식물 내생균 Bacillus sp. CY22는 식물병원균 Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum 및 Phythium ultimum에 대해 강한 항균력을 나타내었다. 일반적으로 많은 Bacillus속 균주들은 iturin, fengycin, mycosubtulin과 같은 항균 물질을 분비한다. 본 연구에서는 식물내생균 Bacillus sp. CY22의 배양액으로부터 항균물질을 분리, 정제하였으며 MALDI-TOF mass로 분자량을 확인하였다. MALDI-TOF mass spectrum분석 결과 분리된 항균물질은 Bacillus 속 균주가 생성하는 항균물질로서 잘 알려져 있는 iturin의 분자량과 거의 일치하였으며, m/z 1043.4, 1057.4, 1071.4에서 molecular ion peak를 나타내었다. 이들은 각각 m/z 14차이를 가진 iturin의 isoform으로 추정되며 이 것은 iturin을 구성하고 있는 지방산의 탄소수 차이로 생각되며 m/z 1065.4, 1079.4 peak는 sodium adduct로서 추정된다. 또한 항균물질 iturin을 생성하는데 관여하는 transacylase 유전자를 크로닝하여 ita22 유전자로 명명하고, 그 특성으로 ita22 유전자는 400 개의 아미노산을 인지하는 1,200 bp의 open reading frame (ORF)을 가지며, 아미노산의 상동성을 조사한 결과 Bacillus subtilis 168의 FenF (BAB69697)와 가장 유사하였다.
새싹삼의 곰팡이 발생을 조사하기 위해 18점의 유통중인 새싹삼을 수집하여 곰팡이 발생빈도를 분석하였다. 전체 시료의 총 곰팡이 발생빈도는 평균 113.3-174.1%였고 Penicillium spp.의 발생빈도가 가장 높았다. 곰팡이 발생빈도는 이끼가 잎, 줄기, 뿌리보다 유의하게 높았다. 잎과 줄기에서는 Penicillium spp.이, 뿌리에서는 Fusarium spp.의 발생이 높았으며 각각의 우점종은 P. olsonii와 F. oxysporum으로 동정되었다. 계통발생학적 분석을 통해 Fusarium spp.은 총 9개 종, Aspergillus spp.은 A. westerdijkiae와 A. favus, Penicillium spp.은 총 11개 종이 동정되었다. 곰팡이독소 생성 종으로 알려진 25균주의 독소형을 PCR로 검정한 결과 19점의 균주에서 각 독소형이 확인되었다. 이 중 A. flavus 2점과 A. westerdijkiae 11점이 aflatoxin과 ochratoxin A을 각각 생성하였고 일부 균주는 높은 독소생성능을 보였다. 이 결과는 새싹삼 생산에 있어 곰팡이 발생에 대한 지속적인 모니터링 및 관리방안이 필요함을 시사하였다.
2018년과 2019년에 강원도 여름 재배 무 포장에서 시들음병 발생이 조사되었다. 시들음병은 7월 상순 발생했고, 7월 하순과 8월 뜨거운 여름에 급속히 확산되었으며, 심한 경우, 일부 포장에서는 80%까지 발생하였다. 유묘기에 병든 무는 생육이 불량하고 뿌리 내부조직이 갈변되었다. 생육중기 동안 시간이 지나면서 병든 잎은 황화되고 뿌리표면은 흰색에서 흑색으로 변색되고, 도관조직은 갈변하였다. 병든 식물체로부터 23개 Fusarium균이 분리되었고, EF-1α와 IGS 염기서열 분석에 의해 Fusarium oxysporum f. sp. raphani로 동정되었다. 무와 다른 작물에 대한 인공접종에 의해 병원성이 검정되었다. 11개 품종 간에 차이는 있었으나 모든 균주들은 무에서 병원성이었다. 그러나 로켓, 방울양배추, 스토크, 순무를 포함하는 배추과 작물을 제외하고는 병원성이 없었다. 병원성 검정결과는 무 포장에서 시들음병을 방제하기 위해서는 배추과 채소 이외의 작물로 돌려짓기하는 것이 필요하다는 것을 나타낸다.
