호두껍질을 둘러싸고 있는 과피는 식품으로서 효율성이 떨어지지만, 생리활성물질로서 항산화 및 항균효과의 가치를 지니고 있다. 본 연구에서는 호두(Juglans regia L.)의 열매과피를 5종류 용매(methanol, n-hexane, ethyl acetate, n-butanol)로 추출하여 6종 추출물(MeOH Ex, Hexane Ex, CHCl3 Ex, EtOAc Ex, BuOH Ex, Water Ex)을 얻어, 총 폴리페놀과 총 플라보노이드함량을 특정하고, 항균 및 항산화 활성을 시험하였다. 각 추출물의 항균 활성 은 병원균 8종에 대해 최소억제농도를 한천희석법으로 측정하였고, 항산화 활성은 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)와 ABTS (2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)) 라디칼 소거능을 측정하여 EC50 값으로 평가하고, 총 플라보노이드 및 페놀함량과 상관관계를 분석하였다. 호두추출물 가운데 항균활성이 가장 우수한 것은 에틸아세테이트 추출물(EtOAc Ex)로서 Staphylococcus aureus SG511에 대해 3.2 mg/ml의 MIC을 나타내었 다. 또한, EtOAc Ex는 DPPH 및 ABTS 라디칼 소거 활성 EC50 값이 13.43 μg/ml과 41.83 μg/ml로 각각 나타내어 가장 우수한 항산화 활성을 보였다. 이러한 EtOAc Ex의 총 플라보노이드 및 페놀 함량은 각각 2.48 mg QE/g 및 223.25 mg GAE/g였다. 특히 총 페놀함량과 항균활성 및 항산화 활성은 양의 상관관계가 있어 추출액 속에 페놀함량이 높으면 생리활성도 높은 것이 확인되었다. 결론적으로 호두의 과피는 우수한 천연 항균 및 항산화 물질이 포함된 소재로서 이용 가능성을 제시한다.
To investigate the hair growth activity of fractions and extract of Arisaematis Rhizoma in the hair removed skin of normal and spontaneous alopecia areata model in C57B/6N mice. These experiments were performed with the macroscopic, microscopic, immunohistochemical(VEGF, c-kit, PKC-${\alpha}$, TGF and FGF) and RT-PCR(TGF-${\beta}$, IGF, prolactin and placenta lactogen) methods. The results were as follows: Macroscopic observation after topical application of vehicle, 50% EtOH as control and extract of Arisaematis Rhizoma to the hair removed skin of C57BL/6N mice on the 9th, 11th and 15th day. Extensive hair growth activity was observed in treated group with extract of Arisaematis Rhizoma on the 9th, 11th and 15th day. In Arisaematis Rhizoma extracts treated group, hair follicles of middle stage of anagen was observed and it were grown down to subcutaneous tissue of skin in all the normal mice on 15th day. But in control group, most of hair follicles of telogen phase was observed in skin. The treatment of extract of Arisaematis Rhizoma increased expression of IGF(145%) and placenta lactogen(108%) in the skin of normal C57BL/6N mice on the 11th day compared to control group(100%). But expression of TGF-${\beta}$(90%) and prolactin(91%) decreased in the skin of normal C57B/6N mice on the 11th day compared to control group(100%). After application of fractions(chloroform, ethyl acetate and water fractions) of Arisaematis Rhizoma extract for 9th day, hair growth effect was observed in whole skin area in 50% of normal mice. But in control group, hair growth effect was not observed in whole skin area of normal mice. Immunoreactive density of VEGF, c-kit, PKC-${\alpha$ and FGF in skin of fractions of Arisaematis Rhizoma extracts was strongly stained in epidermis, bulge, secondary hair germ cells, cutaneous trunci m., subcutaneous tissue, root sheath compare to control group on the 9th day. In spontaneous alopecia areata model, The hair growth activity of Arisaematis Rhizoma extrat treated group(75%) was observed to be strong compared to control group(O%) on 7th day. These experiments suggest that fractions and extracts of Arisaematis Rhizoma may stimulate the topical hair growth activity. Thus it can be useful for treatment of alopecia areata.
