For proper wound healing, dermal contraction and remodeling are critical; during the natural healing process, differentiated fibroblasts called "myofibroblasts" typically undertake these functions. For severe wounds, however, a critical mass of dermal matrix and fibroblasts are lost, making self-regeneration impossible. To overcome this impairment, synthetic wound patches with embedded functional cells can be used to promote healing. In this study, we developed a polydioxanone (PDO)-based cell-embedded sheet on which dermal fibroblasts were cultured and induced for differentiation into myofibroblasts, whereby the following combinatorial physicochemical stimuli were also applied: aligned topology, electric field (EF), and growth factor. The results show that both the aligned topology and EF synergistically enhanced the expression of alpha smooth-muscle actin (${\alpha}$-SMA), a key myofibroblast marker. Our proof-of-concept (POC) experiments demonstrated the potential applicability of a myofibroblast-embedded PDO sheet as a wound patch.
Chinensis galla has been used as an multi-functional herb, such as anti-inflammatory, anti-virus, and antitumor agent. This study was performed to antimicrobial and cytotoxicity effect in vitro. The results were summarized as follows : Chinensis galla was antimicrobial effect on Staphylococcus aureus subsp. aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis. Chinensis galla was antimicrobial effect on Kocuria rhizophila, Corynebacterium ammoniagenes. The extracts of Chinensis galla exhibited cytotoxicity on human dermal fibroblast at $10\;{\mu}{\ell}$ but not at $5\;{\mu}{\ell}$, and the same results was known under a microscope. Accordingly the results show Chinensis galla could antimicrobial effect but exhibited cytotoxicity on human dermal fibroblast at high concentration and it needs more research.
Kaempferol (3,4',5,7-tetrahydroxyflavone), a flavonoid found in beans, broccoli, garlic, etc., has been used in natural medicine as an anti-inflammatory and antioxidant. This experiment was carried out to evaluate the anti-apoptotic effect of kaempferol in 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA)-treated Normal Human Dermal Fibroblast (NHDF). Kaempferol inhibited the production of intracellular Reactive Oxygen Species (ROS) induced by TPA in NHDF. Kaempferol significantly blocks the phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase responsible for the activation of nuclear factor-kappa B. In addition, kaempferol significantly attenuated the expression of Bax and cleaved caspase-3 as regulated by the phosphorylation of nuclear factor-kappa B during its blockage of TPA-induced apoptotic cell death. These findings suggest that kaempferol protects the apoptotic signaling pathway induced by TPA through modulating intracellular ROS in NHDF.
We developed a dermal equivalent (DE) which was engineered using human dermal fibroblasts and a matrix of collagen gel. The in vitro construction of the DE was accomplished by casting a porcine collagen type I solution plus concentrated medium with isolated and cultured fibroblasts. These constructs were attached to culture dishes or left floating in culture medium. Contraction of attached gels results in decreased gel thickness without a change in gel diameter, and contraction of floating gels results in decreased gel thickness and diameter. After contraction, there was no increase in cell number in floating gels, but cells in attached gels began to increase after about 4 days of the lag phase in cell growth curve. At this lag phase, addition of fibroblast growth factor (FGF) at a concentration of $0.1{\mu}$/ml promoted cell proliferation in the attached collagen gels, but no effect in floating gels. These results indicate that the method of contraction had an influence on the extracellular matrix (ECM) organization, and this influenced not only cell growth but also fibroblast responsiveness to FGF. This suggests that attached collagen gel is more suitable as a dermal equivalent than the floating gel. And the final contracted area of attached gel is much larger than that of the floating gel since floating gel is contracted in all directions but attached gel is contracted only vertically.
교원질을 비롯한 세포외기질의 생합성을 통해 피부장력과 탄력 등 피부 특성을 제공하는 진피섬유모세포는 피부노화와 함께 활성이 감소되어 주름 형성의 이유가 된다. 따라서 젊고 건강한 피부를 유지하기 위해서는 진피섬유 모세포의 활성화가 큰 의미를 지닌다. 본 연구에서는 대복피 에탄올추출물이 진피섬유모세포의 세포외기질 합성에 미치는 영향을 ELISA, Western blot analysis 및 RT-PCR 등의 in vitro 평가법으로 측정하였다. ELISA와 western blot analysis에서 대복피추출물은 제1형 교원질, fibronectin, transforming growth factor-${\beta}1$ (TGF-${\beta}1$)의 생성을 촉진시켰고, RT-PCR에서는 COL1A1, TGF-${\beta}1$, keratinocyte growth factor (KGF), insulin growth factor (IGF)-1의 유전자 발현을 증가시켰다. 이상의 결과로부터 대복피추출물은 진피섬유모세포에서 세포외기질의 생성을 촉진시키는 천연소재인 것으로 판단되었다.
본 연구의 목적은 in vitro 실험에서 human dermal fibroblast cell을 이용한 섬유아세포 증식과 콜라겐 생성을 통한 전층피부창상치유에 대한 효과를 알아보는 것이다. In vitro 실험에서, 베타글루칸 및 양성대조물질 oncostatin M을 사용하여 처치 후 24 또는 48시간 이후 MTT assay와 세포수 관찰을 통해 섬유모세포 증식효과에 대해 평가하였다. Procollagen 생산에 대한 효과를 평가하기 위해 베타글루칸 및 양성대조물질 oncostatin M 처치 48시간 후 hydroxyproline을 HPLC를 이용하여 정량하여 평가하였다. 창상재구축에 대한 효과를 평가하기 위해 베타글루칸 및 양성대조물질 fucoidan fraction 7을 FPCL 모델을 이용하여 평가하였다. 베타글루칸 처치군은 음성대조군 대비 0.1 mg/ml 이상의 농도에서 용량의존적이고 유의적인 OD 또는 섬유아세포수의 증가가 관찰되었다. 게다가 베타글루칸 처치군은 창상면으로 유주된 세포수가 음성대조군 대비 1 mg/ml 이상의 농도에서 용량의존적이고 유의적인 증가가 관찰되었다. 그러나 베타글루칸 처치군은 음성대조군 대비 모든 용량에서 procollagen 생산에 대한 유의적인 변화가 관찰되지 않았다.
