A RecA-like protein (RecAps) was identified from fluorescent Pseudomonas sp. and the inducible nature of the protein was characterized in detail. It was shown by dose-response and time-course experiments using two DNA damaging agents, nalidixic acid and mitomycin-C, that the cellular level of RecAps protein was increased 3-8 fold compared to that of the control. The most effective doses of nalidixic acid and mitomycin-C for the protein induction were $30{\mu}g/ml$ and $0.3{\mu}g/ml$ at the treatment time point of 150 min, respectively. The enhanced level of RecAps protein was gradually decreased to the control level after 10 hr in normal medium. Interestingly, the cellular level of RecAps protein was increased by the same DNA damaging agents even when cell growth was completely inhibited by treatment with $170{\mu}g/ml$ of chloramphenicol, an inhibitor of protein synthesis, suggesting that new protein synthesis is not required for the induction of RecAps. All these results suggest that a typical S0S repair function driven by RecA-like protein is conserved in Pseudomonas sp. cells as in E, coli.
Biological corrosion, a crucial aspect of metal degradation, has received limited attention despite its significance. It involves the deterioration of metals due to corrosion processes influenced by living organisms, including bacteria. Soil represents a substantial threat to pipeline corrosion as it contains chemical and microbial factors that cause severe damage to water, oil, and gas transmission projects. To combat fouling and corrosion, corrosion inhibitors are commonly used; however, their production often involves expensive and hazardous chemicals. Consequently, researchers are exploring natural and eco-friendly alternatives, specifically nano-sized products, as potent corrosion inhibitors. This study aims to environmentally synthesize silver nanoparticles using an extract from Lagoecia cuminoides L and evaluate their effectiveness in preventing biological corrosion of buried pipes in soil. The optimal experimental conditions were determined as follows: a volume of 4 ml for the extract, a volume of 4 ml for silver nitrate (AgNO3), pH 9, a duration of 60 minutes, and a temperature of 60 degrees Celsius. Analysis using transmission electron microscopy confirmed the formation of nanoparticles with an average size of approximately 28 nm, while X-ray diffraction patterns exhibited suitable peak intensities. By employing the Scherer equation, the average particle size was estimated to be around 30 nm. Furthermore, antibacterial studies revealed the potent antibacterial activity of the synthesized silver nanoparticles against both aerobic and anaerobic bacteria. This property effectively mitigates the biological corrosion caused by bacteria in steel pipes buried in soil.
세리아 미세입자는 자동차, 석유공정, 폐수처리 등 다양한 분야에서 촉매로서 널리 쓰이고 있는 중요한 물질이다. 이제까지, 세리아 미세입자를 제조하기 위한 다양한 제조법이 연구되었는데, 본 연구에서는 짧은 반응시간과 간단한 공정이 가능한 초임계 메탄올을 이용하는 입자 제조 공정을 통해 세리아 나노입자를 제조하였다. 회분식 반응기를 이용하여 짧은 시간 안에 세리아 나노입자를 제조하는데 성공하였다. 초임계 메탄올을 이용하여 세리아 나노입자를 제조하는 경우, 다른 첨가제 없이도 약 6 nm의 크기를 갖는 나노입자를 합성할 수 있었다. 이 크기는 같은 온도와 압력조건의 초임계수를 이용하여 표면개질제 없이 합성한 입자보다 훨씬 작은 크기이다. 이는 초임계수와 초임계 메탄올의 밀도 차이와, 초임계 메탄올에서의 세리아 표면에서 일어나는 결정성장을 제한하는 반응, 그리고 초임계 메탄올과 초임계수의 임계점의 차이에서 기인하는 것이다. 또한 여러 가지 유기물을 표면개질제로 첨가하여 표면을 개질한 세리아 나노입자를 제조하였으며, FT-IR과 HR-TEM, TGA를 통해 이를 확인할 수 있었다. 표면을 개질한 세리아 나노입자는 표면개질을 하지 않은 세리아 나노입자와는 다르게, 유기용매에 대한 분산성이 뛰어났으며, 표면개질제로 사용하는 유기물의 양과 종류를 조절함으로써 세리아 나노입자의 크기와 모양을 조절할 수 있었다.
Cadaverine (1,5-diaminopentane) is an important industrial chemical with a wide range of applications. Although there have been many efforts to produce cadaverine through fermentation, there are not many reports of the direct cadaverine production from lysine using biotransformation. Whole-cell reactions were examined using a recombinant Escherichia coli strain overexpressing the E. coli MG1655 cadA gene, and various parameters were investigated for the whole-cell bioconversion of lysine to cadaverine. A high concentration of lysine resulted in the synthesis of pyridoxal-5'-phosphate (PLP) and it was found to be a critical control factor for the biotransformation of lysine to cadaverine. When 0.025 mM PLP and 1.75 M lysine in 500 mM sodium acetate buffer (pH6) were used, consumption of 91% lysine and conversion of about 80% lysine to cadaverine were successfully achieved.
