Kim, Hyuk Soon;Jang, Jong-Hwa;Lee, Min Bum;Jung, In Duk;Park, Yeong-Min;Kim, Young Mi;Choi, Wahn Soo
BMB Reports
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제49권5호
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pp.293-296
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2016
The immunoregulatory cytokine Interleukin 10 (IL-10) protein is produced by various cells during the course of inflammatory disorders. Mainly, it downregulates pro-inflammatory cytokines, antigen presentation, and helper T cell activation. In this study, we show that the ratio of IL-10-producing cells was significantly increased in lineage negative (i.e., not T, B, or leukocyte cell lineages) cells than in lineage positive cells in lymphoid and peripheral tissues. We further observed that IL-10-producing innate lymphoid cells (ILCs), here called firstly ILC10, were increased in number in oxazolone-induced contact hypersensitivity (CHS) mice. In detail, IL-10-producing lineage negative cells were elevated in the axillary, inguinal lymph node, and ear tissues of CHS mice. Notably, the cells expressed classical ILC marker proteins such as CD45, CD127, and Sca-1. Altogether, our findings suggest for the first time that ILC10s are present in various physiological settings and could be involved in numerous immune responses as regulatory cells.
Immunological activities of the combined-administration of Acanthopanacis Cortex and Lycii Cortex Radicis were examined in BALB/C mice. The 40% ethyl alcohol extract of Acanthopanacis Corter (AE) or the 40% ethyl alcohol extract of Acanthopanacis Coriex and Lycii Cortex Radicis (ALE) were administered p.o. once a day for 7 days, respectively. AE did not affect the viability of thymocytes, but ALE decreased the viability of thymocytes. ALE enhanced the viability of splenocytes increased by AE. Also, AE enhanced the population of cytotoxic T cell in thymocytes, and ALE enhanced the population of helper T cell compared with AE. Furthermore, AE increased the population of $Thy1^+$ cells in splenocytes, and increased the population of splenic $CD4^+$ cells. In addition, ALE enhanced the phagocytic activity which was decreased by AE ALE decreased the production of nitric oxide increased by AE in peritoneal macrophages. These results suggest that ALE enhance an immune-regulative action of AE.
본 연구에서는 오리나무유래 HST의 T 세포 비활성화 효능을 확인하고 그 기전을 탐색하여 새로운 항아토피 천연소재로의 개발 가능성을 제시하고자 하였다. HST는 T 세포 mitogen으로서 anti-CD3 mAb가 처리 된 마우스 비장에서 Th 사이토카인(IL-2, IFN-${\gamma}$, IL-4, IL-5, IL-10)의 발현을 효과적으로 억제하였으며, T 세포 early activation marker인 CD25 유전자 발현이 INCA-6에서 매우 효과적으로 억제되는 것으로 보아, NFAT inactivator-유사 NFAT 탈인산화 억제 기전을 가지는 것으로 예측되었다. 또한 세포주기조절 단백질인 p21과 p27의 유전자도 HST에 의해 upregulation이 되어 효과적인 T 세포 증식 및 분화를 억제할 것으로 생각되었다. 이러한 세포주기조절 효과는 AD를 악화시키는 세균인 S. aureus 성장억제 실험에서 확인되어 향후 항박테리아 효능을 갖는 우수한 항아토피피부염 천연소재로서 HST의 활용 가치가 높을 것으로 판단된다.
Corticosteroids have long been used for anti-inflammatory, anti-rheumatoid and other purposes in hospital. These effects may be due to inhibit immune reaction. So the animal given corticosteroids was more susceptible to infection because of immunosuppressive effect of corticosteroids. The purpose of this study was to investigate the effects of prednisolone on the lymphocyte subset in the spleen, immunoglobulin in serum, spleen weight, thymus weight and total WBC in peripheral blood. Mice were randomized into 3 groups. Each group has 24 mice. The small dosage group were given by 4 mg/kg/day of prednisolone for 4 days and the large dosage group were given by 8 mg/kg/day respectively. Prednisolone was suspended in saline and orally administered. Mice in control group were given saline alone. Eight mice in each group were sacrificed every week after administration of predisolone. The weight of thymus and spleen were mesured immediately. Lymphocytes were taken from spleen and these cells were analysed by flow cytometry. Also the concentration of total immunoglobulins in serum were assayed by enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA). T cell, T-helper cell and T-cytotoxic cell were all significantly (P<0.05) decreased at 1 week after administration of predisolone and at 2 weeks they recovered similarly to that of control. Population of B cell showed various distribution. The concentration of total immunoglobulins in serum was not changed significantly. The weight ratio of spleen to body decreased significantly (P<0.05) during predisolone administration but increased at 1 week later, Eventually the weight ratio was recovered to that of control at 2 weeks. The weight ratio of thymus to body decreased significantly (P<0.05) by prednisolone and recovered gradually up to normal ratio 2 weeks later.
