• 제목/요약/키워드: E. coli(K99)

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해양미세조류 에탄올 추출물의 항균활성에 관한 연구 (Antibacterial activity of ethanol extracts from marine micro-algae)

  • 김윤정;하상철;김대욱;신일식
    • 한국식품과학회지
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    • 제49권4호
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    • pp.390-395
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    • 2017
  • Mixed A, Chlorella vulgaris, Nannochloropsis oculata, Chaetoceros calcitrans 등 4종류의 미세조류로부터 99.9% 에탄올로 추출한 성분의 항균활성을 검증하기 위해 그람음성세균 2종(E. coli, S. Typhimurium)과 그람양성세균 2종(S. aureus, B. cereus)에 대하여 paper disk diffusion assay, MIC, MBC를 측정하였다. 4종류의 미세조류 추출물은 공시균주에 대하여 0.62-1.66 mg/mL의 MIC를 나타내었으며, C. vulgaris 추출물이 4종의 공시균주에 대한 MIC가 0.62 mg/mL로 가장 강한 항균활성을 나타내었으며, MBC 또한 C. vulgaris 에탄올 추출물이 E. coli에 대해 2.50 mg/mL, S. aureus, B. cereus와 S. Typhimurium에 대해서는 4.16-5.00 mg/mL로 가장 강한 항균활성을 나타내었다. 항균활성이 가장 강한 C. vulgaris 에탄올 추출물의 성분을 분석한 결과, 함량이 가장 많은 성분은 9,12-octadecadienoic acid (linoelaidic acid, peak 5, 7)로 38.8%이었으며, 그 다음이 2-Hexadecen-1-o1, 3,7,11,15-tetramethyl (phytol, peak 2,6)로 30.0%이었다. Octadecadienoic acid는 일명 linoelaidic acid로 탄소수 18개의 고도불포화지방산이며, 두 번째로 함량이 많은 Phytol은 클로로필을 구성하는 불포화 제1급 알코올의 일종으로서(엽록소의 구성 성분) 병원성 대장균 및 황색포도상구균에 항균활성을 나타낸다는 보고로 볼 때, 이 2가지 성분이 항균활성의 주성분인 것으로 사료된다.

시금치로부터 병원성세균의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Pathogenic Bacteria from Spinach)

  • 김혜정;김영훈;이동선;백현동
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권1호
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    • pp.97-102
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    • 2003
  • Cook-chill 제품의 원료로 사용하는 시금치와 수세한 시금치에 대해 Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus, Campylococcus spp., Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 등 12종류의 병원성세균의 존재 여부를 확인하였다. 이들 시금치로부터 4종의 병원성세균을 분리하여 API kit와 ATB 자동 동정기를 포함한 형태학적 및 생화학적 방법에 의해 동정하였다. MacConkey agar에서 분리된 균은 그람 음성 간균으로 glucose를 이용하여 gas를 생성하며, lactose 음성, sucrose 양성, lysine 양성으로 ATP system에서 A. hydrophila 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Cereus Selective agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 포자 형성균으로 catalase 양성, mannitol 음성, lecithinase 양성, Simmon's citrate 음성, $NO_2$ 생성 양성, arginine 양성균으로 ATB system에서 B. cereus 종에 대해 99.8%의 상동성을 보였다. Clostridium Perfringens agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 혐기성균으로 포자를 형성하며, mannitol 양성, lecithinase 양성으로 ATB system에서 C. perfringens 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Baird-Parker agar에서 분리된 균주는 그람 양성 구균으로 mannitol, lecithinase, lactose, clumping factor, coagulase 및 hemolysin 양성, xylose 음성으로 ATB system에서 S. aureus 종에 대해 97.8%의 상동성을 보였다. Salmonella spp., E. coli O157:H7, Y. enterocolitica를 포함한 다른 병원성세균은 분리되지 않았다. 시금치에서 분리한 S. aureus 5균주 중 2균주는 SET-RPLA kit에서 enterotoxin type A를 생성하였고 3균주는 enterotoxin을 생성하지 않았다. B. cereus 5균주는 CRET-RPLA kit에서 모두 enterotoxin을 생성하였다.