본 연구는 피부에 안전하고 부작용이 없는 식물성 원료를 이용한 항염 소재를 개발하여 피부 진정 및 여드름, 아토피 피부에 적용되어질 수 있는 피부 자극 완화제를 개발하고자 하였다. 이에 따라 전통적으로 염증 질환 치료에 사용되어진 오동나무(Paulownia coreana Uyeki)를 소재로 하여 오동나무 잎 추출물의 항산화 효능과 항염 효능을 알아봄으로써 화장품 원료로의 가능성을 확인하였다. EPR을 이용하여 오동나무 잎 추출물의 superoxide anion radical 소거능을 확인하였으며 대식세포주에서의 LPS 처리에 의해 유도되어지는 NO의 생성을 저해시키는 효능을 확인하였다. 그 결과 추출물의 우수한 NO 생성 저해능을 확인하여 오동나무 잎 추출물의 항염 효능 메카니즘을 규명하였다. ELISA 기법을 이용하여 $PGE_2$ 생성 억제 효능을 확인하였으며 NO와 $PGE_2$ 생성 단백질인 iNOS와 COX-2의 발현 여부를 확인한 결과 오동나무 잎 추출물 처리에 의해 두 단백질의 발현이 확연히 감소되는 것을 확인하였다. 또한 염증 반응의 초기 단계에 관여하는 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해정도를 시간별로 확인한 결과 LPS 처리 30 min 후 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해가 일어나게 되는데 오동나무 잎 추출물을 함께 처리하였을 경우 시간이 경과되어도 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해가 일어나지 않는 것을 확인하였다. 이로써 오동나무 잎 추출물의 항염 효능은 염증 반응 신호 전달의 초기 단계에 해당하는 $IkB-{\alpha}$ 단백질의 분해를 억제함으로써 결과적으로 NO와 $PGE_2$의 생성을 감소시킴을 확인하였다. 또한 CCD-986sk와 Raw 264.7 세포에 대한 세포 독성이 존재하지 않음을 확인함으로써 오동나무 잎의 항염 효능을 이용한 피부 자극완화제로서의 개발 가능성을 확인하였다.
Prajapati, Ritu;Seong, Su Hui;Kim, Hyeung Rak;Jung, Hyun Ah;Choi, Jae Sue
Natural Product Sciences
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제26권3호
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pp.214-220
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2020
Brassica oleracea var. gongylodes (red kohlrabi) is a biennial herbaceous vegetable whose edible bulbotuber-like stem and leaves are consumed globally. Sliced red kohlrabi tubers were extracted using methanol and the concentrated extract was partitioned successively with dichloromethane (CH2Cl2), ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (n-BuOH) and water (H2O). Repeated column chromatography of EtOAc fraction through silica, sephadex LH-20 and RP-18 gel led to isolation of eleven compounds of which compound 1 was a new glycosylated indole alkaloid derivative, 1-methoxyindole 3-carboxylic acid 6-O-β-D-glucopyranoside. Others were known compounds namely, β-sitosterol glucoside (4), 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde (5), methyl-1-thio-β-D-glucopyranosyl disulfide (6), 5-hydroxy-2-pyridinemethanol (7), (3S,4R)-2-deoxyribonolactone (8), n-butyl-β-D-fructopyranoside (9), uridine (10) and three fructose derivatives, D-tagatose (11), β-D-fructofuranose (12) and β-D-fructopyranose (13). Similarly, isolation from CH2Cl2 fraction gave two known indole alkaloids, indole 3-acetonitrile (2) and N-methoxyindole 3-acetonitrile (3). The structure elucidation and identification of these compounds were conducted with the help of 13C and 1H NMR, HMBC, HMQC, EIMS, HR-ESIMS and IR spectroscopic data, and TLC plate spots visualization. Compounds 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 and 9 are noted to occur in kohlrabi for the first time. Different bioactivities of these isolated compounds have been reported in literature.
Bacillus subtilis의 glutamyl-tRNA synthetase(GluRS)는 대장균에서 발현될 때 숙주세포의 $tRNA_1^{Gln}$에 glutamate를 잘못 아실화하여 독성을 나타내는 것으로 추정되고 있다. 이러한 B. subtilis GluRS를 대장균에서 과발현 시키기 위하여 B. subtilis 168 균주의 chromosomal DNA에서 GluRS의 유전자(gltX)를 PCR을 이용하여 증폭하고 T7 promoter에 의해 발현이 조절되는 pET11a expression vector에 클로닝하였다. 이 재조합된 pEBER plasmid DNA로 T7 RNA polymerase를 갖는 대장균 NovaBlue(DE3)에 형질전환하였다. 형질전환된 대장균에 IPTG를 처리하여 과량 생성된 GluRS 단백질은 ammonium sulfate 분별침전 후 EPLC를 이용한 Source Q column anion exchange chromatography, Superdex 200 column gel filtration, Mono Q column anion exchange chromatography로 정제하였다. 정제된 B. subtilis의 GluRS 분자량은 약 55 kDa이었으며 효소의 활성도는 조효소액에 비해 18배로 증가하였다.