Photosensitized peroxidation of membrane lipids has been implicated in skin pathologies such as phototoxicity and premature aging. We have previously reported that syriacusin compounds isolated from Hibiscus Syriacus inhibited lipid peroxidation. Here, we investigated whether syriacusins could be effective inhibitor to skin aging using ultraviolet-irradiated human dermal fibroblast cells (HDFCs). Syriacusins A, B, and C inhibit the activity of human neutrophil elastase (HNE), a serine protease to degrade extracellular matrix (ECM) proteins including elastin, with $IC_{50}s$ of 8.0, 5.2, and $6.1\;{\mu}M$, respectively. No changes in cell viability were detected by syriacusins A and B in UV-B ($10\;mJ/cm^2$) irradiated HDFCs. Matrix metallo-proteinase (MMP)-1 expression in HDFCs was increased by UV-B irradiation. MMP-1 expression in UV-B irradiated HDFCs was decreased by $10\;{\mu}M$ and $20\;{\mu}M$ syriacusin A to 50% and 20% of untreated control, respectively. Syriacusin B treated with $20\;{\mu}M$ reduced MMP-1 expression in UV-B irradiated HDFCs to 60% of untreated control. Syriacusin A also inhibited MMP-2 expression accompanying the increase of type-I pro-collagen in UV-B irradiated HDFCs. These results demonstrate that syriacusin A could be a more effective compound to inhibit skin aging caused by UV irradiation. It suggests that syriacusins A and B might be developed as possible agents to treat or prevent skin aging.
Skin wrinkle formations are associated with collagen synthesis and matrix metalloproteinase-I(MMP-1) activity. This study was carried out to find out skin wrinkle reducing components in Torilis Fructus. Torilis Fructus were extracted with 70% ethanol and the ethanol extracts were systematically fractionated with n-hexane, ethylacetate, n-butanol and distilled water. Among them, antiwrinkle component from n-hexane fraction was purified by several column chromatographies and HPLC, which identified as torilin by $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ and ESI-MS. To determine cell viability, collagen biosynthesis and MMP-1 activity, human dermal fibroblast was treated with 1-5 ppm concentrations of Torilis Fructus extract fraction and torilin. Cell viability was showed 84-102% at all group treated with 1-5 ppm. Collagen synthesis was increased in all group, especially torilin-treated group was highest amount. Active forms of MMP-1 were decreased in all group. From these results, we consider that Torilis Fructus have several antiwrinkle components and torilin may be one of the effective components.
The stimulatory effect of recombinant human basic fibroblast growth factor (bFGF) on wound healing was evaluated in healing-impaired animal models. Full-thickness wounds were made in prednisolone-treated mice, streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats and mitomycin C (MMC)-treated rats. Saline or bFGF at a dose of 1, 5, or $25\mu\textrm{g}$ per wound was applied to the open wound once a day for three to five days. The degree of wound healing was assessed using wound size and histological parameters such as degree of epidermal and dermal regeneration. Local application of bFGF accelerated wound closure significantly in a dose-dependent manner in all healing-impaired wounds (p<0.05). The wound healing effect of bFGF was further confirmed by histological examination in MMC-treated rats. Epidermal and dermal regeneration were enhanced in bFGF-treated wounds with a dose-related response. Dermal regeneration parameters such as collagen matrix formation and angiogenesis were significantly increased in $5\mu\textrm{g}$, or $\25mu\textrm{g}$ of bFGF-treated wounds when compared to saline-treated wounds (p<0.05). pectin immunostaining on day 8 for vascular endothelium showed an increased number of neovessels in bFGF-treated wounds. These results suggest that topical application of bFGF has beneficial effects on wound healing by angiogenesis and granulation tissue formation in healing-impaired wounds.
Seol, Ja young;Yoon, Ji Young;Jeong, Hee Sun;Joo, Nami;Choi, Soon Young
한국축산식품학회지
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제36권2호
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pp.237-243
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2016
Many researchers revealed that collagen contribute to maintaining the skin’s elasticity and inhibit wrinkling of skin. Korean native cattle (Hanwoo) bone (leg bone, foot and tail) infusion contains the various inorganic materials, collagen and chondroitin sulfate. All of this, a large quantity of collagen is included in Hanwoo infusion. Therefore, this study emphasized on the effects of collagen in the Hanwoo bone infusion. For the first time, Hanwoo bone infusions were directly added to the media of Human Dermal Fibroblast (NHDF-c) to test anti-aging effects. First, it was identified that growth rate of skin fibroblast was increased. Furthermore, the Hanwoo bone infusion increased a 50% of fibroblast collagen synthesis. Also, suppression of skin fibroblast aging was confirmed by treatment Hanwoo bone infusion. In conclusion, this study demonstrates the effects of infusion made from Hanwoo leg bone, foot and tail on anti-aging, wrinkle inhibiting and skin fibroblast elasticity maintaining. Therefore, this study identified that traditional infusion has effects that are good for skin elasticity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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