가정쓰레기 매립지 토양에서 분리된 Enterobacter sp. SNU-1453은 Enteric bacteria에 속하는 종(species)으로서 혐기 발효 시 효과적으로 수소를 생산하였다. 이러한 fermentative bacteria는 여러 가지 외부 요인에 의해 다른 metabolism을 나타내어 수소생산량에 영향을 준다. 혐기 발효가 진행됨에 따라 배지의 pH가 급격히 감소하여 미생물 성장과 수소생산에 영향을 미치므로, pH에 따른 metabolism변화를 관찰함으로써 수소생산을 극대화하기 위한 최적 pH 조건을 선정하여 제어할 필요가 있다. 본 연구에서는 수소생산에 대한 pH의 효과 및 pH 제어에 따른 metabolic flux를 분석하였다. 실험 결과 이 분리 균주는 매우 넓은 영역의 pH(4-7.5)에서도 수소를 생산하였으며, pH 7에서 가장 높은 수소생산량을 나타내었다. pH 7로의 제어는 butanediol pathway로부터 수소 생산에 더 유리한 mixed acid fermentation pathway로 metabolic flux를 변화시킴을 알 수 있었다.
소 장관으로부터 분리한 유산균 중에서 Enterobacter sakazakii에 생육저해활성을 나타내는 균주를 분리한 후 동정한 결과 Enterococcus faecium으로 동정되었고 E. faecium JH95로 명명하였다. 본 균주는 kanamycin과 streptomycin에 대해 $100{\mu}g/mL$가지 매우 높은 내성을 나타내었다. 본 균주의 배양액은 L. monocytogenes, C. perfringens와 E. sakazakii에 대하여 높은 항균 활성을 나타내었으며, S. typhimurium, S. aureus와 E. coli O157:H7에 대해서도 항균활성을 나타내었다. 본 균주의 배양 상등액은 항균활성을 보이지 않았으며, 배양액이 지니고 있는 항균활성은 $100^{\circ}C$에서 5분간 가열하거나 단백질 가수분해효소 처리에 의해 소실되어 식중독 미생물에 대한 생육저해물질이 단백질인 것으로 추정되었다.
수소생산을 최적화하기 위하여 Enterobacter cloacae YJ-1을 이용해 생산성에 미치는 탄소원 농도, 질소원 농도, 금속이온 농도, 아미노산 효과로서 회분식 배양을 통하여 실험을 수행하였다. 각종 탄소원의 종류에 따라 수소생산을 검토한 결과 glucose 첨가시에 가장 양호하였다. 따라서 glucose 농도를 변화시켜 수소생산량을 조사한 결과 $2\%$(w/v) 농도에서 최대를 보여 975.4 mL/L를 생산하였다. 각종 질소원 중에서 가장 효과적인 질소원은 yeast extract이었으며, 최대 수소생산량은 $1.5\%$(w/v) 농도에서 1651.5mL/L이었다. 금속이온으로는 $Na_2MoO_4$가 가장 효과적으로 나타나 $0.04\%$(w/v) 농도에서 1753.3 mL/L를 생산하였다. 아미노산은 cystein에서 가장 생산량이 많았으며, 다음은 proline, histidine, alanine 등 순이었다. 회분식 배양의 최적 조건하에 수소를 연속적으로 생산하기 위하여 반연속배양을 행한 결과 $3\%$ (w/v) 농도에서 2215.4 mL/L로 가장 높았다. 생산균주의 대사에 관한 물질을 보다 세밀히 조사하고 연속적인 수소생산을 살펴 산업적인 공정개발도 가능하리라 생각된다.
활성슬러지법에 의한 벤젠폐수 처리실험을 통하여 활성슬러지의 벤젠처리중에 실제 그에 관여하는 세균을 분리 동정하였다. 반응조에서 분리한 세균은 6종으로, Pseudomonas fluorescens, Enterobacter agglomerans, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii와 Klebsiella pneumoniae로 동정되었다. 벤젠 분해능을 측정한 결과는 P. fluorescenss가 55%를 18시간만에 처리했고, E. cloacae는 24%, K. oxytoca 는 32%, E. agglomerans는 41%의 분해능을 보였다. P. fluorescens의 증식 최적조건은 온도 25-31$^{\circ}C$와 pH 7.0으로 확인되었다. P. fluorescens가 우점종일때 나타나는 지로생물은 원생동물인 Aspidisca sp.였다. 벤젠 농도가 387mg/$\ell$일 때에는 Aspidisca sp.와 Litonotus sp.가 증식을 최대로 하였고, 벤젠 농도가 1,600mg/$\ell$에서는 Litonotus sp.와 Vorticella sp.는 거의 성장하지 않았다. Glucose 배지에서는 모두 성장율이 높았다.
Kim, Byung-Chun;Deshpande, Tushar R.;Chun, Jongsik;Yi, Sung Chul;Kim, Hyunook;Um, Youngsoon;Sang, Byoung-In
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권2호
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pp.189-194
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2013
In a study of hydrogen-producing bacteria, strain T4384 was isolated from rice field samples in the Republic of Korea. The isolate was identified as Enterobacter sp. T4384 by phylogenetic analysis of 16S rRNA and rpoB gene sequences. Enterobacter sp. T4384 grew at a temperature range of $10-45^{\circ}C$ and at an initial pH range of 4.5-9.5. Strain T4384 produced hydrogen at 0-6% NaCl by using glucose, fructose, and mannose. In serum bottle cultures using a complete medium, Enterobacter sp. T4384 produced 1,098 ml/l $H_2$, 4.0 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid. In a pH-regulated jar fermenter culture with the biogas removed, 2,202 ml/l $H_2$, 6.2 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid were produced, and the lag-phase time was 4.8 h. Strain T4384 metabolized the hydrolysate of organic waste for the production of hydrogen and volatile fatty acid. The strain T4384 produced 947 ml/l $H_2$, 3.2 g/l ethanol, and 0.2 g/l acetic acid from 6% (w/v) food waste hydrolysate; 738 ml/l $H_2$, 4.2 g/l ethanol, and 0.8 g/l acetic acid from Miscanthus sinensis hydrolysate; and 805 ml/l $H_2$, 5.0 g/l ethanol, and 0.7 g/l acetic acid from Sorghum bicolor hydrolysate.
