The intestinal microbiota are important to the host with regard to resistance they impart against bacterial infections and their involvement in mediating metabolic functions. Lactic acid producing bacteria such as Lactobacillus play an important physiological role in these matters. The aim of the present study was to isolate Lactobacillus sp. that inhibits enteric pathogens. Initially, 17 isolates from healthy Koreans were collected on Lactobacillus selective medium. Resistance of the isolates to antibiotics including rifampicin, streptomycin, clindamycin and vancomycin was measured. One of the isolate was identified as Lactobacillus ruminus on the basis of bacterial cell morphology, cultural characteristic and biochemical characteristics, 16S rRNA sequence analysis and PCR-RAPD. Antimicrobial activity of the bacterium against Vancomycin Intermediate Resistant Staphylococcus aureus (VISA) and Vancomycin-Resistant Enterococci (VRE) was measured. About $10^4$ cells of VISA or VRE were mixed with 1, 5, and 9 mL of L. ruminus SPM 0211 and the final volume was adjusted to 10 mL with brain heart infusion (BHI) broth. The cell suspension was incubated for 3, 6, 9, and 24 h, serially diluted and then plated on BHI agar plates. As numbers of L. ruminus SPM 0211 were increased, viable cell count of VISA and VRE decreased. The strongest antimicrobial activity of SPM 0211 was observed after 9 h incubation in any mixture, almost completely inhibiting the growth of these two bacteria. The results suggest that the freshly isolated L. ruminus SPM 0211 may be used as a pro-biotic microbe that prevents the colonization of enteric pathogens and can thereby promote good gastrointestinal health.
Penicillium sp. C8-14주(株)를 계속 단포자 분리 및 변이 처리를 하여 Penicillium sp. C13-13(역가-3171u/g) 주(株)를 얻었다. 2. 고체배양에 적용하기 위하여 증식용 액체배양을 하였으며, 초발 pH $4.5{\sim}5.0$, 10% 부배지를 사용하여 48시간동안 $30^{\circ}C$, 통기량 6l/min, 교반속도 600rpm(20l-Jar fermenter)으로 배양하여 균체량이 70ml이상일 경우에 접종한 것이 $29{\sim}33^{\circ}C$, 72시간의 부배지 배양에 있어서 가장 좋은 역가를 보였다. 3. 부배지에 1.5% $CaCI_2$ 및 0.015% $MgSO_4$를 가한 것이 control 보다 높은 역가를 보였다. 끝으로 본고(本稿)작성에 많은 도움을 주신 서울 대학교 약학대학 김병각 교수님께 심심한 사의를 표합니다.
Pravastatin은 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA (HMG-CoA) 환원효소 억제제이며, 혈청 콜레스테롤 농도를 낮추어 심혈 관계 위험성 및 사망률을 감소시킨다. 이번 연구는 부형제, 안정화제, 붕해제, 활택제, 착색제로 사용되는 첨가제들 및 pravastatin과의 적합성 연구를 위해 진행되었다. 모든 첨가제들과의 혼합은 PTP 포장으로 포장되어 가속시험장치($40^{\circ}C/75%$ Relative Humidity)에서 3개월 동안 진행하였다. 가시적인 시험결과로는 백색의 가루 또는 밝은 갈색으로 변화는 없었다. 모든 첨가제들과 pravastatin 혼합 시 pravastatin 함량 및 순도에 있어 아주 적은 수준으로 영향을 주었으며, 그 중 pravastatin의 lactone 함량의 변화가 조금 있는 첨가제로는 microcrystalline cellulose 및 croscamellose sodium이었다. 초기의 pravastatin의 lactone 함량과 비교 시 약 0.22% 및 0.18%로 증가하였고 모든 첨가제들과의 전체 혼합 시도 3개월에서 lactone 함량이 0.43%로 증가하는 것을 확인 하였다. 이번 연구 결과들은 복용편리성을 위한 pravastatin 정제 크기 감소 연구에 크게 기여 할 것으로 판단된다.
