• 한국균학회지
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• 제31권3호
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• pp.181-186
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• 2003

담자균류 80여종에서 laccase 고생산 균주(Fomitella fraxinea; 장수버섯)를 선발하고, F. fraxinea를 이용한 리그닌 분해효소의 생산 및 효소의 대량생산 조건을 검토하였다. 먼저 배지 조성에 따른 생산성을 조사한 결과 Cu등의 무기물의 첨가 유무에 따라 생산되는 효소가 달랐다. 무기물이 첨가되지 않은 배지(Medium I)에서는 manganese peroxidase가 생산되었고, 무기물이 첨가된 배지(Medium II)에서는 laccase가 생산되었는데 플라스크 배양 18일째에는 5.43 U/ml, 20일째에는 5.56 U/ml의 효소활성이 나타났다. 배양방법에서 영양이 충분한 조건에서는 정치배양보다는 진탕배양(120 rpm)에서 효소의 활성이 높았다. 이 균주를 이용한 laccase 대량생산 실험에는 jar fermentor, balloon type bioreactor, air-sparging fermentor를 이용하였다. laccase는 jar fermentor와 air-sparging formentor에서 3,540 U/ml(8일), 3,100 U/ml(6일)의 생산성을 나타내었다. Balloon type bioreactor는 균사의 생장은 좋았지만 효소는 생산되지 않았다. F. fraxinea를 사용하여 air-sparging fermentor로 scale up하여 laccase의 대량생산을 할 수 있다고 판단된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.228-234
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• 2006

장수버섯(Fomitella fraxinea)의 균사체 배양액으로부터 laccase를 생산하기 위한 최적 배양조건을 조사하였다. 복합 배지 중에서 MCM이 laccase의 생산에 가장 우수하였으며, laccase를 생산하기 위한 최적 배지조건은 탄소원, 질소원, 인산원 및 무기질원으로 각각 2% dextrose, 0.4% $(NH_4)_{2}HPO_4$, 0.05% $Na_{2}HPO_{4}{\cdot}7H_{2}O$ 및 0.05% KCl의 첨가에 의하여 효소의 생산이 가장 높았다. 따라서 E. fraxinea로 부터 laccase를 생산하기 위한 최적 배지조건은 2% dextrose, 0.4% $(NH_4)_{2}HPO_4$, 0.05% $Na_{2}HPO_{4}{\cdot}7H_{2}O$ 및 0.05% KCl 이다. 이상의 배지를 사용하여 배양온도 $25^{\circ}C$, 초기 pH 8.0에서 10일 동안 배양하였을 때 효소의 생산이 가장 증가함을 알 수 있었다. Staib agar plate 상에서 장수 버섯(Fomitella fraxinea) 균사체의 laccase활성여부를 확인할 수 있었으며 배양액 중의 효소 활성의 최적 pH와 온도는 pH 5.0과 $50^{\circ}C$ 이었다.

• 한국균학회지
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• 제26권2호통권85호
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• pp.275-280
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• 1998

장수버섯(Fomitella fraxinea)의 원형질체 분리와 재생에 영향을 미치는 요인을 조사하고자 본 연구를 수행하였다. 세포벽 분해 효소 종류별 원형질체 분리 시험을 수행한 결과 장수버섯 ASI 17001은 Novozym 234+Cellulase onozuka R-10+${\beta}-Glucuronidase$를 혼합하여 처리하였을 때 원형질체 분리율이 $8.9{\times}10^4/ml$로 가장 높았다. 원형질체 분리시 사용하는 삼투압 조절제로는 0.6 M sucrose가 가장 양호하였으며, 처리시간은 3시간이 가장 양호하였다. 원형질체 재생율은 0.6 M sorbitol에서 0.02%로 다른 조절제에 비하여 양호한 결과를 나타내었으나 KCl는 전혀 재생이 되지 않았다.

