To investigate the effects of chitosan on the redifferentiation of dedifferentiated chondrocytes, we used chondrocytes obtained from a micromass culture system. Micromass cultures of chick wing bud mesenchymal cells yielded differentiated chondrocytes, but these dedifferentiated during serial monolayer subculture. When the dedifferentiated chondrocytes were cultured on chitosan membranes they regained the phenotype of differentiated chondrocytes. Expression of protein kinase $C{\alpha}$ ($PKC{\alpha}$) increased during chondrogenesis, decreased during dedifferentiation, and increased again during redifferentiation. Treatment of the cultures with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) inhibited redifferentiation and down-regulated $PKC{\alpha}$. In addition, the expression of p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase increased during redifferentiation, and its inhibition suppressed redifferentiation. These findings establish a culture system for producing chondrocytes, point to a new role of chitosan in the redifferentiation of dedifferentiated chondrocytes, and show that $PKC{\alpha}$ and p38 MAP kinase activities are required for chondrocyte redifferentiation in this model system.
동결건조한 chitosan-ascorbate(CAs)와 chitosan-acetate(CAc)의 용해성, 항균성, 항산화성을 비교하였다. 용해성을 조사한 결과 CAs는 증류수, 식초, 녹차, 소주, 맥주, 적포도주에 0.5%이상의 농도로 용해되었으나 간장, 두유, 우유, 오렌지주스, 커피, 참기름, 대두유에는 녹지 않았다. CAc도 CAs의 경우와 비슷하나 맥주에서는 0.1%이하의 농도에서 용해되었으며 적포도주에서는 커드를 형성하였다. CAc의 전자공여능, 항산화능 및 SOD활성은 CAc에서는 각각 0, 40.0 및 10.0%였으나 CAs의 경우는 48.2, 90.6 및 67.5%로 CAc보다 높은 활성을 나타내었다. B. circulans, B. brevis, B. licheniformis, B. arabitane, B. sterothermophillus에 대한 CAs와 CAc의 최소저해농도(MIC)는 다같이 $200\;{\mu}g/disc$이었으며, E. coli O157, Listeria monocytogenous, B. cereus, B. subtilis에 대한 MIC는 다같이 $400\;{\mu}g/disc$으로 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. CAs와 CAc의 Hunter's L*값은 $81.95{\sim}82.97$로 뚜렷한 차이가 없었으나 Hunter's a* 및 b*값은 CAs가 높았다. 관능검사 결과, CAs는 CAc에 비하여 신맛과 쓴맛은 낮았으나 떫은맛은 뚜렷한 차이가 없었다. 결론적으로 CAs는 CAc에 비하여 항균성, 항산화성 및 기호도 측면에서 우수하여 식품에의 활용이 기대된다.
The study was carried out to develop useful formulation for omeprazole(OMP) through OMP-ethylendiamine complex(OMPED), and the pharmaceutical properties of formula were tested to find out the difference in vivo behaviors of formulations between the free and complexed OMP. Oral and suppository dosage forms were also formulated and the dissolution profiles and pharmacokinetic parameters were measured to observe the difference in bioavailability between the free and complex form, and the correlation between dissolution rate and bioavailability was evaluated. The results are summarized as follows; In the case of formulation for oral administration, the release of OMP from enteric OMPED pellets was found satisfactory to the requirement standard and no decomposition of OMP in the pellets was found in acidic solution. Therefore the enteric OMPED pellets are anticipated to be a stable formulation. The release of OMP from OMPED tablet with chitosan as excipient and coated with cellulose acetate phthalate was found to be significantly retarded. The results of bioavailability test for OMP and OMPED tablets with lactose-excipient showed that the AUC value of OMP tablet was $116.89\;{\mu}g\;{\cdot}\;min/ml$, that of OMPED tablet was $161.10\;{\mu}g\;{\cdot}\;min/ml$, respectively. The reason why was thought that OMP decomposes more readily in body than OMPED, and the AUC of the tablet with chitosan-excipient and coated with cellulose acetate phthalate was most enhanced. In the case of bioavailability for suppositories with OMP, $OMP-{\beta}\;-cyclodextrin$ complex and OMPED, the AUC of OMPED suppository was most increased. From the above results, it is thought that the more stable and bioavailable oral or rectal dosage forms could be developed by using the OMPED as a potential OMP complex.