우리나라 참깨 수요와 재배면적은 해를 거듭할수록 증가하고 있으나 병해에 의한 저수량성은 참깨 증산에 큰 문제점이 되어 왔다. 참깨 병해중에도 입고병은 참깨발아 및 생육초기에 발생함으로써 입묘확보가 어려운 실정에 있었다. 현재까지 저항성 유전자원이 발견되지 않아 내병성품종 개발이 되어있지 않은 현실에서 약제처리로라도 방제할 수 있는 효과를 거두기 위하여 본시험을 실시하였다. 이에 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 참깨 입고병균인 Fusarium oxysporum f. vasinfectum과 Rhizoctonia solani의 접종은 밀배지를 사용하여 28$^{\circ}C$ C에서 20일간 균배양한 밀배지 10g을 토양 1kg에 골고루 섞어 포장 전면에 접종하는 것이 가장 효과적이었다. 종자소독 처리약제 중에서는 Benlate-T가 이병주율 4%, 10a당 종실중 40.7kg으로서 무처리의 이병주율 96%, 10a당 종실중 6.4kg에 비하여 높은 방제효과를 보였다. 2. 실내에서 풋트시험한 결과에서도 포장시험에서와 같이 Benlate-T는 이병주율 7%로써 무처리 100%에 비하여 높은 방제효과를 보였다. 3. 발아후 방제약제 분무처리 효과에서 Topsin M이 이병주율 19%로서 무처리 38%에 비하여 낮았으나 종자소독제 처리와 같은 입고병 방제효과는 없었다. 4. 종자소독제 처리후 25일에 살균제 분무처리한 종합처리 효과는 Benlate-T+Difolatan 처리구가 이병주율 3%로서 무처리 96%에 비하여 높은 효과를 보였으나 여기에서의 주효과는 Benlate-T의 종자소독처리 효과였다.
Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) and Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Foc), are the causal agent of Fusarium wilt disease of tomato and banana, respectively, and cause significant yield losses worldwide. A cost-effective measure, such as biological control agents, was used as an alternative method to control these pathogens. Therefore, in this study, six isolates of the Streptomyces-like colony were isolated from soils and their antagonistic activity against phytopathogenic fungi and plant growth-promoting (PGP) activity were assessed. The results showed that these isolates could inhibit the mycelial growth of Fol and Foc. Among them, isolate STRM304 showed the highest percentage of mycelial growth reduction and broad-spectrum antagonistic activity against all tested fungi. In the pot experiment study, the culture filtrate of isolates STRM103 and STRM104 significantly decreased disease severity and symptoms in Fol inoculated plants. Similarly, the culture filtrate of the STRM304 isolate significantly reduced the severity of the disease and symptoms of the disease in Foc inoculated plants. The PGP activity test presents PGP activities, such as indole acetic acid production, phosphate solubilization, starch hydrolysis, lignin hydrolysis, and cellulase activity. Interestingly, the application of the culture filtrate from all isolates increased the percentage of tomato seed germination and stimulated the growth of tomato plants and banana seedlings, increasing the elongation of the shoot and the root and shoot and root weight compared to the control treatment. Therefore, the isolate STRM103 and STRM104, and STRM304 could be used as biocontrol and PGP agents for tomato and banana, respectively, in sustainable agriculture.