소아 요로감염 진단에 있어 신속배양검사(Uricult Trio)의 유용성에 관한 연구 (Evaluation of Uricult Trio Test as a Rapid Screening of UTI in Children with Fever)

  • 이진;김은진;이택진;장진근;차성호
    • Pediatric Infection and Vaccine
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    • 제17권2호
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    • pp.74-82
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    • 2010
  • 목적 : 요로감염은 가장 흔한 소아기의 세균감염증의 하나로 빠른 진단과 치료가 신장 합병증을 예방하기 위해 매우 중요하다. 저자들은 발열을 주소로 내원한 요로감염이 의심되는 24개월 이하의 신생아 및 영유아에서 Uricult Trio 검사의 간편 검사로서의 진단적 유용성에 대해 알아보고자 이 연구를 계획하였다. 방법: 2010년 1월부터 2010년 7월까지 한일병원, 경희의료원, 분당차병원 소아청소년과 외래에 발열을 주소로 내원한 24개월 이하의 환아 중 48시간 이내에 항생제 투여를 하지 않은 158명을 대상으로 하였으며 이중 검사를 위한 소변검체를 확보한 151례에서 Uricult Trio 검사와 소변배양검사를 동시에 실시하고 그 결과를 비교분석 하였다. 결과 : 대상 환아 중 요로감염으로 진단된 환아는 32명(21.2%)이었고 이 중 E. coli가 검출된 증례는 20례(66.7%)였다. Uricult Trio CLED 배지의 민감도와 특이도는 각각 59.4%, 84.8%였고 Uricult Trio E. coli 배지를 소변배양검사에서 E. coli가 동정된 증례를 비교한 결과는 민감도가 60%, 특이도가 96.2%였다. Uricult Trio CLED 배지검사와 소변배양검사간의 상관계수는 0.438 (P=0.01)이었으며 Uricult Trio E. coli 배지검사와 소변배양검사간의 상관계수는 0.617 (P=0.01)로 모두 통계학적으로 의미 있는 상관관계를 보였다. 결론: Uricult Trio 검사는 소아연령의 요로감염 원인균 중 가장 흔한 원인균인 E. coli를 빠른 시간 내에 동정할 수 있는 간편 검사법이다. 이번 연구 결과 이 검사방법은 기존의 세균배양검사와의 상관관계가 의미 있게 높으며 E. coli 에 의한 요로 감염시 특이도가 96.2%로 높아 요로감염이 의심되는 외래환자에서 질환을 배제하는데 도움이 되고 이로 인해 발열을 주소로 내원한 외래환아에서 불필요한 입원 및 항생제 사용을 줄일 수 있을 것으로 기대해본다.

Bactericidal Effects of CaO (Scallop-Shell Powder) on Foodborne Pathogenic Bacteria

  • Bae Dong-Ho;Yeon Ji-Hye;Park Shin-Young;Lee Dong-Ha;Ha Sang-Do
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제29권4호
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    • pp.298-301
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    • 2006
  • This study was investigated the bactericidal effects of calcium oxide (CaO) on three common foodborne pathogenic bacteria: Escherichia coli, Listeria monocytogenes, and Salmonella typhimurium. Each bacteria level was determined in a CaO solution (0.01, 0.03, 0.05, 0.10, 0.15, and $0.20\%$ [w/v]) exposed for either 15 sec, 30 sec, 1 min, 2 min, 3 min, 5 min, 10 min, or 30 min. All three bacteria were not greatly affected by CaO solutions at concentrations of 0.01 and $0.03\%$, however, the decline of E. coli $(99\%;\;2.78\;log_{10}CFU/mL)$, L. monocytogens $(45\%;\;1.44\;log_{10}CFU/mL)$, and S. typhimurium $(70\%;\;2.08\;log_{10}CFU/mL)$ was greatest when they were exposed to $0.05\%$ CaO solution for 10 min. Moreover, the bactericidal action of CaO was maintained for at least 24 h of storage. The results of this study provide evidence that CaO, as a substitute for synthetic chemical substances has potential for use in the disinfection and sanitization of foods and food processing equipment.

