실험동물에서 곰피로부터 분리한 phlorglucinol은 acetaminophen의 투여로 현저히 증가된 간조직에 있어서 지질과선화의 함량을 억제하였다. Acetaminophen 투여에 따른 간 cytochrome P-450, aminopyrine N-deme-thylase 및 aniline hydroxylase 활성변동은 관찰할 수 없었다. 곰피 성분 투여군은 glutathione S-transferase의 활성에서는 대조군의 수준에는 미치지 않으나 효소의 활성이 acetaminophen 단독 투여군보다 현저히 증가되었다. 그리고 간조직중 glutathione의 함량은 phlorglucionl을 전처리군에서 acetaminophen 단독 투여군보다 증가되었다. Glutathione reductase 활성에서는 acetaminophen 투여군은 대조군보다 활성이 감소되었으며, 성분으로 전처리한 군은 acetaminophen 단독 투여군보다 증가 되었다. 따라서 곰피에서 분리한 페놀성화합물인 phloroglucinol은 acetaminophen 투여로 증가되던 지질과 산화함량을 감소시키며, acetaminophen 대사효소활성에서는 glutathione S-transferase의 활성이 증가되어 acetaminophen 의 대사를 촉진시키는 것으로 추정된다.
Glutathione S-transferase (GST) was purified from Pseudomonas sp. DJ77, and its N-terminal sequence was determined to be MKLFISPGACSL. A specific tyrosyl residue in the vicinity of the N terminus is conserved in all the known cytosolic GSTs and has been shown to function as a catalytic residue in $\alpha$, $\mu$, $\pi$ class GSTs from mammals. However, Pseudomonas sp. DJ77 GST has the Phe-4 and Ile-5 instead of Tyr in N-terminus. Its replacement with tyrosine did not significantly affect the enzyme activity. Results from in vitro biochemical analyses were confirmed by the in vivo activity-based CDNB growth inhibition analyses. Our results clearly indicate that GST of Pseudomonas sp. DJ77 has a novel reaction mechanism different from that of mammalian GSTs.
This study was carried out to examine if Haejohwan (HJ) inhibits oxidant-induced lipid peroxidation and therby produces protective effect against thyroxine-induced hyperthyroid rats. Triiodothyronine $(T_3)$, thyroxine $(T_4)$, lipid peroxidation, xathine oxidase activities and type conversion ratio were increased in thyroxine treated group. However, they were decreased in HJ extract's pre-applied group. Glutathione level, activities of glutathione peroxidase, glutathione Stransferase and glutathione reductase were decreased in thyroxine treated group. But, they were increased in HJ extract's pre-applied group. These results suggest that in thyroxine-induced hyperthyroid rats HJhas an increase in the activities of oxygen free radical scavenging enzymes and inhibition of xanthine oxidase activities, and prevents lipid peroxidation.
Induction of glutathione S-transferases is associated with cancer chemoprevention. We reported that PD98059, an MKK1 inhibitor, induces glutathione Stransferase A2 (rGSTA2). This report comparatively examines the role of CCAAT/enhancer binding protein (C/EBP) and Nrf-2 in the induction of rGSTA2 by PD98059. PD98059 at the concentrations effective for the inhibition of MKKI increased the rGSTA2 protein and mRNA levels in H4IIE cells. (omitted)
Glutathione S-transferase는 식물의 해독작용에 중추적인 역할을 하는 화학 효소이다. 본 연구에서는 제초제 검출 키트 개발에 응용을 위하여 식물 해독작용에 중추적인 역할을 하는 glutathione Stransferase의 고정화 방법을 연구하였다. Chloroacetanilide계 제초제에 높은 효소 활성을 보이는 벼 유래 OsGSTF3에 공유결합을 통한 polystyrene-alkylamine 비드와 리간드결합을 통한 agarose-aminoalkyl 비드,포괄법을 통한 Na-alginate 비드를 이용하여 고정화를 실시하였다. 정제된 OsGSTF3 10 mg을 사용하여 고정화 하였을 때 0.62 mg/g 비드로 polystyrene-alkylamine에 가장 효율적으로 고정화 되었다. 고정화 된 OsGSTF3의 효소 활성은 야생형의 30%를 나타내었으며, 재사용에 의한 효소활성 측정시 3회 까지 처음 활성의 80% 이상을 유지하였다.
Colorectal cancer is one of the leading causes of cancer death, both in men and women. This study investigated the effects of Amorphophallus campanulatus tuber methanolic extract (ACME) on aberrant crypt foci (ACF) formation, colonic cell proliferation, lipid peroxidative damage and the antioxidant status in a long term preclinical model of 1, 2-dimethylhydrazine (DMH) induced colon carcinogenesis in rats. Male Wistar rats were divided into six groups, viz., group I rats served as controls; group II rats treated as drug controls receiving 250 mg/kg body weight of ACME orally; group III rats received DMH (20 mg/kg body weight) subcutaneously once a week for the first 15 weeks; groups IV, V and VI rats received ACME along with DMH during the initiation, post-initiation stages and the entire period of the study, respectively. All the rats were sacrificed at the end of 30 weeks and the intestinal and colonic tissues from different groups were subjected to biochemical and histological studies. Administration of DMH resulted in significant ($p{\leq}0.05$) intestinal and colonic lipid peroxidation (MDA) and reduction of antioxidants such as catalase, glutathione peroxidase, glutathione reductase, glutathione-Stransferase and reduced glutathione. Whereas the supplementation of ACME significantly ($p{\leq}0.05$) improved the intestinal and colonic MDA and reduced glutathione levels and the activities of antioxidant enzymes in DMH intoxicated rats. ACME administration also significantly suppressed the formation and multiplicity of ACF. In addition, the DMH administered rats showed amplified expression of PCNA in the colon and decreased expression of this proliferative marker was clearly noted with initiation, post-initiation and entire period of ACME treatment regimens. These results indicate that ACME could exert a significant chemopreventive effect on colon carcinogenesis induced by DMH.
