This study was conducted to investigate incidence of extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL) producing strains and characteristics of ESBL gene in pathogenic Escherichia coli isolated from poultry during the period from April 2003 to December 2005 in Korea. Among 203 isolates, 4 isolates (3 from broilers and 1 from layer) were confirmed as ESBL producing strains by double disk synergy test, polymerase chain reaction and sequencing for ${\beta}$-lactamase genes. $bla_{CTX-M-15}$ and $bla_{CMY-2}$ were detected in these 4 isolates and were transferred to recipient by conjugation, respectively. Also, these ESBL producing strains were associated with multiple drug resistance. In conclusion, these results exhibit incidence of CTX-M and CMY-2 ${\beta}$-lactamase in pathogenic E coli from poultry in Korea, and clinically important meaning in human. And they also suggest the needs for rapid and broad surveillance to monitor ESBL genes and R plasmid transferring resistant gene in poultry.
The emergence of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing bacteria is causing very serious problems in Korea. Although there have been many reports about these bacteria Isolated from patients and clinical specimens, there is no report of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing organisms isolated from natural environment in Korea. This study was conducted to investigate the biological characteristics and extended spectrum ${\beta}$-lactamase types of eighteen strains of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli isolated from a slaughterhouse in Pusan in Korea during 2002 to 2004. Extended spectrum ${\beta}$-lactamases were identified by double-disk synergy test, conjugation, isoelectric focusing values and gene sequencing. Eight strains of Klebsiella pneumoniae and two strains of Eschericha coli were isolated kom pigs and transferred extended spectrum ${\beta}$-lactamase genes to recipient Escherichia coli J53 (sodium azide resistant and ceftazidime senstive) strain by conjugation. The conjugants of extended spectrum ${\beta}$-lactamase genes were alignments and translated to amino acids by BCM and NCBI blast. Eight conjugants of Klebsiella pneumonae were typed TEM-52, and two strains of Escherichia coli, SHV-12, but CMY-1 type were not detected in this study.
The purpose of this study was typing the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ produced by enteric bacteria isolated from rivers in Pusan. Six strains of Eschericha coli and fifteen strains of Klebsiella pneumoniae transferred their plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes to the recipient strain Eschericha coli J53 $Azid^{R}$. The plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes were sequenced directly after PCR and the types were determined by the BCM Search Launcher and GenBank nucleotid database. Determined types of the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ were TEM-52 and SHV-12. TEM-52 was isolated from both Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. However SHV-12 was isolated from Klebsiella pneumoniae only. The results indicated that the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ producing bacteria spreded over the area of clinical to the nature in Korea.
A 2-year-old female Pomeranian dog was referred with multiple pelvic fractures. The surgical correction was performed for the fractures. However, after the surgery, purulent exudation was occurred in the surgical site. Antibiotic susceptibility test revealed that the isolated bacteria are resistant to penicillins, cephalosporins, aminoglycosides, quinolones, and trimethoprim/sulfamethoxazole. Bacterial identification and extended-spectrum $\beta$-lactamase (ESBL) confirming test indicated that the isolated bacteriae is ESBL-producing Klebsiella pneumoniae. Minimum inhibitory concentration (MIC) and maximum bactericidal concentration (MBC) tests revealed that meropenem, one of carbapenems, is the only effective antibiotic. The patient was treated with meropenem for 5 days. After 10 days, the exudation was disappeared and the infection was cured. The molecular typing of the ESBL revealed that TEM-1 ESBL is present in the bacteria isolated from the patient. The bacteria isolated from the owner's palm also revealed that TEM-1 and SHV-1 ESBLs are present.
The emergence of extended spectrum beta-lactamase(ESBL) producing bacteria is causing very serious problems in Korea. Although there have been many reports about these bacteria isolated from patients and clinical specimens, there is no report of ESBL-producing organisms isolated from natural evironment in Korea. This is the first study on the ESBL producing bacteria out of the medical system in Korea. Twenty-six ESBL producing bacteria were isolated only from sewerage plant drain water at Kwang-an beach among the sampling collected sites including snakehead fish plants in Myungi, Aquaculture Engineering Lab. in Pukyong National University and two public-bathrooms in Pusan, Korea. ESBL producing bacteria were identified by double-disk synergy test, conjugation, isoelectric focusing values and PCR. The species of ESBL producing bacteria were Enterobacter cloacae(4 strains), E. sakazakii(8 strains), Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae(8 strains) and K. pneumoniae subsp. ozaenae(6 strains). TEM and SHV specific PCR products were detected from all the ESBL strains produced TEM+SHV products on the PCR plates. The pI values of ESBL produced by Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, K. pneumoniae subsp. ozaenae, Enterobacter cloacae, and E. sakazakii were 5.9, 5.9+5.4; 5.9, $5.9+5.4;{\ge}8.5$, 8.0+5.4, and 8.0+5.4, respectively on the IEF. Seven strains of the isolates were transfered their genes to E. coli RG488 $Rif^r$ by conjugation.