Han, Young-Woo;Aleyas, Abi G.;George, Junu A.;Yoon, Hyun-A;Lee, John-Hwa;Kim, Byung-Sam;Eo, Seong-Kug
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권12호
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pp.1955-1964
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2007
A recent report showed that analysis of CD154 expression in the presence of the secretion inhibitor Brefeldin A (Bref A) could be used to assess the entire repertoire of antigen-specific $CD4^+\;T$ helper cells. However, the capacity of intracellular CD154 expression to identify antigen-specific $CD8^+\;T$ cells has yet to be investigated. In this study, we compared the ability of intracellular CD154 expression to assess antigen-specific $CD8^+\;T$ cells with that of accepted standard assays, namely intracellular cytokine IFN-${\gamma}$ staining (ICS) and MHC class I tetramer staining. The detection of intracellular CD154 molecules in the presence of Bref A reflected the kinetic trend of antigen-specific $CD8^+\;T$ cell number, but unfortunately showed less sensitivity than ICS and tetramer staining. However, ICS levels peaked and saturated 8 h after antigenic stimulation in the presence of Bref A and then declined, whereas intracellular CD154 expression peaked by 8 h and maintained the saturated level up to 24 h post-stimulation. Moreover, intracellular CD154 expression in antigen-specific $CD8^+\;T$ cells developed in the absence of $CD4^+\;T$ cells changed little, whereas the number of IFN-${\gamma}$-producing $CD8^+\;T$ cells decreased abruptly. These results suggest that intracellular CD154 could aid the assessment of antigen-specific $CD8^+\;T$ cells, but does not have as much ability to identify heterogeneous $CD4^+\;T$ helper cells. Therefore, the combined analytical techniques of ICS and tetramer staining together with intracellular CD154 assays may be able to provide useful information on the accurate phenotype and functionality of antigen-specific $CD8^+\;T$ cells.
Yoon, Sun Young;Kang, Ho Bum;Ko, Young-Eun;Shin, Su-Hyun;Kim, Young-Jun;Sohn, Ki-Young;Han, Yong-Hae;Chong, Saeho;Kim, Jae Wha
IMMUNE NETWORK
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제15권2호
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pp.100-109
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2015
Controlling balance between T-helper type 1 (Th1) and T-helper type 2 (Th2) plays a pivotal role in maintaining the biological rhythm of Th1/Th2 and circumventing diseases caused by Th1/Th2 imbalance. Interleukin 4 (IL-4) is a Th2-type cytokine and often associated with hypersensitivity-related diseases such as atopic dermatitis and allergies when overexpressed. In this study, we have tried to elucidate the function of 1-palmitoyl-2-linoleoyl-3-acetyl-rac-glycerol (EC-18) as an essential modulator of Th1/Th2 balance. EC-18 has showed an inhibitory effect on the production of IL-4 in a dose-dependent manner. RT-PCR analysis has proved EC-18 affect the transcription of IL-4. By analyzing the phosphorylation status of Signal transducer and activator of transcription 6 (STAT6), which is a transcriptional activator of IL-4 expression, we discovered that EC-18 induced the decrease of STAT6 activity in several stimulated cell lines, which was also showed in STAT6 reporter analysis. Co-treatment of EC-18 significantly weakened atopy-like phenotypes in mice treated with an allergen. Collectively, our results suggest that EC-18 is a potent Th2 modulating factor by regulating the transcription of IL-4 via STAT6 modulation, and could be developed for immune-modulatory therapeutics.
El-Ahwany, Eman;Bauiomy, Ibrahim Rabia;Nagy, Faten;Zalat, Rabab;Mahmoud, Ola;Zada, Suher
Parasites, Hosts and Diseases
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제50권1호
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pp.29-35
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2012
The aim of the study is to characterize the phenotypes of $CD4^+$$CD25^+$ T regulatory cells within the liver granulomas and association with both Foxp-3 gene expression and splenic cytokines. Naive C57BL/6 mice were intravenously injected with multiple doses of the soluble egg antigen (SEA) 7 days before cercarial infection. The immunized and infected control groups were sacrificed 8 and 16 weeks post-infection (PI). Histopathology, parasitological parameters, splenic phenotypes for T regulatory cells, the FOXP-3 expression in hepatic granuloma using real-time PCR, and the associated splenic cytokines were studied. Histopathological examination of the liver revealed remarkable increase in degenerated ova within hepatic granuloma which decreased in diameter at weeks 8 and 16 PI ($P$<0.01). The percentage of T regulatory cells ($CD4^+$$CD25^+$) increased significantly ($P$<0.01) in the immunized group compared to the infected control at weeks 8 and 16 PI. The FOXP-3 expression in hepatic granulomas increased from 10 at week 8 to 30 fold at week 16 PI in the infected control group. However, its expression in the immunized group showed an increase from 30 at week 8 to 70 fold at week 16 PI. The splenic cytokine levels of pro-inflammatory cytokines, IFN-${\gamma}$, IL-4, and TNF-${\alpha}$, showed significant decreases ($P$<0.05) compared to the infected control group. In conclusion, the magnitude and phenotype of the egg-induced effects on T helper responses were found to be controlled by a parallel response within the T regulatory population which provides protection in worm parasite-induced immunopathology.