• 한국균학회지
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• 제29권1호
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• pp.67-71
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• 2001

민간약재로 사용되어지는 아카시재목 버섯(Fomitella fraxinea) 자실체의 에탄올 추출물로부터 ethyl acetate 추출, silica gel chromatography, preparative TLC 등의 방법으로 항산화 활성을 나타내는 steroid계 화합물, F-1을 분리 정제하였다. EI-Mass, FT-IR, $^1H$ 및 $^{13}C$ NMR 등 기기 분석에 의하여 F-1은 분자량이 412.65, 분자식이 $C_{28}H_{44}O_2$의 steroid 화합물, ergosta-7,22-diene-3-one-$16{\beta}-ol$임을 확인하였다. F-1의 지질과산화 저해활성은 $10^{\mu}g/ml$의 농도에서 86%의 지질과산화 저해활성을 나타내었으며, $IC_{50}$ 값은 $3.8{\mu}g/ml$이었다. 이 화합물은 항산화제인 ${\alpha}-tocoperol$과 유사한 항산화 활성을 나타내었다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제7권4호
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• pp.197-202
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• 2007

Background: Immunomodulators enhancing MHC-restricted antigen presentation would affect many cellular immune reactions mediated by T cells or T cell products. However, modulation of MHC-restricted antigen presentation has received little attention as a target for therapeutic immunoregulation. Here, we report that lectins isolated from mushroom Fomitella fraxinea enhance MHC-restricted exogenous antigen presentation in professional antigen presenting cells (APCs). Methods: Lectins, termed FFrL, were isolated from the carpophores of Fomitella fraxinea, and its effects on the class I and class II MHC-restricted presentation of exogenous ovalbumin (OVA) were examined in mouse dendritic cells (DCs) and mouse peritoneal macrophages. The effects of FFrL on the expression of total MHC molecules and the phagocytic activity were also examined in mouse DCs. Results: DCs cultured in the presence of FFrL overnight exhibited enhanced capacity in presenting exogenous OVA in association with class I and class II MHC molecules. FFrL increased slightly the total expression levels of both class I (H-$2K^b$) and class II (I-$A^b$) MHC molecules and the phagocytic activity of DCs. Antigen presentation-enhancing activity of FFrL was also observed in macrophages isolated from mouse peritoneum. Conclusion: Lectins isolated from the carpophores of Fomitella fraxinea increase MHC-restricted exogenous antigen presentation by enhancing intracellular processing events of phagocytosed antigens.

• 한국균학회지
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• 제26권1호통권84호
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• pp.69-77
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• 1998

버섯의 항산화 활성을 검색하기 위하여 63종의 버섯자실체를 80% 에탄올로 추출한 후 각각의 버섯추출물이 지질과산화반응, AO 및 SOD의 활성도에 미치는 효과를 관찰하였다. 테미로버섯(D. dickinsii), 뽕나무버섯(A. mellea) 및 아카시재목버섯(F. fraxineu)의 추출물이 간조직 microsome의 지질과산화반응을 억제시켰으며, A. mellea, D. dickinsii, F. fraxinea, 삼색도장버섯(D. tricolor), 송편버섯(T. suaveolens), 옷솔버섯(T. abietinum), 제주쓴맛그물버섯(T. neofelleus), 노란그물버섯(B. obscurecoccineus) 및 산그물버섯(X. subtomentosus) 등의 추출물은 간 세포질 내의 초산화 이온의 생성효소인 AO 활성을 크게 억제시켰다. 한편, D. tricolor, A. mellea, D. dickinsii, 및 F. fraxinea 등의 추출물은 간 세포질의 SOD의 활성을 증가시켰다. 이상의 결과로부터 특히 A. mellea, D. dickinsii 및 F. fraxinea로부터 항산화활성 성분의 분리정제 및 생리활성물질의 개발에 대한 가능성이 제시되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권4호
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• pp.325-331
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• 2002

아카시재목 버섯 균사체로부터 혈전용해효소를 생산하기 위한 최적 배양조건을 조사하였다. 복합배지 중 CVM이 가장 우수하였으며, 탄소원, 질소원, 인산원 및 무기질원으로 각각 2% galactose, 0.6% yeast extract와 0.1% $NaNO_3$, 0 0.1 % $K_2HPO_4$, 및 0.05% $MgSO_4$. $7H_2O$의 첨가에 의하여 효소의 활성이 가장 증가하였다. 따라서 F. fraxinea로부터 혈전용해효소를 생산하기 위한 최적 배지조건은 2% galactose, 0.6% yeast extract, 0.1 % $NaNO_3$, 0.1 % $K_2HPO_4$ 및 0.05% $MgSO_4$. $7H_2O$이다. 이상의 배지를 사용하여 배양온도 $25^{\circ}C$ 초기 pH 9에서 10일 동안 배양하였을 때 효소의 생산이 가장 높은 결과를 나타내었다. 배양액 중의 효소의 최적 온도 및 pH는 $40^{\circ}C$ 및 pH 10이었다. 본 효소의 활성이 PMSF와 aprotinin에 의하여 완전히 억제되는 것으로 보아 본 효소가 senne protease 계열의 효소임을 추정할 수 있었다.