Fifty-one extended-spectrum-${\beta}$-lactamase(ESBL) producing Klebsiella pneumoniae strains were isolated from national university hospitals. All K. pneumoniae strains showed resistance to broad-spectrum antibiotic and most of them presented resistance to amikacin, gentamicin and ciprofloxacin. The results of amplified polymorphic DNA (RAPD) pattern for randomly isolated fifty-one strains were as follows; both twenty-one strains from Chungnam National University hospital and ten strains from Chungbuk National University hospital showed RAPD type Ia and Ib. However, twenty strains isolated from Gyeongsang National University hospital belonged to RAPD type IIa and IIb. All isolates were divided into four molecular types and showed high level of genetic diversity. These results suggested that RAPD analysis provided a rapid and simple method for analysing genotypes of ESBL.
This study was performed to investigate the biological characteristics of twenty isolates of extended spectnlm $\beta$-lactamase (ESBL) producing Klebsiellapnezm~onia collected kom the various clinical specimens of three hospitals in Pusan. Isoelectric focusing (IEF) and PCR were used to determine the types of $\beta$-lactamase gene in this study. Twenty isolates of ESBL producing Klebsiellnp~ieun~or~iae could be divided by PCR, such as TEM type (I1 strains), SHV type (8 strains); non TEM non SHV type (1 strain). In the isoelechic focusing test, the PI of TEM type was 5.2-6.0 and that of SHV type was 6.9-7.4. According to the pI value and PCR bands, twenty strains of ESBL Klebsiellapneumoniae were divided into 5 types: TEM type @I 5.2-6.0; 1080 bp on PCR band), TEM + SHV type (pI 5.2-6.0; andpI 7.0-7.4; 1080 bp and 599 bp on PCR band), SHV type (pl7.0-7.4; 599 bp on PCR band), non TEM non SHV type, and otber type (PCR result was SHV type but pI was not detected).
This study focused on typing of the extended-spectrum $\beta$-lactamase (ESBL) produced in organisms isolated from a natural environment, rather than a clinical setting. Samples were collected from drain water issuing from a sewage plant in Kwanganri (Busan, Korea). Following double disk synergy testing, 29 strains were selected as potential ESBL positive strains. Of these, 15 strains were transconjugants of the sodium azide resistant recipient strain Escherichia coli J53 and analyzed biochemically including indole, methyl-red, Voges-Proskauer, Simmon's citrate, decarboxylase-dihydrolase and sugar-fermentation tests. The tests classified the 15 strains as Klebsiella pneumoniae (n=13) and Escherichia coli (n=2). The type of ESBL from each strain was deduced by isoelectric focusing point analysis and DNA sequencing. The results indicated that the types of ESBL were SHV-12 (n=4) and SHV-12/TEM-1 (n=9) from K. pneumoniae and TEM-1 (n=2) from E. coli strains.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.39
no.6
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pp.916-923
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2022
Water samples were collected from three spots(Namcheon, Changwoncheon and Cheongwoonji) in Changwon and genomic DNA was isolated from them. Quantitative PCR was performed with the isolated DNA as template and primers targeting five different class A extended-spectrum beta-lactamase(ESBL) genes(blaOXA-1, blaSHV, blaTEM, blaCTX-M-1, blaCTX-M-9). The number of total ESBL genes from each sample showed large variations between each sample. Thirty nanograms of DNA from Namcheon contained 1.93×106 copies of ESBL genes whereas the same amount of DNA from Changwoncheon contained 1.47×105 copies of ESBL genes. However, the same amount of DNA from Cheongwoonji pond contained only 9.5×103 copies of ESBL genes. The ratio of each ESBL genes showed little difference between Namcheon river and Changwoncheon river, but DNA from Cheongwoonji pond showed a large difference from the rest. blaOXA-1 gene was present at 65.3%, and blaCTX-M-1 gene 33.6% for Namcheon comprising together almost 99%. blaOXA-1 gene was present at 64.1%, and blaCTX-M-1 gene 19.1% for Changwoncheon comprising together over 83%. blaCTX-M-1 gene was present at 87.5% and blaCTX-M-9 genes 9.8% for Cheongwoonji, a pond which is a closed and isolated environment.
Ko, Daisik;Moon, Song Mi;Lee, Ji Sung;Park, Yoon Soo;Cho, Yong Kyun
Journal of Yeungnam Medical Science
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v.30
no.2
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pp.83-89
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2013
Background: The prevalence of extended-spectrum ${\beta}$-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli is increasing rapidly worldwide. Treatment options for ESBL-producing E. coli are limited, and infections caused by this organism are associated with improper antibiotic use, a long hospital stay, and increased mortality. Thus, the assessment and early recognition of the risk factors of nosocomial infections due to ESBL-producing E. coli are important for the infection control and proper treatment. Methods: A case-control study was performed that included nosocomial episodes of ESBL-producing E. coli bacteremia at a tertiary care hospital from January 2004 to December 2007. For each case patient, three controls were randomly selected and data on predisposing factors were collected. Results: Fifty-five cases of nosocomial ESBL-producing E. coli bacteremia were studied. Carbapenem usage (OR: 11.3, 95% CI: 1.1-115.9, p=0.041), quinolone usage (OR: 4.5, 95% CI: 1.1-18.8, p=0.042), biliary obstructive disease (OR: 11.8, 95% CI: 3.0-46.7, p<0.001) and the APACHE II score (OR: 1.3, 95% CI: 1.2- 1.5, p<0.001) were analyzed as independent risk factors of nosocomial ESBL-producing E. coli bacteremia. Conclusion: Our results showed that physicians caring for patients with risk factors of nosocomial bacteremia should consider ESBL-producing E. coli as the causative organisms of the disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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