Two conserved amino acid residues in the extra sugar-binding space near the catalytic site of Thermus maltogenic amylase (ThMA) were analyzed for their role in the hydrolysis and transglycosylation activity of the enzyme. Site-directed mutagenesis was carried out by replacing N33l with a lysine (N331K), E332 with a histidine (E332H), or by replacing both residues at the same time (N331K/E332H). The measured $K_m$ values indicated that affinities toward all substrates tested, including starch, pullulan, ${\beta}-cyclomaltodextrin$, and acarbose, were lower in all the mutants compared to that of wild-type ThMA, leading to reduced hydrolysis activity. In addition, the lower ratio of transglycosylation to hydrolysis in the mutants compared to that in the wild-type ThMA indicated that these mutants preferred hydrolysis to the transglycosylation reaction. These results demonstrated that the conserved dipeptide at 331 and 332 of ThMA is directly involved in the formation and accumulation of transfer products by accommodating acceptor sugar molecules.
The properties of surimi gel from Olive flounder Paralichthys olivaceus were evaluated with addition of various food additives and by heating under different conditions. The optimum heating conditions for get good textured surimi gel from Olive flounder was 40 minutes at $85^{\circ}C$. Optimum texture characteristics such as hardness, cohesiveness, chewiness, gumminess and gel strength of olive flounder fish paste can be acquired by washing the paste 2 times and by adding sodium chloride (2.5%), sodium polyphosphate (0.3%) and starch (4%), respectively. Furthermore, we compared gel texture characteristics and strength of manufactured Olive flounder fish surimi with commercial Alaska pollack to determine their commercial applicability. Texture characteristics and gel strength of Olive flounder surimi were higher than those of the commercial Alaska pollack surimi. In addition, both lightness and whiteness were higher in surimi gel from Olive flounder than from the commercial Alaska pollack.
In the current study, we investigated the inhibitory activity of water soluble ${\beta}-glucan$ from oat (Avena sativa) against various digestive enzymes such as ${\alpha}-glucosidase$, sucrase, maltase and glucoamylase. Inhibition of these enzymes involved in the absorption of disaccharide can significantly decrease the post-prandial increase of blood glucose level after a mixed carbohydrate diet. The ${\beta}-glucan$ had the highest documented rate of small intestinal sucrase inhibitory activity (2.83 mg/mL, $IC_{50}$) relevant for potentially managing post-prandial hyperglycemia. Furthermore, we evaluated the effects of ${\beta}-glucan$ on the level of post-prandial blood glucose in animal model. The post-prandial blood glucose levels were tested two hours after sucrose/starch administration, with and without ${\beta}-glucan$ (100, and 500 mg/kg-body weight). The maximum blood glucose levels (Cmax) of ${\beta}-glucan$ administration group were decreased by about 23% (from $219.06{\pm}27.82$ to $190.44{\pm}13.18$, p<0.05) and 10% (from $182.44{\pm}13.77$ to $165.64{\pm}10.59$, p<0.01) in starch and sucrose loading test, respectively, when compared to control in pharmacodynamics study. The ${\beta}-Glucan$ administration significantly lowered the mean, maximum, and minimum level of post-prandial blood glucose at 30 min after meal. In view of the foregoing, it is felt that our findings suggest that ${\beta}-glucan$ from oat serves to reduce post-prandial blood glucose rise secondary to slower absorption of glucose in the small intestine, via carbohydrate hydrolyzing enzymes inhibition.
Seo, Dong-Cheol;Ko, Jeong-Ae;Gal, Sang-Won;Lee, Sang-Won
Journal of Life Science
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v.20
no.3
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pp.403-410
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2010
In order to produce high-quality fermenting composts, a microorganism was isolated from the natural world. The bacterium has not only in high enzyme activities but also had good antimicrobial activities against phytopathogenic microorganisms. Its cultivating characteristics were then investigated. Bacterium KJ-9, which contains high CMCase, protease and chitinase activities and excellent antimicrobial activities against phytopathogenic microorganisms, was separated from leaf mold and identified as Bacillus licheniformis by two methods: Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and API 50 CHL Carbohydrate Test Kit (Bio Merieux, France) using an ATB (Automated Identification) computer system (Bio Merieux, France). Optimal medium for cultivation of B. licheniformis was 2% soluble starch as a carbon source, 0.5% yeast extract as a nitrogen source and 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$. Optimal growth conditions of pH, temperature and shake speed were pH 7.0, $50^{\circ}C$ and 180 rpm, respectively. Culture broth of B. licheniformis KJ-9 cultured for 36~60 hr was effective in fungicidal activities against plant pathogens including Botrytis cinerea, Corynespora cassicola, Fusarium oxysporum, and Rhizoctonia solani.