We investigated the effect of protein extract of Asterina pectinifera on the activity of 4 enzymes that may playa role in adenocarcinoma of the colon: quinone reductase (QR), glutathione Stransferase (GST), ornithine decarboxylase (ODC), and cyclooxygenase (COX)-2. QR and GST activity increased in HT-29 human colon adenocarcinoma cells increased that had been exposed to 4 concentrations of the protein extract (80, 160, 200, and $240{\mu}g/mL$). Additionally, 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-induced ODC activity decreased significantly in cells exposed to the extract in concentrations of $160{\mu}g/mL$ (p<0.05), $200{\mu}g/mL$ (p<0.005), and $240{\mu}g/mL$ (p<0.005). TPA-induced COX-2 activity also decreased in cells exposed to extract concentrations of 10, 20, 40, and $60{\mu}g/mL$. COX-2 expression was also inhibited in cells exposed to this extract. These results suggest that this protein extract of A pectinifera has chemopreventive activity in HT-29 human colon adenocarcinoma cells, and therefore, may have the potential to function as a chemopreventive agent in human colorectal cancer.
Six-week-old Sprague Dawley rats were fed the diets of 20% casein or soy protein. Two weeks after the feeding, hepatocellular chemical carcinogenesis was initiated by diethylnitrosamine(DEN), and promoted by the diet containing 0.01% 2-acetylamino-fluorene(AAF) and two-thirds partial hepatectomy(PH). The animals were sacrificed at 8 weeks after the DEN injection. The area of placetal glutathione S-trnasferase(GST-P) positive foci, the activities of several enzymes in cellualr antioxidant enzyme systems and glucose 6-phosphatase were determined to investigate the mechanism of the anticarcinogenic effect by the dietary proteins. In another set of experiments, the drinking water of rats fed casein was supplemented with 1.5% inositol hexaphosphate(InsP6) to elucidate whether it has the comparable anticancer action of soy protein. The area and number of GST-P positive foci in the soy protein group were significantly(p<0.05) lower than those inthe casein group. The livers of rats fed casein showed moderate fattydegeneration and larger hyperplastic nodules than those of rats fed soy protein. In another set of experiments, the area and number of GST-P positive foci in the rats fed casein supplemented with InsP6 were not significantly different from those in the rats fed casein or soy protein. The lipid peroxidation of rats fed different protein sources showed no significant difference. Glutathione S-transferase(GST) activities were increased significantly(p<0.05) by carcinogen treatment in all dietary groups. Glucose 6-phosphatase(G6Pase) activities were decreased by carcinogen treatment, and hence showed a reverse relationship(r=-0.695, p<0.01) to the GST-P positive foci. Therefore, the activities in the rats fed casein were lower than those in the rats fed soy protein. These results suggest that the soy protein seems to be more anti-carcinogenic than casein by decreasing the preneoplastic lesion and by increasing the membrane stability but inositol hexaphosphate, a component of soy protein, may not be protective against hepatocarcinogenesis.
매실(Prunus mune Sieb. et Zucc.)의 품종간, 그리고 수확기에 따라 매실추출물의 항산화력을 알아보기 위하여 본 실험을 수행하였다. 먼저 항산화력은 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH), thiocyanate, glutathione-Stransferase와 같은 화학적 방법과 생물학적 방법으로 mouse의 spinal cord culture system에 superoxide anion을 발생시켜 측정했다. 일반적으로 매실 에탄을 추출물은 항산화력을 갖고 있었으며 DPPH, thiocyanate방법에 있어서 butylated hydroxy toluene(BHT)와 비교하였을 때 옥영이 다른 품종보다 97.5%로 제일 높았으나 품종간에 유의성은 없었다. Glutathione-S-transferas방법으로 butylated hydroxy toluene(BHT)와 매실추출물의 항산화력을 비교해본결과 70% 이상의 강한 항산화력을 보여주었다. 생쥐의 척수신경세포 배양시 세포생존율은 옥영, 남고, 고전매추출물을 40 mg처리했을 때 각각 89, 79그리고 62%였고, 6린M의 glutathion을 처리했을때는 90%였다.
해당화 뿌리는 우리나라 민간에서 당뇨병 치료제로 사용되는 약용식물이다. Bromobenzene으로 간독성을 유발한 흰쥐에 뿌리에서 분리한 화합물인 (+)-catechin을 경구투여하여 bromobenzene대사계에 미치는 효소활성을 간독성 물질인 bromobenzene 3,4-oxide 생성에 관여하는 효소인 aminopyrine N-demetylase와 aniline hydroxylase와 독성 epoxide 대사중간체를 무독화 시키는 epoxide hydrolase와 glutathione S-transferase에 활성을 관찰하였다. (+)-Catechin의 투여가 aminopyrine N-demetylase, aniline hydroxylase 및 glutathione S-transferase에 활성에는 영향을 주지 못하였으나, epoxide hydrolase는 positive control로 사용한 ascorbic acid에 미치지 못하지만, bromobenzene 처리군 보다 39% 효소활성을 회복 시켰다. 따라서, (+)-catechin은 간독성 물질을 무독화시키는 epoxide hydrolase의 활성을 회복시켜 간보호 활성을 나타냄을 알 수 있었으며, 해당화에서 분리한 사포닌 성분인 rosamultin도 이효소의 활성을 증가시킴으로 인해 보호활성을 나타내는 것으로 보고된바 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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