배추김치의 항균작용을 실험한 본 연구에서 1개월간 발효된 배추김치즙 시료(염분 2.8%, 산도 1.34%, PH 4.1)를 2% 함유한 보통 한천 배지에서 실험군의 집락수 억제율은Salmonella enteritidis ATCC 13076이 가장 낮은 63%이었고 Enterobacter cloacae ATCC 13047과 Staphylococcus aureus ATCC 6538p은 각각 72%, 76%이었고 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802은 가장 높은 90%를 보였다. Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802는 배추김치즙 함량이 6%에서 100%발육 억제효과를 보여 실험균 중 배추김치즙에 대한 저항력이 가장 약했으나 동일한 배추김치즙 시료농도(6%)에서 Salmonella enteritidis ATCC 13076, Enterobacter cloacae ATCC 13047, Staphylococcus aureus ATCC 6538p는 각각 89%, 90%, 91% 의 집락수 억제 효과를 보였다. 배추김치즙 함량 10%에서 모든 실험군의 집락가100% 억제되는 효과를 보였다. 실험결과 1개월간 충분히 발효된 배추김치에는 어떤 식중독균도 생존할 수 없을 것으로 밝혀졌다.
밀누룩과 탁주의 미생물 군집을 NGS로 분석하여 탁주의 이상 발효 원인을 규명하였다. 우점도가 높은 미생물은 알코올 발효 이후 변화하여, 누룩에서는 Aspergillus 속 곰팡이와 Staphylococcus 속 세균이 우세하였고, 탁주에서는 Saccharomyces 속 효모와 Pediococcus, Bacillus, Lactobacillus, Enterobacter 속 세균이 우세하였다. 특이적으로 본 연구에서 분석된 누룩과 탁주 시료는 유산균의 함량이 상대적으로 낮았다. 이러한 미생물학적 환경에서 Bacillus 속과 Enterobacter 속이 기회 감염균인 Bacillus wiedmannii와 Enterobacter cloacae로 확인되었고, B. wiedmannii와 E. cloacae는 각각 유기산의 농도가 급격히 감소한 밑술 발효 3일과 원료가 첨가된 덧술 발효 1일에서부터 점차적으로 증가하였다. 이를 통해 탁주의 미생물은 누룩을 포함한 원료 및 발효 조건에 영향을 받으며, 유산균의 부재가 탁주에서 E. cloacae와 B. wiedmannii의 이상 증식에 영향을 주었다고 보여진다. 결론적으로 NGS를 통한 미생물 군집 분석은 누룩과 탁주의 미생물 구성과 발효 특성을 포괄적으로 이해하는데 도움을 주며, 더 나아가 전통누룩의 발효 조건 개선 및 고품질 전통주 생산에 활용할 수 있을 것으로 기대한다.
In order to isolate a microorganism having preferential degradation of D-carnitine from DL-carnitine, a bacterium assimilating D-carnitine as a sole carbon and energy source was isolated from soil by enrichment culture and partially identified as Enterobacter sp. Also, a mutant having lessened L-carnitine decomposition rates was selected with nitrosoguanidine mutagenesis, which led to decrease the specific activities of carnitine dehydrogenase (7.6-fold) and ${\beta}$-hydroxybutyrate dehydrogenase (9.5-fold) as compared to the wild strain. Meanwhile, optimal culture conditions for optical resolution of DL-carnitine were investigated. Under optimal conditions, 3.53 g/l L-carnitine was obtained from 20 g/l DL-carnitine, which corresponded to 35.3% L-carnitine yield and 97.9% optical purity.
For the resolution of L-carnitine from DL-carnitine, resting cells of Enterobacter sp. NH-104, which had a higher capacity of D-carnitine decomposition, were harvested at maximal specific activity of D-carnitine decomposition of 47.05 unit/mg cell. The cells were frozen at $-80^{\circ}C$ to assess functions as enzyme sources. Optimal concentration of cells and DL-carnitine were 17 g/$\ell \; and \; 20 g/\ell$, respectively, and reaction buffer was best at 75 mM of Tris. HCl. Optimal temperature and pH were $36^{\circ}C$ and 8.2, respectively. When the reaction at optimal conditions was carried out for 14 h, the optical purity was 98.21 %, and the quantity and yield of remaining L-carnitine were 4.432 g/$\ell$ and 44.32%, respectively.
일부 눈의 합병증은 콘택트렌즈에 연관된 것에 의해 감염이 관련되어 있다. 특히 눈 합병증의 대부분의 원인은 감염의 여러 경로로 인한 미생물인 것이다. 그러므로 환자는 눈 병의 부작용에 의해서 즉시 콘택트 렌즈 착용을 중단한다. 저자는 실험실에서 미생물을 분석하였다. 이것은 Chryseamonas meningosepticum와 Enterobacter sp.의 혼합된 성장으로서 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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