키토산 마이크로캡슐 및 마이크로비드를 W/O emulsion법에 의해 제조하였으며, SEM을 통해 이들의 morphology를 관찰하였다. 마이크로캡슐은 SEM을 통해 관찰한 결과 약 8$mu extrm{m}$ 정도의 표피층을 가지고 있었으며, 평균 입자의 크기는 약 250$\mu\textrm{m}$ 이였다. 마이크로캡슐의 팽윤부피를 측정한 결과 양성자성 용매가 비양성자성 용매에 비해 상대적으로 높은 팽윤성을 보였다. 또한 메칠바이올렛을 함유시킨 후 그 방출거동을 pH 변화 및 라이소자임 첨가에 따라 관찰한 결과, pH 5.1에서 라이소자임 첨가시 방출속도가 높게 나타났다. 한편 W/O emulsion법에 의해 제조한 마이크로비드의 경우 70$\mu\textrm{m}$정도의 크기를 보였으며 다공성의 표면구조를 나타내었다. 용매 종류별 팽윤성을 측정한 결과 수용액에서 마이크로캡슐에 비해 2배 이상의 팽윤부피를 나타내었다.
Poly(vinyl alcohol) (PVA) is a polymeric biomaterial that obtained by the saponification of poly(vinyl acetate) (PVAc). It has a nontoxic and water-soluble synthetic polymer, and has excellent biodegradability, biocompatibility, ability of film forming, and hydrophilic property, which is widely used in biochemical and biomedical applications.$\^$1)/ Chitosan is one of a few natural cationic polysaccharides that can be obtaiend by alkaline deacetylation of chitin which is the second most abundant polymeric material in the earth.$\^$2)/ (omitted)
Chitosan의 산업적 응용분야 중 효소의 고정화담체로서의 이용 가능성을 확인하기 위한 방법으로 알코올 발효공업에서 다량으로 사용되어지고 있는 담화효소인 amyloglucosidase를 공유결합에 의한 고정화를 시도, 여러가지 반응조건에서의 활성변화를 free enzyme과 비교해 보았으며, 생산공정에서 사용되어지고 있는 액화전분용액에 대한 반응을 실시하여 효소고정화를 위한 담체로서의 chitosan 적용가능성을 검토한 결과, 제조되어진 chitosan bead의 직경은 약 1.2mm 정도였으며 고정화시에 AMG의 농도 6mg/ml가 최적의 반응액농도로서 더 이상의 농도 증가에도 불구하고 거의 일정한 수준의 고정화율을 나타내었으며 pH 4.2인 0.01 M sodium acetate 완충액, 반응온도 $55^{\circ}C$, 15min의 조건에서 free enzyme에 대한 상대효소활성도는 $97.8\%$에 달하였고, 고정화효소의 효소활성의 최적온도조건은 $55^{\circ}C$로서 free enzyme의 그것과 동일한 것으로 나타났다. 고정화효소의 최적 활성조건은 pH 4.2로서 free enzyme과 동일하였으며 중성 이후의 영역에서는 free enzyme에 비하여 상대적으로 높은 효소활성을 나타내었고, 열에 대한 내성에 있어서, 가열온도 $30^{\circ}C$를 기점으로 free enzyme에 비하여 상대적으로 소폭 증대되어진 활성을 가지고 있는 것으로 나타났다. 알코올발효용 액화전분용액에 대한 free enzyme 및 고정화효소의 반응시, 두 시료 모두 $55^{\circ}C$에서 최대의 활성을 나타내었으나 고정화효소의 free enzyme에 대한 상대활성도는 $62.6\%$ 였다.
