Epidemiological characteristics of a total of 48 swine herd with diarrhea or a history of diarrhea in Gyeongsang-do between 1999 and 2000 were performed to evaluate the prevalence of Salmonella spp., their serotypes and antibiotic resistance patterns with respect to the different stages of swine production system. A total of 139 Salmonella spp. (21%) were isolated from 662 fecal samples and the overall herd prevalence of Salmonella spp. ranged from 12.5% to 88%. The average prevalence of Salmonella spp. from swine stages of suckling/nursery, grow/finisher and sow stage were 25.7%, 19.2% and 18.4%, respectively. Ten serotypes of Salmonella spp. were identified with a predominance of S. Typhimurium, S. Derby and S. Agona. Twenty-five isolates (18%) were found to be untypable. One hundred and two Salmonella isolates (73.4%) resistant to more than 1 antibiotic were characterized by 24 diverse resistance patterns, and their frequency of antibiotic resistance was highest in grow/finisher stage (83.3%). Resistance to tetracycline (TE; 67.6%), sulfamethoxazole (SU; 46.8%) and streptomycin (ST; 28%) was most common and the most common resistance patterns were TE SU (31.4%), TE (21.6%) and TE SU ST (20.6%) in order.
Pseudomonas aeruginosa strain B5 with antagonistic activity against Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea, was isolated from pepper-growing soil. From the culture of P. aeruginosa strain B5 grown on King's medium B, antibiotic substances were purified using XAD-2 column chromatography. XAD-2 eluates inhibited not only the mycelial growth of P. capsid and M. grisea, but also the development of Phytophthora blight on pepper plants. The crude antibiotic substances were further purified by using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, thin layer chromatography on silica gel plates, and high performance liquid chromatography. Silica gel column chromatogrphy gave good separation of the four antibiotic substances. The pure antibiotics P1, P2, and P3 finally purified by preparative HPLC inhibited the mycelial growth of P. capsici, at concentrations from 7 to 10 $\mu g/ml$. Only P1 and P2 had antifungal activity against M. grisea at 8 $\mu g/ml$. P1 and P3 were highly inhibitory to the mycelial growth of Botryosphaeria dothidea and Botrytis cinerea at relatively low concentrations. However, the three antibiotics had no antifungal activity against Rhizoctonia solani. The chemical structures of these antibiotics are being identified.
Insights into gene expression have the potential for improvement of antibiotic yield and the development of robust production hosts for use in recombinant biomolecule production. $Cubicin^{TM}$ (daptomycin for injection) is a recently approved antibiotic active against many Gram(+) pathogens, including those resistant to methicillin, vancomycin, and fluoroquinolones. Daptomycin is produced as a secondary metabolite by Streptomyces roseosporus. A 128 kb region of DNA including the daptomycin biosynthetic gene cluster (dpt) has been cloned. and sequenced. Using a selected array of nucleic acid probes representing this region, we compared the expression levels of the dpt genes between S. roseosporus wild-type (WT) and derived S. roseosporus high-producer of daptomycin (HP). We observed that the majority of the biosynthetic genes were upregulated in HP compared with WT; a total of 12 genes, including those encoding daptomycin synthetase, showed consistently and significantly higher expression levels, at least 5-fold, in HP compared with WT. In contrast, some genes, flanking the dpt cluster, were expressed at higher levels in the WT strain. The expression of housekeeping genes such as S. roseosporus rpsL, rpsG, and 16S (positive controls) and presumptive intergenic regions in the dpt cluster (negative control) were identical in the two strains. In addition, we compared transcription during the early, mid-log, and early-stationary phases of growth in the HP strain. The same set of genes was upregulated and downregulated under all conditions examined; housekeeping genes showed no relative change in expression level over the periods of growth tested. Analyses of this type would be of value in studies of strain improvement and also for the identification of gene regulation processes that are important for secondary metabolite production.