• 한국균학회지
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• 제26권4호통권87호
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• pp.502-510
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• 1998

장수버섯 자실체로부터 분리된 강력한 항보체 활성 다당체인 FF-AP1을 정제하고 이것의 화학적 특성을 구명하기 위해 본 실험을 수행한 결과는 다음과 같다. ConA-Sepharose 4B affinity chromatography에 의해 FF-AP1은 $FF-AP1{\alpha}$와 $FF-AP1{\beta}$로 더 분리되었으며 이 중 항보체 활성의 주 유효 다당체인 $FF-AP1{\beta}$는 $10\;{\mu}g/ml$ 농도에서도 약 70%의 항보체 활성도를 나타내었다. $FF-AP1{\beta}$는 약 9.6%의 단백질을 함유한 산성다당체이며 glutamic acid와 aspartic acid의 함량이 상대적으로 다른 아미노산들에 비해 높았다. 이것의 분자량은 gel filtration법에 의해 15,000인 것으로 추정되었고 적외선 분광 분석에서 $890cm^{-1}$ 부근의 소peak를 탐지함으로써 ${\beta}$ glucosidic 결합의 존재를 확인하였다. Gas chromatography에 의한 구성당 조성 분석 결과, 주 구성당이 glucose, mannose, 및 galactose인 galacto-manno-glucan이었고, 소량의 rhamnose, xylose, fucose와 uronic acid도 탐지되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권4호
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• pp.670-675
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• 2008

A laccase was isolated from the culture filtrate of the basidiomycete Fomitella fraxinea. The enzyme was purified to electrophoretical homogeneity using ammonium sulfate precipitation, anion-exchange chromatography, and gel-filtration chromatography. The enzyme was identified as a monomeric protein with a molecular mass of 47 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and gel-filtration chromatography, and had an isoelectric point of 3.8. The N-terminal amino acid sequence for the enzyme was ATXSNXKTLAAD, which had a very low similarity to the sequences previously reported for laccases from other basidiomycetes. The optimum pH and temperature for 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) (ABTS) were 3.0 and $70^{\circ}C$, respectively. The enzyme also showed a much higher level of specific activity for ABTS and 2,6-dimethoxyphenol (DMP), where the $K_m$ values of the enzyme for ABTS and 2,6-DMP were 270 and $426{\mu}M$, respectively, and the $V_{max}$ values were 876 and $433.3{\mu}M/min$, respectively. The laccase activity was completely inhibited by L-cysteine, dithiothreitol (DTT), and sodium azide, significantly inhibited by $Ni^+,\;Mn^{2+}$, and $Ba^{2+}$, and slightly stimulated by $K^+$ and $Ca^{2+}$.

• 한국균학회지
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• 제23권4호통권75호
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• pp.340-347
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• 1995

Fomitella fraxinea의 자실체로부터 열수 추출법에 의하여 다당류를 추출한 뒤, 분획정제하여 다당류에 대한 물리화학적 특성 및 항암 면역 활성을 조사하였다. 정제된 다당류에서 소량의 uronic acid가 측정되었으며, 주 구성당으로서 glucose, fucose, galactose, 및 mannose 가 존재하였고, 소량의 xylose, arabinose, 및 rhamnose가 검출되었다 . FHW-Ib에서 단백질은 측정되지 않았으며, FHW-Ia는 분자량이 19,000인 fuco-gluco-mannogalactan으로 FHW-Ib는 분자량 15,000인 gluco-fuco-mannogalactan으로 각각 동정되었다. FHW -IIa 및 FHW-IIb에서는 소량의 단백질이 측정되었고, 아미노산 분석 결과 threonine, glutamic acid, serine, alanine 및 aspartic acid의 양이 비교적 높게 존재하였다. FHW-IIa 및 FHW- IIb 는 galacto-mannogIucan 이며 분자량은 각각 31,000 및 9,000이었다. FHW-Ib 와 FHW-IIb 의 IR spectrum분석 결과 이 두 다당류는 ${\beta}-type$이 아님이 밝혀졌다. 항암 면역 활성은 FHW-Ia, FHW-Ib, 및 FHW-IIa에서는 거의 없었고 FHW-IIb에서는 높았다.