The incidence of fungi and their possible contribution to low vigour were examined in a collection of ginseng (Panax quiquefolius) seed from Ontario. When examined after one winter of stratification in the field and storage at 4f for five months in the laboratory, the collection exhibited low vigour (plant stand 16.7% of seeding rate six weeks after seeding) and high incidence (94%) of discolored or soft seed. Fungi isolated (and incidence) from 1,304 endosperm halves recovered from surface-sterilized seed were, in order of abundance, Fusarium rostrum (22.2%), Chaetomium crispuum (14.3%), Funriud oxysporum (9.0%), Fusarium sdani (9.0%), iwmor sp. (8.4%), Alternaria sp. (8.1%), Zowieua lucotricha (7.8%), Cylindruarpn sp. (0.9%), Fusarium avenacmm (0.9%), and Vdudla iliata (0.4%). Most of these fungi, including known and potential pathogens of ginseng (species of Alerraria, Cylindrocarpon, Fusarium, and Trichodirma), were associated with both healthy and diseased seed. Application of Benlate (benomyl), Thiram (thiram), or UBI-2584 (tebuconazole) to seed caused slight to pronounced reduction in emergence and did not significantly affect plant stand six weeks after seeding. The study demonstrated the high level of infection by fungi, including known and potential pathogens of the cry, in an arbitrary collection of ginseng seed from commercial sources, and the phytotoxicity of the fungicides tested when applied to moist stratified seed. The lack of efficacy of the fungicides precluded determination of the contribution of seedborne fungi to low vigour of the seed.
This is the first study reporting the evaluation of transgenic lines of tomato harboring rice chitinase (RCG3) gene for resistance to two important fungal pathogens Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol) causing fusarium wilt and Alternaria solani causing early blight (EB). In this study, three transgenic lines TL1, TL2 and TL3 of tomato Solanum lycopersicum Mill. cv. Riogrande genetically engineered with rice chitinase (RCG 3) gene and their R1 progeny was tested for resistance to Fol by root dip method and A. solani by detached leaf assay. All the R0 transgenic lines were highly resistant to these fungal pathogens compared to nontransgenic control plants. The pattern of segregation of three independent transformant for Fol and A. solani was also studied. Mendelian segregation was observed in transgenic lines 2 and 3 while it was not observed in transgenic line 1. It was concluded that introduction of chitinase gene in susceptible cultivar of tomato not only enhanced the resistance but was stably inherited in transgenic lines 2 and 3.
Methanol extracts from 53 species of oriental medicinal plants in 34 families were tested for their fungicidal activities against Pyricularia grisea, Rhizoctonia solani, Phytophthora capsici, Phytophthora infestans, Collectotrichum dematium, Botryospaeria dothidea, Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, Botrytis cinerea, Puccinia recondita, and Erysiphe graminis. In in vitro study using impregnated paper disc method, the efficacy varied with both plant pathogen and plant species tested. Methanol extracts of Asarum sieboldii roots, Sinomenium acutum roots, Pinus densiflora leaves, Rheum undulatum root barks, Coptis japonica roots, and Phellodendron amurense barks showed potent fungicidal activities against the various pathogens when treated with 10 mg/disc. In a whole plant test, methanol extracts of P. densiflora leaves and roots and C. japonica roots were highly effective against a variety of plant pathogens. As a naturally occurring fungicide, P. densiflora- and C. japonica-derived materials could be useful as new fungicidal products against various plant diseases induced by plant pathogenic fungi.
To search for the antifungal substances, various actino-mycete isolates were obtained from various soils of Korea using plate dilution method on the humic acid vitamin agar plates. In the screening procedures using a dual culture method, 32 actionomycete isolates were selected, which showed the inhibitory activity against mycelial growth of plant pathogenic fungi Altirnaria mali, Colletotrichum gloeosporides, Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum, Magnaporthe grisea, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. Bioassay of the crude extracts from culture filtrates and mycelial mets revealed that 12 antagonistic actionomycetes produced highly active antifungal substances. Actinomycete strain S5-55 which showed the substantial antifungal activity against the tested fungi was selected for production of the antifungal substances. Based on the cytochemical and morphological characteristics, strain S5-55 was identified as a Streptomyces species. The results of the numerical identification using the TAXON program confirmed that Streptomyces strain S5-55 was identical with Streptomyces humidus including in TAXON major cluster 19. The production of antifungal substance was most favorable when S. humidus strain S5-55 was cultivated for 10 dats on soluble starch broth supplemented with $K_2$HPO$_4$. The antifungal substances active against the plant pathogenic fungi P. capsici and M. grisea were partially purified using $\textrm{C}_{18}$ reversed-phase column chromatography.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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