S-Adenosylmethionine (SAM) is a ubiquitous biomolecule serving mainly as a methyl donor. Our recent studies revealed that SAM controls antibiotic production in Streptomyces. In this study, the functional mode of SAM was studied in S. coelicolor and S. antibioticus ATCC11891, employing S-adenosylhomocysteine (SAH), a methylation reaction product of SAM. Actinorhodin biosynthesis did not require SAM as a methyl donor, whereas SAH enhanced the actinorhodin biosynthesis up to the level comparable to SAM, and the most effective concentration of SAH was higher than that of SAM. In the case of oleandomycin that requires SAM for its biosynthesis, both SAM and SAH at the concentration as low as 100 mM showed comparable efficacy in enhancing the production; SAM at 1 mM concentration additionally stimulated to give a 5-fold enhancement of oleandomycin production. In vitro autophosphorylation of protein kinase AfsK was found to be activated by both SAM and SAH, as well as other structurally related compounds. Our studies demonstrate that SAM regulates antibiotic biosynthesis in a mode independent of its role as a methyl donor and suggest that SAM acts directly as an intracellular signaling molecule for Streptomyces.
Yang Young-Yell;Zhao Xin-Qing;Jin Ying-Yu;Huh Jung-Hyun;Cheng Jin-Hua;Singh Deepak;Kwon Hyung-Jin;Suh Joo-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.6
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pp.896-900
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2006
Cytokinin has been known to act as a plant hormone to promote cell division and function in diverse processes in plant growth and development. Besides being produced in plants, it is also produced by various bacteria and fungi; however, its ecological significance is still unclear. In this report, we present an interesting finding that transzeatin riboside (tZR), a naturally occurring cytokinin compound, increased antibiotic production in many different streptomycetes, including Streptomyces coelicolor Ml3O, S. pristinaespiralis ATCC 25486, S. violaceoruber Tu22, S. anfibioticus ATCC l1891, and S. griseus IFO 13350. In vitro plate assays showed that the addition of 100 $\mu$M tZR increased the growth inhibition of Pseudomonas syringae pv. syringae, a plant pathogen, by S. griseus, a streptomycin producer. We suggest that cytokinin could act as a signaling molecule for antibiotic production in streptomycetes, a group of rhizosphere bacteria.
The production of antibiotic substances by Serratia plymuthica A21-4 was greatly enhanced by modifying components of a growth medium. When the minimal medium containing $K_2HPO_4$ 0.7%, $KH_2PO_4$ 0.2%, $(NH_4)_2SO_4$ 0.1%, $MgSO_4$ 0.01% was used as basal medium, the best carbon source for antibiotic production was glycerol and the most favorable nitrogen source was ammonium sulfate. The modified medium for antibiotic production also increased colonization ability of A21-4 on pepper root and in the rhizosphere soil. When the cells of A21-4 were suspended in modified medium, the population density of A21-4 on pepper root was 10-100 times higher than that suspended in 0.1 M $MgSO_4$. The population density of A21-4 on root did not decrease under $10^6$ cfu/groot up to 21 days after treatment although the inoculum of A21-4 was reduced to $10^7$ cell/ml. Similar tendency was also observed in the rhizosphere soil. Consequently, Phytophthora blight of pepper was successfully controlled by A21-4 with $10^7$ cell/ml suspended in the modified buffer solution instead of $10^9$ cfu/ml suspended in 0.1 M $MgSO_4$.
An isolate capable of inhibiting the growth of gram-positive bacteria was obtained from the soil of Mushim stream, Cheongju. The isolate was identified as Pseudomonas otitidis PS by 16S rRNA gene sequence analysis. P. otitidis PS produced antibiotics as a secondary metabolite when cultured in 1% soybean meal with 0.5% glucose. The maximum yield was about 0.1%. The antibiotic substance of P. otitidis PS extracted using ethyl acetate displayed a minimum inhibitory concentration of $2{\mu}g/ml$ for Staphylococcus aureus KCTC 1261. The antibiotic substance produced an orange halo on chrome azurol S agar due to siderophore activity. Growth inhibition was decreased when the iron was depleted. Since the antibiotic activity was lost upon the addition of the reducing agent ascorbic acid or during anaerobic culture, it was considered that antibiotic of P. otitidis PS strain exerts its bactericidal effect by the generation of reactive oxygen species.