The ultrasound-guided oocytes cllection (ovum pick-up ; OPU) has become a substitution for superovlation in cattle. The objective of this study was to examine the effect of OPU frequency on the in vitro production of embryos in Hanwoo cattle. Six cycling Hanwoo cows were distributed into two groups for either once or twice weekly OPU sessions. Oocytes were collected by ultrasound-guided follicle aspiration(SA600) using a 6.5HMz transducer and attached with 18 gauge needle, with vacuum pressure of 40 mmHg. The cumulus-oocyte complexes (COCs) collected from each donor were matured in TCM 199 supplemented with 10% fetal bovine serum at 5% CO2 in air at 38.5$^{\circ}C$ for 22h and in vitro matured oocytes were co-incubated with sperm(separated by Percoll gradient) for 6h. The zygotes were co-cultured on cumulus cell monolayer in 10ul droplets in the same culture medium and conditions used for IVM for 7 days. On Day 7 of culture, development to blastocysts was examined. Although the number of oocytes collected was variable depending on individuals, overall embryo production in the twice per week OPU sessions was better that in the once per week sessions(6~21 vs 2~7 blastocysts produced, respectively). Two cows(E, A) were good oocyte donors and embryo production was superior in cow C ; however, cow F was a poor donor as compared to the others. In conclusion, these results suggest that for embryo production, twice weekly OPU sessions were better than once per week for producing embryos in vitro from Hanwoo cattle.
This study was carried out to investigate the effects of the supplementation of glutamine, glucosamine and glutathione on the porcine oocytes on IVM rates. Cocs were incubated in NCSU-23 supplemented with at $2.0{\sim}10.0\;mM$ glucosamine, $0.5{\sim}4.0\;mM$ glutamine and $0.1{\sim}1.0\;mM$ glutathione for 48 hrs. Oocytes were transferred to 50 ul drops of maturation medium covered with mineral oil and cultured in a $CO_2$ incubator ($38^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% air). The IVM rates of oocytes cultured in NCSU-23 supplemented with 0.5, 1.0, 2.0 and 4.0 mM glutamine for 48 hrs were $46.0{\pm}4.5%$, $52.0{\pm}4.8%$, $50.0{\pm}4.2%$ and $44.0{\pm}4.5%$, respectively. The IVM rates of oocytes cultured in NCSU-23 supplement with 2.0, 5.0, 7.0, 10.0 mM glucosamine for 48 hrs were $44.0{\pm}4.5%$, $42.0{\pm}4.5%$, $38.0{\pm}4.6%$ and $24.0{\pm}4.8%$, respectively. The IVM rates of oocytes cultured in NCSU-23 supplemented with glucosamine were no significantly increased compare to the control ($42.5{\pm}4.0%$). The IVM rate of oocytes cultured in NCSU-23 supplemented with 3.0, 5.0, 7.0, 10.0 mM glutathione for 48 hrs were $40.0{\pm}3.2%$, $54.0{\pm}4.2%$, $48.0{\pm}4.5%$, $44.0{\pm}4.8%$, respectively. The IVM rate of oocytes cultured in NCSU-23 supplemented with glutamine and glutathione were significantly increased co~pared to those control ($42.5{\pm}4.0%$). Glucosamine did not affect the IVM rates of oocytes. IVM rates of oocytes cultured in NCSU-23 medium for 48 hrs were significantly increased compared to the cultured for 40 hrs.
To maintain activity in a coenzyme/enzyme mixture system, such as ${\beta}$-nicotinamide adenine dinucleotide (NADH)/dehydrogenase, the water-soluble 2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine (MPC) polymers as an additive were synthesized and investigated for their stabilizing function. The inhibitor for the NADH/dehydrogenase reaction was spontaneously formed when the NADH was stored in the dehydrogenase solution. Therefore, we hypothesized that if the additive polymer could interact with an inhibitor without any adverse effect on the dehydrogenase, the activity in the NADH/dehydrogenase mixture could be maintained. We selected lactose dehydrogenase (LDH) as the enzyme, and the NADH was dissolved and incubated at $37^{\circ}C$ in the LDH solution containing the polymers. The phospholipid polymers used in this study were poly(MPC) (PMPC), poly(MPC-co-3-trimethylammonium-2-hydroxypropyl methacrylate chloride) (PMQ) and poly[MPC-co-potassium 3-methacryloyloxypropyl sulfonate ($MSO_3$)] ($PMMSO_3$). The poly($MSO_3$) was used as a reference. For the PMQ and $PMSO_3$ aqueous solutions, the activity of the NADH/LDH mixture system decreased with incubation time as the same level or lower than that in the Tris buffered solution in the absence of the polymers. However, for the poly($MPC-co-MSO_3$) ($PMMSO_3$) aqueous solution, the activity of the NADH/LDH mixed system was six times higher than that in the buffered solution even after a 3-days incubation. The LDH activity was 1.5-1.8 times higher in the presence of the $PMMSO_3$ compared with that in the $PMSO_3$ solution. The mixture of two polymers, poly(MPC) and poly($MSO_3$), did not produce any stabilization. Thus, both the MPC and $MSO_3$ units in the polymer chain had important and cooperative effects for stabilizing the NADH/LDH mixture.