Alcohol is a major risk factor for several diseases and especially excessive, long-term alcohol consumption are caues the damage of immunity such as the inhibiton of secretion of lymphokine and proliferation of immune component cell. This study observed that the inhibition of T lymphocytic differentiation and secretion of interleukin 2(IL-2) induced in thymus of ICR mouse by chronic alcohol administration. After 8% alcohol voluntary administered for 120 days, the thymic tissue immunohistochemically stained by following ABC method that used monoclonal antibody including L3T4(CD4), Ly-2(CD8), and IL-2 receptor(CD25R) after embedding with paraffin. The results were as follows. 1. The size of thymic medulla in test group reduced than control group. 2. The number of helper T lymphocyte, cytotoxic T lymphocyte, and IL-2 receptor were decreased in thymic medulla and cortico-medullary junction of test group and the degree of CD4, CD8, and CD25R positive reaction were soften in test group. These results indicated that the secretion of IL-2 in thymus was inhibited by chronic alcohol administration and subsequently prevent to differentiate from thymocytes to T lymphocytes. As this view, cell mediated immunity were reduced by chronic alcohol administration.
AAV는 매우 안전하고 효율적인 유전자전달방법으로 인정되어 왔다. 그러나, AAV가 가진 생물의약품으로서 단점은 효율적이고 재현성 높은 생산법이 취약하고, 또한 다양한 혈청형을 간단한 한 가지 공통적 방법으로 신뢰성 있게 정량하는 방법이 개발되어야 하는 것이다. 따라서, 본 연구에서는 AAV2와 아데노바이러스를 동시에 감염하는 종래의 생산법에 의한 효율성과 새로운 생산법, 즉 AAV2 감염 후 pHelper 플라스미드를 transfection 하는 방법을 통한 생산효율성을 비교하였고, HEK293과 293T를 생산세포주로 하여 시간에 따른 생산효율성도 분석하였다. 그 결과 AAV2와 pHelper DNA를 포함한 새로운 생산법은 기존의 방법에 비해 10배 이상 높은 생산효율성을 보였고, 293T에서 AAV2를 10 MOI로 감염한 후 5일째에 가장 높은 생산효율성을 보였는데, 생산세포 한 개 당 $1.61{\times}10^5$ virus genomes (v.g.)을 생산하는 결과였다. 따라서 이 생산조건을 다른 혈청형 생산에 적용한 결과, 모든 혈청형에서 생산세포주 한 개 당 $10^5$ v.g. 이상을 생산하는 효율성을 보였다. 한편, 다양한 AAV 혈청형을 한 가지 공통적인 방법으로 정량하기 위해 the universal PCR 프라이머를 제작하였고, 그것을 이용하여 신뢰성 높고 10개 분자까지도 증폭이 가능한 결과를 모든 혈청형에서 얻었다. 그러므로 이 한 쌍의 정량용 the universal 프라이머는 임상시험용 아데노바이러스벡터에 존재하는 AAV오염을 검출하는 것에도 사용 가능하다.
This study was designed to investigate the effects of vitamin E supplementation on radical scavenger activity and immune responses in female judo athletes(n=18). The age and sex matched sedentary students were used as controls(n=15). The initial plasma vitamin E concentration, lipid peroxide level and radical scavenger activity (RSA) were not different between two groups. The supplementation of $\alpha$-tocopheryl acetate(400IU/d) for 4 weeks significantly increased plasma vitamin E concentration of the subjects in both groups. In addition, the decrease in thiobarbituric acid reactive substance(TBARS)(p<0.05) and enhancement of RSA(p<0.05) were observed in both groups. Percentages of total T-cells in the athletic group was lower than that in the control group(p<0.05). However, the ratio of CD4 / CD8(helper T-cal $l^pressor T-cell) was higher in the sports group, due to more decrease in CD8 subset than in CD4 subset. The concentrations of IgG and IgM in the sports group were significantly lower than those in the control group(p<0.05). Therefore, severe training of the athletic group seems to be associated with the changes of supplementation. In conclusion, vitamin E supplementation (400IU/d, 4 weeks) of the female university students improved antioxidative activities of the blood, by decreasing lipid peroxide and enhancing radical scavenger activity. Percentages of T lymphocytes and IgG and IgM concentrations in the athletic group were lower than those in the control group. Meanwhile, vitamin E supplementation had no effects on immune status in both groups.ps.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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