는 않는 것으로 사료된다.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제33권1호
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• pp.35-40
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• 2008

고농도 세포외 포도당이 치주인대세포의 integrin 발현과 cathepsin-B 및 -L의 발현에 미치는 영향을 살펴보기 위하여 사람 치주인대로부터 일차배양을 통해 얻은 치주인대세포를 1,000 mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액(대조군)과 4,500mg/L 농도의 포도당이 포함된 배양액(실험군)으로 나누어 24시간과 48시간 배양하였다. 그 후, RT-PCR을 통하여 integrin, cathepsin-B 및 -L의 발현을 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 대조군에 비해 실험군에서 ${\alpha}5$ intergrin 발현이 증가하였다. 2. Cathepsin-B는 24시간 배양 실험군에서 발현이 증가하였으나, 48시간 배양후에는 발현이 감소하였다. 3. Cathepsin-L은 24시간과 48시간 배양군 모두에서 대조군에 비해 실험군에서 발현이 감소하였다. 이상의 결과로 보아, 고농도 포도당 조건은 치주인대세포의 integrin 발현을 증가시키며, 이는 세포활성에 영향을 미쳐 치주조직의 재생을 지연시킬 것으로 추측된다. 또한, 이 과정은 cathepsin 발현의 감소로 인해 촉진될 것으로 생각된다.

• Molecules and Cells
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• 제40권5호
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• pp.355-362
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• 2017

The ${\beta}2$ integrins are cell surface transmembrane proteins regulating leukocyte functions, such as adhesion and migration. Two members of ${\beta}2$ integrin, ${\alpha}M{\beta}2$ and ${\alpha}X{\beta}2$, share the leukocyte distribution profile and integrin ${\alpha}X{\beta}2$ is involved in antigen presentation in dendritic cells and transendothelial migration of monocytes and macrophages to atherosclerotic lesions. ${\underline{R}}eceptor$ for ${\underline{a}}dvanced$ ${\underline{g}}lycation$ ${\underline{e}}nd$ ${\underline{p}}roducts$ (RAGE), a member of cell adhesion molecules, plays an important role in chronic inflammation and atherosclerosis. Although RAGE and ${\alpha}X{\beta}2$ play an important role in inflammatory response and the pathogenesis of atherosclerosis, the nature of their interaction and structure involved in the binding remain poorly defined. In this study, using I-domain as a ligand binding motif of ${\alpha}X{\beta}2$, we characterize the binding nature and the interacting moieties of ${\alpha}X$ I-domain and RAGE. Their binding requires divalent cations ($Mg^{2+}$ and $Mn^{2+}$) and shows an affinity on the sub-micro molar level: the dissociation constant of ${\alpha}X$ I-domains binding to RAGE being $0.49{\mu}M$. Furthermore, the ${\alpha}X$ I-domains recognize the V-domain, but not the C1 and C2-domains of RAGE. The acidic amino acid substitutions on the ligand binding site of ${\alpha}X$ I-domain significantly reduce the I-domain binding activity to soluble RAGE and the alanine substitutions of basic amino acids on the flat surface of the V-domain prevent the V-domain binding to ${\alpha}X$ I-domain. In conclusion, the main mechanism of ${\alpha}X$ I-domain binding to RAGE is a charge interaction, in which the acidic moieties of ${\alpha}X$ I-domains, including E244, and D249, recognize the basic residues on the RAGE V-domain encompassing K39, K43, K44, R104, and K107.

• 대한소아치과학회지
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• 제37권3호
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• pp.308-316
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• 2010