Park, Yong-Sook;Choi, Jae-Young;Chang, Jong-Hee;Park, Yong-Gou;Chang, Jin-Woo
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제38권1호
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pp.47-53
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2005
Objective : Anti-malaria drugs may modulate tumor resistance to chemotherapeutic agents, but it has not been proven effective in the treatment of malignant gliomas. The aim of this study was to determine whether adequate pre-clinical data on co-administration of chemotherapeutic agents with anti-malaria drugs on malignant cell lines could be obtained that would warrant its further potential consideration for use in a clinical trial for malignant gliomas. Methods : Two malignant glioma cell lines [U87MG, T98G] were treated with chemotherapeutic agents alone or with anti-malaria drugs. Cells were incubated with drugs for 4 days. Following the 4-day incubation, drug sensitivity assays were performed using 3-[4,5-dimethyl-2-thiazol-2-yl] 2,5-diphenyltetrazolium bromide [MTT] assay following optimization of experimental conditions for each cell lines and cell viability was calculated. Results : In all of four chemotherapeutic agents[doxorubicin. vincrisitne, nimustine, and cisplatin], the cell viability was found to be markedly decreased when hydroxychloroquine was co-administered on both U87MG and T98G cell lines. The two way analysis of variance[ANOVA] yielded a statistically significant two-sided p-value of 0.0033[doxorubicin], 0.0005[vincrisitne], 0.0007[nimustine], and 0.0003[cisplatin] on U87MG cell lines and 0.0006[doxorubicin], 0.0421[vincrisitne], 0.0317[nimustine], and 0.0001[cisplatin] on T98G cell lines, respectively. However, treatment with chloroquine and primaquine did not induce a decrease in cell viability on both U87MG and T98G cell lines. Conclusion : Our data support further consideration of the use of hydroxychloroquine prior to systemic chemotherapy to maximize its tumoricidal effect for patients with malignant gliomas.
본 연구에서는 프로바이오틱스 유래 엑소좀 유사 나노베지클을 분리하고, 피부에 대한 여러 가지 생리활성을 평가했다. 프로바이오틱스의 한 종인 Lactococcus lactis subsp. lactis (LL)를 배양하고 고압균질기와 한외여과를 통해 70 ~ 200 nm 크기를 갖는 LL 유래 엑소좀 유사 나노베지클(LVs)을 분리했다. 나노입자추적분석 결과 1.81 × 1011 particles/mL로 나타났다. LVs를 섬유아세포와 피부각질세포에 처리하여 피부 주름과 장벽 개선과 관련된 효능을 확인했다. 우선 섬유아세포에서 fibrillin (FBN1) 유전자 발현량이 23%, 피부각질세포에서 fibronectin (FN1)과 filaggrin (FGN) 유전자 발현량이 각각 65%, 400% 증가했다. 그리고 각질형성능은 대조군 대비 30% 증가함을 확인할 수 있었다. 또한, UV 조사한 피부각질세포에 LVs를 처리했을 때 collagen type I alpha 1 (COL1A1)이 대조군 대비 약 83% 증가하는 결과를 보여주었다. 이로써 프로바이오틱스 유래 엑소좀 유사 나노베지클은 장벽 개선과 관련하여 화장품 및 의약품 소재로 이용할 수 있음을 확인했다.
Soo-Jin Oh;Ji-Ye Park;Bada Won;Yong-Taek Oh;Seung-Chan Yang;Ok Sarah Shin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제32권11호
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pp.1382-1389
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2022
Asterias pectinifera, a species of starfish and cause of concern in the aquaculture industry, was recently identified as a source of non-toxic and highly water-soluble collagen peptides. In this study, we investigated the antioxidant and anti-photoaging functions of compounds formulated using collagen peptides from extracts of Asterias pectinifera and Halocynthia roretzi (AH). Our results showed that AH compounds have various skin protective functions, including antioxidant effects, determined by measuring the scavenging activity of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radicals, as well as anti-melanogenic effects, determined by measuring tyrosinase inhibition activity. To determine whether ethosome-encapsulated AH compounds (E(AH)) exert ultraviolet (UV)-protective effects, human dermal fibroblasts or keratinocytes were incubated with E(AH) before and after exposure to UVA or UVB. E(AH) treatment led to inhibition of photoaging-induced secretion of matrix metalloproteinase-1 and interleukin-6 and -8, which are associated with inflammatory responses during UV irradiation. Finally, the antibacterial effects of AH and E(AH) were confirmed against both gram-negative and gram-positive bacteria. Our results indicate that E(AH) has the potential for use in the development of cosmetics with a range of skin protective functions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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