기포 발생형 타정제의 살균세정 효과 (Efficacy of Disinfectants and Sanitizers of Chlorine Oxide Bubbling Tablets)

  • 지원대;강상구;이경은
    • 생명과학회지
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    • 제25권9호
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    • pp.1036-1042
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    • 2015
  • 병원균의 조기 차단을 목적으로 본 연구에서는 사용이 간편한 chlorine oxide 기포 발생형 살균세정용 타블렛 정제의 살균효과를 검증하였다. 대한민국 식품의약품안전처 고시 2012-10호의 사용기준에 따른 살균력의 검증결과, 본 연구에서 사용한 살균세정제를 20±1℃에서 5분±10초 처리하였을 때 Escherichia coli ATCC 10536 및 Staphylococcus aureus ATCC 6538의 균에 대하여 초기균수(cfu/ml)를 99.999% 이상 감소하였다. 살균세정제를 희석 농도 0.1%의 경수에 1일 사용한 양말과 상하 내의를 1시간 침지한 후 CHROMagar 배지를 사용하여 살균정도를 조사한 결과 살균세정제가 투여된 처리구에서는 균이 전혀 검출되지 않았으나 무 처리 대조군의 경우 Staphylococcus sp. 등을 포함한 총 6.5×104 cfu/ml의 균체가 자랐다. 또한 1.5×108 cfu/ml의 실험용 E. coli BL21 균주에 살균세정제 0.1% (w/v)을 투여한 결과 투여 5분 내에 모든 균이 사멸하였다. 본 연구에서 검증한 기포발생형 살균세정제는 병원균, 실험용 대장균 및 생활용품에 대하여 뛰어난 살균효과가 있는 것으로 판명되었다.

Cell Surface Display of Poly(3-hydroxybutyrate) Depolymerase and its Application

  • Lee, Seung Hwan;Lee, Sang Yup
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제30권2호
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    • pp.244-247
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    • 2020
  • We have expressed extracellular poly(3-hydroxybutyrate) (PHB) depolymerase of Ralstonia pickettii T1 on the Escherichia coli surface using Pseudomonas OprF protein as a fusion partner by C-terminal deletion-fusion strategy. Surface display of depolymerase was confirmed by flow cytometry, immunofluorescence microscopy and whole cell hydrolase activity. For the application, depolymerase was used as an immobilized catalyst of enantioselective hydrolysis reaction for the first time. After 48 h, (R)-methyl mandelate was completely hydrolyzed, and (S)-mandelic acid was produced with over 99% enantiomeric excess. Our findings suggest that surface displayed depolymerase on E. coli can be used as an enantioselective biocatalyst.

Characterization of Styrene Catabolic Genes of Pseudomonas putida SN1 and Construction of a Recombinant Escherichia coli Containing Styrene Monooxygenase Gene for the Production of (S)-Styrene Oxide

