This study was carried to identify a correct species and asses genetic diversity within the same species of Trametes spp. preserved in Division of applied Microbiology The morphological and cultural characteristics of preserved strains were observed through microscope and investigated on PDA, respectively. Contaminated isolates showed different growth rates, morphology and color of hyphae. We have reconstructed the phylogenetic tree of a select group of Trametes spp. using nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region(ITS) region. The phylogenetic tree was constructed by using the neighbor-joining method. PELF primers of 20-mer were used to assess genetic diversity of preserved isolates. Sequence analysis showed that five strains were different species and six strains were identified completely different nomenclature. According to the analysis of ITS sequences, the genus Trametes clustered into four distinct group, most of which correlated with species-groups identified by RAPD method. Seven isolates included TM 01 strain showed high similarity with Trametes versicolr, TM 07 and TM 10 high similarity with Trametes gibbosa, and TM 05 high similarity with Trametes elegans. But isolates collected in the United States was identified as T. junipericola. T. gibbosa and T. versicolor by RAPD analysis of genetic polymorphisms showed a very different band patterns and these strains showed different band patterns on areas. As the result of RAPD and ITS region sequences analysis for preserved isolates, it seems likely that 11 isolates of Trametes spp. may be need to reclassify or eliminate from preserved catalogue.
To clarify the taxonomic position for Astragalus nakaianus and provide correct scientific name for A. mongholicus cultivar in South Korea, we examined external morphological characters and sequence variations from ITS and five cp non-coding DNA regions. Genetic structure was also analyzed for 61 individuals from three populations using nine microsatellite loci. We found no significant difference between the South Korean cultivar and A. mongholicus var. dahuricus when morphology and ITS sequences were considered. Morphologically, A. nakaianus specimens varied somewhat from A. mongholicus var. mongholicus and var. dahuricus in habit, plant height, and lengths of leaf axis and leaflet. Although sequence data from ITS and cp noncoding DNA regions could not distinguished A. nakaianus from A. mongholicus, microsatellite analysis revealed strong structuring between the cultivar and A. nakaianus. Therefore, we conclude that the South Korean A. mongholicus cultivar should be treated as A. mongholicus var. dahuricus and that A. nakaianus should be merged into A. mongholicus as a variety, i.e., A. mongholicus var. nakaianus.
The extremely halophilic archaebacteriurn Haloarcular sp. EH-1 was isolated from solar salts. Halophages found in Haloarcular sp. EH-1 were isolated from fermented anchovy sauce. Halophages were isolated from fermented anchovy sauce using Haloarcular sp. EH-1 as a host bacterium. The isolated halophage produced 0.5∼l.0 mm in diameter clear plaques. The halophage consists of an symmetrical head, measuring 68 nm in diameter, and a contractile tail, 100 nm long and base plates were observed. Total size of phage DNA genome obtained 20 Kbp and its sequence homology was 52.87% with H. Salinarium.
Kim, Young-Dong;Kim, Ki-Joong;Kim, Sung-Hee;Kim, Hyeong-Tae
Korean Journal of Plant Taxonomy
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v.37
no.2
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pp.115-129
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2007
Using internal transcribed spacer (ITS) sequences and inter-simple sequence repeats (ISSRs) data, genetic diversity of a rare species, Hibiscus hamabo Siebold & Zucc. was examined for 3 populations in Jeju Island, Korea. A total of 14 nucleotide (excluding 3 ambiguous nucleotide) site variation in the ITS was observed from 18 individuals (Population 1, Hadori), which differed up to 13 bp in pair-wise comparison. On the contrary, the ITS sequences of all individuals in Populations 2 and 3 were identical. Genetic diversity estimates including Nei's gene diversity (h) generated by ISSR data were substantially high in Population 1 compared to other two populations. Low genetic variation in Populations 1 and 2 is considered due to genetic drift (bottleneck effect) and limited gene flow in these populations. Considering the differences in genetic diversity, protection of the Population 1(Hadori) is very critical for in situ conservation of Hibiscus hamabo in Korea. If ex situ conservation is required, making the full use of Population 1 will be most efficient.
Leaf-rolling moths were collected from soybean fields and identified as Matsumuraeses falcana and Matsumuraeses phaseoli by comparison with laboratory-reared species based on the nucleotide sequence (658 bp) of the mitochondrial cytochrome c oxidase 1 subunit gene (COX1). Ten haplotypes with 0.15-0.46% genetic distance from each other in COX1 were found in 47 samples of M. falcana, in which haplotype A was dominant (approximately 70%). Only one type of COX1 was found in 30 samples of M. phaseoli, and its sequence showed 4.11-4.61% genetic distance from those of M. falcana. Amino acid sequences translated from COX1 were identical in all samples of both species, and they showed synonymous substitutions. Larvae of both species caused damage to soybean leaves and pods and co-occurred simultaneously in the field. The average density of M. falcana was 1.5 times higher than that of M. phaseoli. The results clearly indicate that soybean was the host plant for both species. In addition, Elodia flavipalpis (Diptera: Tachinidae) was found to be a larval parasitoid of Matsumuraeses sp. through identification of the COX1 gene.