상아모세포는 부착분자들을 이용하여 기질에 부착하는 세포이며, 인테그린과 같은 부착분자들이 일련의 세포와 세포외기질을 인지하는 신호전달분자로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 상아모세포(MDPC-23 세포)와 I형 아교질과의 상호작용과 TGF-${\beta}1$과 TNF-${\alpha}$가 세포부착분자의 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 시행하였다. 본 연구에서 MDPC-23 세포는 농도의존적으로 I형 아교질에 부착했으며, 면역형광염색법에서 MDPC-23 세포가 아교질에 부착할 때, 국소부착점에서 인테그린 ${\alpha}1$, ${\alpha}2$, CD44, FAK 그리고 paxillin의 발현양상을 관찰할 수 있었다. 싸이토카인 TGF-${\beta}1$은 MDPC-23 세포의 아교질에 대한 부착성 및 인테그린 ${\alpha}1$, ${\alpha}2$와 chondroitin sulfate의 발현을 증가시켰으며, RT-PCR의 결과에서는 인테그린 ${\alpha}1$의 mRNA의 양이 TGF-${\beta}1$에 의해서 증가되었음을 확인하였다. 결론적으로 MDPC-23 세포는 아교질에 부착 친화성을 갖고 있으며, 부착 시에 인테그린 ${\alpha}1$, ${\alpha}2$와 CD44 그리고 chondroitin sulfate와 같은 부착분자들이 관여한다. 그리고 TGF-${\beta}1$은 인테그린 ${\alpha}1$, ${\alpha}2$ 그리고 chondroitin sulfate와 같은 부착분자의 발현을 증가시켰다.

• Journal of Microbiology
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• 제38권2호
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• pp.105-108
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• 2000

Oligonucleotide primers amplifying a 344 bp fragment on the integrin-like protein alpha-INT1p gene (${\alpha}$INT1) of Candida albicans were synthesized for screenign of C. albicans from clinicalsamples by the polymerase chain reaction (PCR). The PCR specifically amplified DNA from C. albicans and none from any other Candida, fungal, or human DNA in standard used here. The PCR assay showed that the primers (LH1 and LH2) were specific for 26 isolates of C. albicans from clinical smaples, whereas the positive fragment, 344 bp, was not amplified from 15 clinical isolates including 14 other medically important Candida species and an isolate of Saccharomyces cerevisiae. PCR was conducted on the urine samples of 20 patients and 4 samples were C. albicans positive. The detection limit of the PCR assay for C. albicans was shown to be approximately 10 cells/ml saline. The PCR system using 344 bp ${\alpha}$INT1 as a target is more specific and rapid than the conventional culture method, and the sensitive detection method is applicable to clinical diagnosis of C. albicans infections.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제17권3호
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• pp.305-311
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• 2014

Dieckol is a polyphenol compound isolated from brown algae that has anti-oxidant, anti-inflammatory, and anti-tumor activity. We examined the anti-angiogenic effects of dieckol in endothelial cells under hypoxic conditions. Treatment with $CoCl_2$, a hypoxic mimetic agent, increased proliferation, adhesion, migration, and tube formation in HUVECs, as well as vessel sprouting in rat aortic rings, which correlated well with increased expression of hypoxia-inducible factor 1-alpha ($HIF1{\alpha}$) and ${\beta}1$-integrin. Dieckol suppressed $CoCl_2$-induced adhesion, migration, and tube formation in HUVECs and vessel sprouting in rat aortic rings. Dieckol treatment decreased $CoCl_2$-induced overexpression of $HIF1{\alpha}$ and its downstream signaling molecules, including ${\beta}1$-integrin/Fak, Akt/eNOS, and p38 MAPK. These results suggest that dieckol is a novel angiogenesis inhibitor and a potential treatment for angiogenesis-dependent diseases in humans, such as malignant tumors.

• Molecules and Cells
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• 제24권2호
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• pp.240-246
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• 2007

The ${\beta}2$ integrins on leukocytes play important roles in cell adhesion, migration and phagocytosis. One of the ${\beta}2$ integrins, ${\alpha}X{\beta}2$ (CD11c/CD18), is known to bind ligands such as fibrinogen, Thy-1 and iC3b, but its function is not well characterized. To understand its biological roles, we attempted to identify novel ligands. The functional moiety of ${\alpha}X{\beta}2$, the ${\alpha}X$ I-domain, was found to bind plasminogen, the zymogen of plasmin, with moderate affinity ($1.92{\times}10^{-6}M$) in the presence of $Mg^{2+}$ or $Mn^{2+}$. The ${\beta}D-{\alpha}5$ loop of the ${\alpha}X$ I-domain proved to be responsible for binding, and lysine residues ($Lys^{242}$, $Lys^{243}$) in the loop were the most important for recognizing plasminogen. An excess amount of the lysine analog, 6-aminohexanoic acid, inhibited ${\alpha}X$ I-domain binding to plasminogen, indicating that binding is lysine-dependent. The results of this study indicate that leukocytes regulate plasminogen activation, and consequently plasmin activities, through an interaction with ${\alpha}X{\beta}2$ integrin.