  • Park Mi-So;Bae Jong-Won;Han Ju-Hee;Lee Eun-Yeol;Lee Sun-Gu;Park Sung-Hoon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권7호
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    • pp.1032-1040
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    • 2006
  • Some Pseudomonas species can grow on styrene as a sole carbon and energy source. From the new isolate Pseudomonas putida SN1, the genes for styrene catabolism were cloned and sequenced. They were composed of four structural genes for styrene monooxygenase (styA and styB), styrene oxide isomerase (styC), and phenylacetaldehyde dehydrogenase (styD), along with two genes for the regulatory system (styS and styR). All the genes showed high DNA sequence (91% to 99%) and amino acid sequence (94% to 100%) similarities with the corresponding genes of the previously reported styrene-degrading Pseudomonas strains. A recombinant Escherichia coli to contain the styrene monooxygenase from the SN1 was constructed under the control of the T7 promoter for the production of enantiopure (S)-styrene oxide, which is an important chiral building block in organic synthesis. The recombinant E. coli could convert styrene into an enantiopure (S)-styrene oxide (ee >99%) when induced by IPTG The maximum activity was observed as 140 U/g cell, when induced with 1 mM IPTG at $15^{\circ}C$.

시험관내에서 norfloxacin의 항균력과 다른 항생제와 병용투여시 상호작용 (In vitro antibacterial activity, postantibiotic effects of norfloxacin and its interaction effects in combination with other antibiotics)

  • 박승춘;윤효인;오태광
    • 대한수의학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.147-154
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    • 1997
  • 국내에서 많이 사용되고 있는 제2세대 quinolone 항생제인 norfloxacin(NFX)에 대한 약역학적인 특성을 구명하기 위하여 국내에서 분리된 동물유래 병원성 세균에 대하여 시험관내에서 실험을 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 즉, E coli(n=89) 대한 NFX의 $MIC_{50}$$MIC_{90}$는 공히 0.02g/ml이었으며, Streptococcus spp.(n=36)에 대한 NFX의 $MIC_{50}$는 2g/ml 그리고 $MIC_{90}$는 4g/ml로 나타났다. Salmonella spp.(n=56)에 대한 NFX의 $MIC_{50}$$MIC_{90}$ 모두 0.2g/ml로 강한 항균력을 보였으며, Streptococcus spp.(n=24)에 대한 NFX의 $MIC_{50}$는 2g/ml 그리고 $MIC_{90}$가 4g/ml로 나타났다. Bacillus spp.(n=34)는 NFX의 $MIC_{50}$$MIC_{90}$는 모두 0.4g/ml으로서 대부분의 병원성 세균에 대해서 $MIC_{50}$$MIC_{90}$치가 동일하든지 또는 매우 비슷한 수치를 보여주었다. 그러나 NFX는 혐기성세균인 Clostridium spp.(n=34)에 대해서는 항균력이 매우 낮았다. 현재 수의임상에서 항균제 병용요법이 많이 응용되고 있는 것을 고려하여 NFX와 다른 항생물질간의 분획억제농도 (FICs)를 E coli 88ac을 시험균주로 하여 실험한 결과, NFX와 colistin과 병용할 때 FIC 값이 0.38로서 상승작용을 그리고 gentamicin, trimethoprim, amikacin, penicillin 및 tylosin과의 병용시 FIC 값이 각각 0.52, 0.56, 0.63, 1.00 및 1.02로서 상가작용을 보여주었으며, tetracyclin과의 병용시의 FIC값은 1.49로서 길항작용을 나타냄을 알 수 있었다. 한편 실제 항균제의 임상적용시 매우 주요한 요소인 항균활성후 저농도유효성(PAE)을 알아보기 위하여 E coli AB1157을 시험균주로 측정한 결과 PAE은 0.90~1.02 시간 그리고 S aureus R-209에 대해서는 PAE가 1.58~1.99 시간으로서 그람음성균 및 그람양성균 모두에 대해서 긴 PAE를 갖고 있음을 알 수 있었다.