The phylogenetic relationships among thirty-two strains (P1~P32; including Cordyceps sp., Paecilomyces sp., Beauveria sp., Aranthomyces sp., Isaria sp. and Himenostilbe sp.) in Miryang region located in the southern part of Korea, were investigated based on internal transcribed spacer (ITS) sequences of ribosomal DNA. A fragment of ITS region was amplified by polymerase chain reaction (PCR) using the specific primer pairs ITS1 and ITS4. After obtained same size of PCR products from various strains, we cloned them into a pGEM-T easy vector to determine their sequences. BLAST analyses of the nucleotide sequence ITS1, 5.8S and ITS2 gene fragments revealed the identity and their phylogenetic relationship. Among 32 strains isolated from Miryang region, Cordyceps militaris was shared 100% sequences with Genbank (AY49191, EU825999, AY491992), while some species are not shared perfectly with reported sequences. For example, strain P17 (P. tenuipes in Ulju-gun Gaji Mountain) has some differences among the other strains of P. tenuipes (Miryang-si Jocheon-eup, Miryang-si Gaji Mountain) and those of gene bank. We conclude that ITS analyses with strains in the suburbs of Miryang in this study can be effectively used as a tool for classification, evaluation and collection of the natural eco-type genetic resources.
Kim, Mi-Jung;Lee, Jeongran;Kim, Jin-Won;Lee, In-Yong
Weed & Turfgrass Science
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v.7
no.1
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pp.15-21
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2018
Since sulfonylurea (SU) herbicide-resistant Monochoria korsakowii in Seosan reclaimed land in 1998 was reported first, herbicide-resistant weed species and their area of occurrence have been steadily increasing. In recent years, Sagittaria trifolia resistant to SU herbicides has been reported in Gimhae, Gyeongnam province. While collecting S. trifolia for constructing barcode database of major weeds we were suspicious by the continuous variation in the leave morphology of the species. In order to identify the S. trifolia from S. aginash we barcoded the species collected from domestic using ITS and compared the sequence variation with the ITS sequences of S. aginash downloaded from NCBI. As a result, it was found that the plants collected from the domestic did not have any variation among individuals although they showed wide morphological variation. On the other hand, interspecific variation between S. trifolia and S. aginash was 4.6%. Plants that are difficult to identify using morphological characters can be identified quickly and accurately using the barcode technique. Herbicide-resistant weeds may require different management practices depending on the species even in the same genus. Domestic herbicide-resistant weeds are steadily increasing. Therefore, accurate identification of these species must be preceded for effective weed control.
This study was carried out to decide ITS (internal transcribed spacer) sequence of some Korean native $Aster$ species and to resolve their relationship among Korean native $Aster$, including $Kalimeris$, $Gymnaster$, $Heteropappus$ genus separated from $Aster$ in a previously study based on the pappus length. We registered 11 ITS sequences of $Aster$ species including $A.$$glehni$ to GenBank and those sequences were used for the cluster analysis with $Kalimeris$ species. The size of ITS1 was varied from 248 to 256 bp, while ITS2 was varied from 220 to 222 bp. The G + C content of the ITS region ranged from 49.4 to 53.5%. Pairwise comparison results showed that the substitution rate of ITS1 and ITS2 region was 9% and 10%, respectively. $Kalimeris$ sensu strict substitution rate was lower than that of $Aster$ sensu strict species. The strict consensus parsimonious cluster analysis showed $A.$$tripolium$ is the first branching from the clade and the next is $A.$$scaber$. The $Kalimeris$ species except for the $A.$$hispidus$ were grouped into the same clade with high bootstrap value (91%) within $Aster$. $Gymnaster$ and $Heteropappus$ that has been classified by morphological characters were also grouped into broad sense $Aster$ clade. These results implied these three genera could be merged together into $Aster$ based on the ITS sequences.
Replication control region of pSBK203, a chloramphenicol acetyltransferase conferring plasmid from Staphylococus aureus was cloned and its nucleotide sequence has been determined. Base sequence homology of this copy control region with those of plasmids belonging to pT181 family was obtained and analyzed. Copy number of four copy mutants derived by addtion or deletion of nucleotides in unique XbaI recognition site in copy control region of pSBK203 was also determined.
Lee, Jeongran;Kim, Chang-Seok;Lee, In-Yong;Oh, Hyun-Ju;Kim, Jung Hyun;Kim, Sun Yu
Weed & Turfgrass Science
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v.4
no.1
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pp.26-34
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2015
Korean Poaceae includes approximately 80 species of the agricultural weeds. Precise species identification is the first step for more effective weed management in the agricultural fields. However, the identification of species in Poaceae is not easy without the assistance of taxonomists or identification experts although they are relatively easy to distinguish from the plants of the other family by the unique characteristics of caryopsis. Thus, DNA barcode was suggested as an alternative powerful technique for species identification by using short sections of DNA from a specific region of the genome. Two standard barcode markers of vascular plants, chloroplast rbcL and matK, and a supplementary nuclear ribosomal Internal Transcribed Spacer (ITS) region were used for barcode of major Korean Poaceae weeds, 403 individuals of 84 taxa. All the barcode markers revealed a good level of sequencing success with the lowest 73.7% for matK and the highest 88.8% for rbcL. The barcode sequences were deposited to the National Center for Biotechnology Information (NCBI) database for public use. Combined matK and ITS showed very high resolving power with 92.9%. Besides the identification of weeds for weed managment, the generated DNA barcode data could be used for many other applications such as rapid biodiversity assessment and conservation prioritization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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