Benrahou, Kaoutar;El Guourrami, Otman;Mrabti, Hanae Naceiri;Cherrah, Yahia;My El Abbes, Faouzi
Journal of Pharmacopuncture
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v.25
no.3
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pp.242-249
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2022
Objectives: The aim of this work is to evaluate the in vitro antioxidant, hypoglycemic, and antiobesity effects of Euphorbia resinifera extracts and investigate the phenolic constituents and the toxicity of these extracts. Methods: Phytochemical screening was performed to detect polyphenols and flavonoids. Antioxidant activity was evaluated by four methods (DPPH, ABTS, H2O2, and xanthine oxidase inhibition). The hypoglycemic effect was determined by the inhibition of α-amylase and α-glucosidase enzymes in vitro and via a starch tolerance study in normal rats. The antiobesity effect was estimated by in vitro inhibition of lipase. Results: Phytochemical screening revealed that the ethanolic extract was rich in polyphenols (99 ± 0.56 mg GEA/g extract) and tannins (55.22 ± 0.17 mg RE/g extract). Moreover, this extract showed higher antioxidant activity in different tests: the DPPH assay (IC50 = 53.81 ± 1.83 ㎍/mL), ABTS assay (111.4 ± 2.64 mg TE/g extract), H2O2 (IC50 = 98.15 ± 0.68 ㎍/mL), and xanthine oxidase (IC50 = 10.26 ± 0.6 ㎍/mL). With respect to hypoglycemic effect, the aqueous and ethanolic extracts showed IC50 values of 119.7 ± 2.15 ㎍/mL and 102 ± 3.63 ㎍/mL for α-amylase and 121.4 ± 1.88 and 56.6 ± 1.12 ㎍/mL for α-glucosidase, respectively, and the extracts lowered blood glucose levels in normal starch-loaded rats. Additionally, lipase inhibition was observed with aqueous (IC50 = 25.3 ± 1.53 ㎍/mL) and ethanolic (IC50 = 13.7 ± 3.03 ㎍/mL) extracts. Conclusion: These findings show the antioxidant, hypoglycemic, and hyperlipidemic effects of E. resinifera extracts, which should be investigated further to validate their medicinal uses and their pharmaceutical applications.
A systematic study of microbial fuel cells comprised of thermophilic Bacillus licheniformis and Bacillus thermoglucosidasius has been carried out under various operating conditions. Substantial amount of electricity was generated when a redox mediator was used. Being affected by operation temperature, the maximum efficiency was obtained at 50$^{\circ}C$ with an open circuit voltage of ca. 0.7 V. While a small change around the optimum temperature did not make much effect on the cell performance, the rapid decrease in performance was observed above 70$^{\circ}C$. It was noticeable that fuel cell efficiency and discharge pattern strongly depended on the kind of carbon sources used in the initial culture medium. In the case of B. thermoglucosidasius, glucose alone was utilized constitutively as a substrate in the microbial fuel cell irrespective of used carbons sources. When B. licheniformis was cultivated with lactose as a carbon source, best charging characteristics were recorded. Trehalose, in particular, showed 41.2% coulombic efficiency when B. thermoglucosidasius was cultured in a starch-containing medium. Relatively good repetitive operation was possible with B. thermoglucosidasius cells up to 12 cycles using glucose as a carbon source, when they were cultured with lactose as an initial carbon source. This study demonstrates that highly efficient thermophilic microbial fuel cells can be constructed by a pertinent modulation of the operating conditions and by carefully selecting carbon sources used in the initial culture medium.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.44
no.4
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pp.1-7
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2012
The increase of OCC solid content after wet pressing will save drying energy greatly. We applied spacers, which used to increase draining rate and bulk in fiber furnishes, to increase the OCC solid contents. MDF fibers (fibers for making medium density fiberboard) and diatomaceous earth were used as spacers, and added 10% by weight to the OCC fiber furnish. Application of high wet pressing pressure to the mixed furnish of spacers and refined OCC did not deteriorate bulk and drainage rate, but their solid contents were increased to 0.5-1.5% without loss of compressive strength when compared to those of unrefined OCC, which is the furnish normally used for mill commercial practice. It is believed that the spacers caused the rate of solid content increase faster in the mixed furnish with OCC at high wet pressing pressure area than the unrefined OCC furnish did. Little amount of starch addition (0.5%) to the spacers helped to keep the strength properties.