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Cloning and Expression of Thermostable Chitosanase Gene from Bacillus sp. KFB-C108

  • Yoon, Ho-Geun;Kim, Hee-Yun;Kim, Hye-Kyung;Kim, Kyung-Hyun;Hwang, Han-Joon;Cho, Hong-Yon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권5호
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    • pp.631-636
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    • 1999
  • The thermostable endo-chitosanase gene from the isolated strain Bacillus sp. KFB-C108 was identified on the basis of a phylogenetic analysis of the 16S rRNA gene sequence, and was cloned into plasmid pUCl8 using E. coli $DH5\alpha$ as the host strain. Positive clones carrying recombinant plasmids (pKCHO I and pKCHO II) containing chitosanase activity were selected using the direct activity staining method. Detailed physical maps showed the two plasmid inserts were identical except that the KCHO II insert (2.6 kb) was 1.8 kb smaller than that of the KCHO I. The recombinant plasmids were analyzed to determine the essential region for chitosanase activity, and a 1.3-kb fragment (KCHO-6) was subcloned into pTrc99A using the EcoRI and BamHI sites to construct pTrc99A/KCHO-6(pTrEB13). The resulting plasmid exerted high chitosanase activity upon transformation of E. coli $DH5{\alpha}cells$, overproducing about 20 times more in the cloned cells than in the wild-type cells. The cloned chitosanase protein exhibited the same molecular weight and catalytic activity similar to those of Bacillus sp. KFB-C108. The cloned enzyme was an endo-type that produced a chitosan tetramer as the major reaction product; however, it produced no monomers or dimers.

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눈개승마(Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara) 용매 추출물의 항산화 및 항균활성 (Antioxidative and Antimicrobial Activities of Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara Extracts)

  • 김미선;김경희;조지은;최종진;김영진;김종환;장순애;육홍선
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제40권1호
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    • pp.47-55
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    • 2011
  • 본 연구는 눈개승마의 80% 에탄올 추출물과 순차적 분획물에 대하여 총 폴리페놀 함량과 항산화 활성을 측정하고, tyrosinase 저해활성 및 항균활성을 측정하여 눈개승마의 생리활성효과와 식품 보존제 및 화장품 원료 등의 기능성 소재로서 활용가능성을 조사하였다. 눈개승마 추출물 및 분획물의 총 폴리페놀 함량은 ethyl acetate 분획물에서 $335.88{\pm}2.26$ mg/g GAE로 가장 높게 나타났다. 눈개승마의 DPPH radical 소거활성을 측정한 결과, ethyl acetate 분획물에서 $IC_{50}$이 0.06 mg/mL, n-butanol 분획물이 0.25 mg/mL로 높은 활성을 나타내었으며, ABTS 라디칼 소거능 활성(0.5 mg/mL)은 ethyl acetate, n-butanol 분획물이 각각 $99.16{\pm}0.09%$, $89.29{\pm}0.64%$의 활성을 나타내었다. 환원력과 FRAP value는 ethyl acetate 분획물이 유의적으로 높은 값을 나타내었다. SOD 유사활성은 $80.76{\pm}0.61%$(ethyl acetate), $72.34{\pm}0.79%$(n-butanol)로 나타났다. Tyrosinase 저해활성은 5 mg/mL의 농도에서 ethyl acetate 분획물이 $59.08{\pm}0.98%$로 나타났다. 항균활성은 chloroform 분획물(0.1 mg/disc)이 B. cereus(14 mm), B. subtilis(12.5 mm), S. aureus(10.8 mm), E. coli(20.7 mm)와 같이 4종류의 세균에 대해 항균활성이 높았으며, ethyl acetate 분획물은 E. coli(17.2 mm, 0.5 mg/disc)에 대해 나타내었다. 눈개승마 chloroform 분획물의 최소저해농도는 B. cereus가 $50{\mu}g$/mL, E. coli가 $25{\mu}g$/mL을 나타내었다. 따라서 본 연구 결과 눈개승마의 ethyl acetate와 n-butanol 분획물은 높은 항산화 활성을 가지고 있으며, chloroform 분획물은 높은 항균력을 가지고 있어 눈개승마의 분획물들은 식품첨가물 및 식품보존제 등 기능성 소재로서 활용될 수 있을 것으로 사료된다.