본 연구에서는 제주 자생해조류인 감태로부터 제조한 ethyl acetate 분획물의 비만 세포에 대한 항알러지 활성에 관한 연구를 수행하였다. IgE/BSA로 활성화시킨 비만 세포에서 EC-EtoAc는 세포 독성 없이 비만 세포의 탈과립 지표로 사용되는 ${\beta}$-hexosaminidase의 분비 뿐만 아니라 알러지 유발성 케모카인(TARC)과 사이토카인(IL-$1{\beta}$, IL-4, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-${\gamma}$ 및 TNF-${\alpha}$)의 mRNA 발현을 억제하였다. 또한, EC-EtoAc는 비만 세포의 표면 리셉터인 $Fc{\varepsilon}RI$의 발현 및 IgE와 $Fc{\varepsilon}RI$의 결합능을 감소시켰다. 이 모든 결과로부터, 감태 유래 분획물인 EC-EtoAc가 활성화된 비만 세포에서 $Fc{\varepsilon}RI$의 발현 및 IgE와 $Fc{\varepsilon}RI$의 결합능을 감소시킴으로써 알러지 유발성 매개 인자들의 분비와 발현 등을 감소시켜 항알러지 효능을 가진다는 것을 알 수 있었다. 또한, 이 연구 결과는 EC-EtoAc가 항알러지 효능을 보이는 천연 소재로서 이용가치가 있다는 것을 제시한다.
개의 표재성 농피증으로부터 분리된 Staphylococcus intermedius에 대한 0.1%(w/v) 키토산의 항균효과를 조사하였다. In vitro에서 0.1% 키토산이 S. intermedius에 대한 항균효과를 나타내기 위한 접촉시간과 키토산 용액의 pH가 미치는 영향을 조사하였다. In vivo에서 10두의 개의 피부에 인공적으로 S. intermedius를 접종하여 0.1% 키토산, 2.5% benzoyl peroxide, 0.5% chlorhexidine, 키토산-benzoyl peroxide 혼합용액, 키토산-chlorhexidine 혼합용액의 항균효과를 modified detergent cup scrub technique을 이용하여 비교하였다. In vitro에서 접종액의 내의 세균수는 $6.08{\pm}0.20CFU/ml$ 이었으며 pH 4.5 용액의 경우 10분, 30분, 120분의 접촉시간 후 각각 $3.57{\pm}0.51,\;2.82{\pm}0.24,\;2.40{\pm}0.17CFU/ml$로 감소하였다. 동일한 각각의 접촉시간후 pH 5.0 용액은 $4.22{\pm}0.08,\;3.44{\pm}0.41,\;3.16{\pm}0.09$, pH 5.5 용액은 $4.75{\pm}0.14,\;4.32{\pm}0.08,\;3.53{\pm}0.33$, pH 5.9 용액은 $5.57{\pm}0.36,\;5.02{\pm}0.42,\;4.87{\pm}0.12CFU/ml$로 감소하였다. 따라서 pH에 따라 정도의 차이는 있었으나 모든 키토산 용액은 10분의 접촉시간후 현저한 항균효과를 나타내었으며 (p<0.05) pH 4.5에서 가장 높게 나타났다. In vivo에서 접종액내의 세균수는 $6.61{\pm}0.30CFU/cm^2$ 이었으며 키토산은 $3.25{\pm}0.98$, benzoyl peroxide는 $0.68{\pm}1.13$, chlorhexidine은 $3.14{\pm}0.55$, 키토산-benzoyl peroxide은 $0.48{\pm}0.56$, 키토산-chlorhexidine은 $2.55{\pm}0.88CFU/ml$로 각각 현저히 감소하였다 (p<0.01). 0.1% 키토산 단독보다는 소량의 benzoyl peroxide 또는 chlorhexidine을 혼합용액의 항균효과가 현저히 증가하였다. 따라서 0.1%키토산은 S. intermedius에 대하여 in vitro 및 in vivo에서 항균효과를 나타내었으며 개의 화농성 농피증의 국소제제로 적용가능성이 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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