$\alpha$-Amylase (EC.3.2.1.1) of Neurospora crassa (ATCC9279) was cloned in E. coli HB101 using shotgun method, and the enzymes isolated from both N. crassa and E. coli were compared. Chromosomal DNA isolated from the spores of N. crassa was partially digested with PstI restriction endonuclease and rejoined to pBR322 which had been digested with the same enzyme. The resulting recombinant DNA were introduced into E. coli HB101 which had competancy by treating with $CaCl_{2}$. As the result, about 8000 colonies which showed tetracycline resistance were selected and two of the colonies which had 13.5Kb recombinant plasmid exhibit starch degrading activity on starch-containing plate when treated with D-cycloserine. $\alpha$-Amylases from both N.crassa and E. coli were isolated by using ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Bio-Gel P150 gel foltration column. As the result, about 81.3 fold and 5.6 fold purifications in specific activities were obtained respectively, and specific activities of the gel filtrates were 6.1u/mg and 85u/mg respectively. The properties of both enzymes were compared and they showed quite the similar patterns in optimal temperature, optimal pH and had same molecular weight about 100,000 daltons on gel filtration method. Optimal temperatures for both enzymes were $70^{\circ}C$ and optimal pH were about 6 and 10.
Kim, Sang-Kuk;Choi, Hong-Jib;Kang, Sang-Mo;Lee, In-Jung;Kim, Hak-Yoon
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.56
no.1
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pp.94-98
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2011
Proximate chemical components (protein, oil, carbohydrate, ash, fiber, and starch) were determined from tubers grown in upland and wetland conditions. The contents of crude protein, oil, carbohydrate, and starch were higher in upland condition than in wetland condition. Eight gibberellins were commonly identified and quantified in leaves and tuber of chufa grown in wetland and upland field during growing season. Gibberellin content was always higher specifically in the leaves and tubers grown in wetland condition than in those grown in upland condition. The current knowledge of gibberellin biosynthesis suggests that the two endogenous bio-active gibberellins both $GA_1$ and $GA_4$ are differently metabolized according to cultural conditions. Major gibberellin biosynthesis route is ascertained dominantly the non C-13 hydroxylation pathway leading $GA_4$ in chufa plants.
Kim, Chul-Hwan;Song, Dae-Bin;Lee, Young-Min;Kim, Jae-Ok;Kim, Gyeong-Yun;Shin, Tae-Gi;Park, Chong-Yawl
Proceedings of the Korea Technical Association of the Pulp and Paper Industry Conference
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2006.06b
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pp.475-478
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2006
Environment-friendly shock-absorbing materials were made using a vacuum forming method from waste wood collected from local mountains in Korea. The waste wood was pulped by thermomechanical pulping. The TMP cushions showed superior shock-absorbing properties with lower elastic moduli compared to EPS and pulp mold. Even though the TMP cushions made using different suction times had many free voids in their inner fiber structure, their apparent densities were a little higher than EPS and much lower than pulp mold. The addition of cationic starch improved the elastic modulus of the TMP cushions without increasing the apparent density, which was different from surface sizing with starch. The porosity of the TMP cushions was a little greater than EPS and much less than pulp mold. Finally, the TMP cushions have great potential to endure external impacts occurring during goods distribution.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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