Gi Beom Keum;Eun Sol Kim;Jinho Cho;Minho Song;Kwang Kyo Oh;Jae Hyoung Cho;Sheena Kim;Hyeri Kim;Jinok Kwak;Hyunok Doo;Sriniwas Pandey;Hyeun Bum Kim;Ju-Hoon Lee
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.1
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pp.175-182
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2023
Antibiotics have been used in livestock production for not only treatment but also for increasing the effectiveness of animal feed, aiding animal growth, and preventing infectious diseases at the time when immunity is lowered due to stress. South Korea and the EU are among the countries that have prohibited the use of antibiotics for growth promotion in order to prevent indiscriminate use of antibiotics, as previous studies have shown that it may lead to increase in cases of antibiotic-resistant bacteria. Therefore, this study evaluated the number of antibiotic resistance genes in piglets staging from pre-weaning to weaning. Fecal samples were collected from 8 piglets just prior to weaning (21 d of age) and again one week after weaning (28 d of age). Total DNA was extracted from the 200 mg of feces collected from the 8 piglets. Whole metagenome shotgun sequencing was carried out using the Illumina Hi-Seq 2000 platform and raw sequence data were imported to Metagenomics Rapid Annotation using Subsystem Technology (MG-RAST) pipeline for microbial functional analysis. The results of this study did not show an increase in antibiotic-resistant bacteria although confirmed an increase in antibiotic-resistant genes as the consequence of changes in diet and environment during the experiment.
Khaleghi, M.;Kermanshahi, R. Kasra;Zarkesh-Esfahani, S.H.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.8
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pp.822-829
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2011
Evidence shows that probiotic bacteria can undergo substantial structural and morphological changes in response to environmental stresses, including antibiotics. Therefore, this study investigated the effects of penicillin G (0.015, 0.03, and 0.06 mg/l) on the morphology and adhesion of Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, including the colony morphotype, biofilm production, hydrophobicity, $H_2_O2$ formation, S-layer structure, and slpA gene expression. Whereas only smooth colonies grew in the presence of penicillin, rough and smooth colony types were observed in the control group. L. acidophilus ATCC 4356 was found to be hydrophobic under normal conditions, yet its hydrophobicity decreased in the presence of the antibiotic. No biofilm was produced by the bacterium, despite testing a variety of different culture conditions; however, treatment with penicillin G (0.015-0.06 mg/l) significantly decreased its production of $H_2_O_2$ formation and altered the S-layer protein structure and slpA gene expression. The S-protein expression decreased with 0.015 mg/l penicillin G, yet increased with 0.03 and 0.06 mg/l penicillin G. In addition, the slpA gene expression decreased in the presence of 0.015 mg/l of the antibiotic. In conclusion, penicillin G was able to alter the S-layer protein production, slpA gene expression, and certain physicochemical properties of Lactobacillus acidophilus ATCC 4356.
A psychrotolerant cyanobacterium, Nodularia spumigena KNUA005, was isolated from a cyanobacterial bloom sample collected near Dasan Station in Ny-${\AA}lesund$, Svalbard Islands during the Arctic summer season. To generate an axenic culture, the isolate was subjected to three purification steps: centrifugation, antibiotic treatment and streaking. The broad antibacterial spectrum of imipenem killed a wide range of heterotrophic bacteria, while the cyanobacterium was capable of enduring both antibiotics, the remaining contaminants that survived after treatment with imipenem were eliminated by the application of an aminoglycoside antibiotic, kanamycin. Physical separation by centrifugation and streaking techniques also aided axenic culture production. According to the cold-tolerance test, this mat-forming cyanobacterium was able to proliferate at low temperatures ranging between 15 and $20^{\circ}C$ which indicates the presence of cold-tolerance related genes in N. spumigena KNUA005. This suggests the possibility of incorporating cold-resistance genes into indigenous cyanobacterial strains for the consistent production of algae-based biofuel during the low-temperature seasons. Therefore, it is needed to determine the cold-tolerance mechanisms in the Arctic cyanobacterium in the next research stage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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