Dried unripe fruits of Rubus coreanus Miq. were extracted with 80% aqueous MeOH and the concentrated extract was partitioned with EtOAc and $H_2O$. From the EtOAc fraction, four triterpenoids were isolated through repeated silica gel, ODS and Sephadex LH-20 column chromatographies. From the result of physico-chemical data including NMR, MS aud IR, the chemical structures of the compounds were determined as tormentic acid (1), myrianthic acid (2), hovenic acid (3) and 2${\alpha}$,3${\beta}$,19${\beta}$,23-tetrahydroxylolean-12-en-28-oic acid (4). Compounds 3 and 4 were isolated for the first time from this plant. All isolated compounds were evaluated for cytotoxic activity against human colon carcinoma cells using in vitro three-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, compound 3 showed a higher cytotoxicity ($IC_{50}$ = 7.8 ${\mu}M$) than doxorubicin ($IC_{50}$= 50 ${\mu}M$).
The purpose of this study was to evaluate the therapeutic potential of naturally occurring aldose reductase (AR) inhibitors isolated from Korean native plants. The MeOH extract and stepwise polarity fractions of dandelions were tested on rat lens AR inhibition in vitro. Of these, the EtOAc fractions from the leaves of dandelions (Traxacum coreanum, T. officinale, and T. ohwianum) exhibited an AR inhibitory activity ($IC_{50}$ values, 2.37, 1.73 and 2.68 ${\mu}g/ml$, respectively). A chromatography of the EtOAc fraction from the leaves of T. coreanum led to the further isolation of two flavonoids identified as luteolin and luteolin 7-O-glucopyranoside. These compounds exhibited strong AR inhibitory activity, with $IC_{50}$ values of 0.15 and 1.05 ${\mu}M$, respectively. These results suggested that luteolin is a potent AR inhibitor within dandelions and that it could be a useful lead compound in the development of a novel AR inhibitory agent against diabetic complications.
Atopic dermatitis (AD) is an inflammatory skin disease commonly characterized by infiltration of inflammatory cells into skin lesions. Keratinocytes produce many chemokines that are involved in the pathogenesis of skin disorders. In particular, macrophage-derived chemokine (MDC/CCL22) and thymus and activationregulated chemokine (TARC/CCL17) are Th2-type cytokines. Serum MDC and TARC levels are increased in AD patients. In this study, we investigated the anti-inflammatory effect and mechanism of action of the active fraction from Prunus yedoensis bark. We evaluated their inhibitory effects on the AD-like inflammatory markers (MDC and TARC) and JAK-STAT pathway (STAT1) in HaCaT keratinocytes. The EtOAc fraction of the crude extract (80% EtOH) and the E5 sub-fraction potently inhibited the induction of MDC and TARC mRNA and protein at 50 ${\mu}g$/mL in HaCaT cells. In addition, the E5 sub-fraction inhibited the phosphorylation of STAT1 protein associated with IFN-$\gamma$ signaling transduction in a dose-dependent manner. Thus, P. yedoensis may have antiatopic activity by suppressing the inflammatory chemokines (MDC and TARC).
양파의 매운 맛과 냄새를 감소시켜 섭취가 용이하도록 제조된 흑양파가 항산화 활성이 있다고 보고되어있어서 흑양파로부터 항산화 활성물질을 구명하고자 하였다. 흑양파 MeOH 추출물을 용매분획하여 얻어진 분획물들 중 EtOAc층이 높은 DPPH와 $ABTS^+$ radical scavenging 활성이 있었다. 그래서 EtOAc층을 silica gel과 Sephadex LH-20 등의 column chromatography를 이용하여 2종의 항산화 활성물질을 분리하였다. 단리한 이들 화합물을 대상으로 ESI-MS 및 NMR 분석을 통하여 3,4-dihydroxybenzoic acid (1)와 quercetin (2)로 각각 동정하였다. 이 화합물들은 $ABTS^+$ 및 DPPH radical scavenging 활성이 있었으며, 화합물 2는 화합물 1에 비해 더 높은 radical scavenging 활성이 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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