Phosphomannomutase (ManB) is involved in the biosynthesis of GDP-mannose, which is vital for numerous processes such as synthesis of carbohydrates, production of alginates and ascorbic acid, and post-translational modification of proteins. Here, we discovered that a deletion mutant of manB (BG101) in Streptomyces coelicolor (S. coelicolor) showed higher sensitivity to bacteriostatic chloramphenicol (CM) than the wild-type strain (M145), along with decreased production of CM metabolites. Deletion of manB also decreased the mRNA expression level of drug efflux pumps (i.e., cmlR1 and cmlR2) in S. coelicolor, resulting in increased sensitivity to CM. This is the first report on changes in antibiotic sensitivity to CM by deletion of one glycolysis-related enzyme in S. coelicolor, and the results suggest different approaches for studying the antibiotic-resistant mechanism and its regulation.
Hyun Jin Kim;Sion Ham;Nara-Shin;Jeong Hyeon Hwang;Suk Jin Oh;Tae-Rim Choi;Jeong Chan Joo;Shashi Kant Bhatia;Yung-Hun Yang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제34권4호
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pp.969-977
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2024
Indigo is a valuable, natural blue dye that has been used for centuries in the textile industry. The large-scale commercial production of indigo relies on its extraction from plants and chemical synthesis. Studies are being conducted to develop methods for environment-friendly and sustainable production of indigo using genetically engineered microbes. Here, to enhance the yield of bioindigo from an E. coli whole-cell system containing tryptophanase (TnaA) and flavin-containing monooxygenase (FMO), we evaluated tryptophan transporters to improve the transport of aromatic compounds, such as indole and tryptophan, which are not easily soluble and passable through cell walls. Among the three transporters, Mtr, AroP, and TnaB, AroP enhanced indigo production the most. The combination of each transporter with AroP was also evaluated, and the combination of AroP and TnaB showed the best performance compared to the single transporters and two transporters. Bioindigo production was then optimized by examining the culture medium, temperature, isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside concentration, shaking speed (rpm), and pH. The novel strain containing aroP and tnaB plasmid with tnaA and FMO produced 8.77 mM (2.3 g/l) of bioindigo after 66 h of culture. The produced bioindigo was further recovered using a simple method and used as a watercolor dye, showing good mixing with other colors and color retention for a relatively long time. This study presents an effective strategy for enhancing indigo production using a combination of transporters.
By the in vitro combinatorial mutagenesis, which is a sequential reaction of PCR mutagenesis and in vitro coupled transcription/translation with Escherichia coli S30 extract, S65 and E222 of green fluorescent protein of Aequarea victoria were comprehensively changed to all possible combinations of amino acids, thus totally 400 mutant (including a wild type) proteins were simultaneously produced and their fluorescent properties were analyzed. Although a few mutations had been reported so far at the 222nd position, replacement E222 to all other19 amino acids gave fluorescent signal to the mutants by changing Ser 65 to Ala together. Among the mutants, replacement to G, A, S, Q, H and C gave relatively high fluorescence. The in vitro combinatorial mutagenesis, therefore, has been proved valuable for comprehensive structure-function studies of proteins.
본 연구에서는 마늘 중의 항미생물 작용을 가지고 있는 allyl-2-propenyl-1-thiosulfinate의 유사체들인 alkyl thiosulfinate 및 이의 산화물인 thiosulfonate화합물들을 합성하고 이들의 생물 활성을 검사하였다. Alkylsulfinate는 이황화 화합물(disulfide)를 유기 과산화산으로, 또 alkyl thiosulfonate는 thiosulfinite를 sodium periodate로 산화시켜 합성하였다. 합성한 모든 alkylthiosulfinate 및 alkyl thiosulfonate들은 Staphylococcus aureus B33에 대해서는 항세균성을, Candida utilis ATCC42416에 대해서는 항곰팡이성을 나타내었다. 나아가 이들 화합물들은 항산화성과 항응고 활성도 나타내었다.
The aim of the present research program was to identify and develop strains of actinomycetes producing antifungal antibiotics which inhibit cell wall biosynthesis. 860 strains of Actinomycetes were isolated from various soil samples. Three isolates, EMS4, EMP22, and L234 were selected as the strains producing antifungal antibiotics inducing abnormal morphology against Penicillium cyclopium, Cryptococcus laurentii, and Aspergillus flavus, respectively. Taxonomic unit characters of the strains were tested and the data were analyzed numerically using TAXON program. EMS4, EMP22, and L234 were indentified to be a member of Streptomyces lavendulae, Streptomyces willmorei, and Streptomyces aburaviensis, respectively.
In our previous studies, we have cloned and characterized a gene region from Bradyrhizobium japonicum ,which is involved in the synthesis of lipopolysaccharide (LPS). In this study, we have expanded the sequence analysis of the region and found an additional open reading frame (orf), which appeared to be divergently transcribed from the rfaF gene. Sequence alignment of the orf revealed a significant similarity with rfaD genes of Salmonella typhimurium , Escherichia coli, and Neisseria gonorrhoeae. These genes encode a heptose-6-epimerase, which catalyzes the interconversion of ADP -D -glycerol-D-manno-heptose to ADP-L-glycero-D-manno-heptose. This divergent organization of the rfaF and rfaD genes is different from that of other Gram-negative bacteria where two genes form an operon. A rfaD- mutant of E. coli was successfully transformed with plasmid constructs containing the rfaD gene of B. japonicum. Novobiocin sensitivity test showed that the rfaD gene from B. japonicum could complement the rfaD mutation in E. coli, which confirms the functionality of the cloned B. japonicum gene.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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