Cha, Chun Nam;Yu, Eun-Ah;Shin, Min Jung;Park, Eun Kee;Choi, Hyunju;Kim, Suk;Lee, Hu Jang
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.28
no.3
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pp.213-216
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2013
Antibiotic Detection Kit (Combination I), a lateral flow immunoassay (LFIA) developed for the detection of antibiotic residues in milk, was utilized for the analysis of antibiotic residues in the muscle tissue of olive flounder. After 60-min treatment by dipping in water dosed with ampicillin (200-g/ton water), the residue depletion of ampicillin was investigated in 25 cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus). Muscles of fish were sampled on the 1st, 2nd, 3rd, 4th and 5th day after drug treatment. The concentration of ampicillin in the muscle was determined by LFIA. The absorbance ratio of the sample to the control blank (Bs/Bo) was employed as an index to determine the muscle residues in olive flounder. To investigate the recovery rate, standard solutions were added to muscle samples to give final concentrations in the muscle of 4 and 8 ng/ml. The recovery rates of all spiked samples were > 96% of the spiked value. Ampicillin was detected in the muscle of fish treated with the drug until the 2nd day of the withdrawal period. The present study showed that the LFIA can be easily adopted to predict ampicillin residues in tissue of farmed fishes.
This study was carried out to compare the antibiotic residues in the muscles of cattle and pigs from slaughter-houses in Seoul from 2000 to 2002 by EEC-4-plate, Charm II and HPLC methods. The results were summarized as follows; 1. Residual materials were detected from 41 samples(0.6%) by EEC-4-plate method from random sampling and 38 samples(12%) by Charm II method from directed sampling. 2. Violation rates were 0.3% by monitoring and 4.7% by surveillance program. 3. The 35 samples were classified as tetracyclines 30(86%), sulfonamides 4(11%), ${\beta}$-lactams 1(3%) and two samples simultaneously determined oxyteracycline plus sulfadimetoxine, and sulfamerazine plus sulfadimetoxine. 4. The highest residual concentration(ppm) of chlortetracycline, oxytetracyline, sulfamethazine, sufadimetoxine and penicillin were 0.5, 12.0, 6.4, 2.6 and 0.44, respectively.
Thanatin, a 21-residue peptide, is an inducible insect peptide with a broad range of activity against bacteria and fungi. It has a C-terminal disulfide loop, like the frog skin secretion antimicrobial peptides of the brevinin family. In this study, we tried to find the effect of a number of amino acids between the disulfide bond. Thanatin showed stronger antibacterial activity to Gram negative bacteria than other mutants, except Th1; whereas, the mutant peptides with deletion had higher activity to Gram positive bacteria than thanatin. An increase in the number of amino acid(s) using the alanine residue decreased the antibacterial activity in all of the bacteria. Th1 with deletion of threonine at position 15 ($Thr^{15}$) showed similar antibacterial activity against Gram-negative bacteria, but had higher activity against the Gram positive bacteria. In order to study the structure-function relationship, we measured liposome disruption by the peptides and CD spectra of the peptides. Th1 also showed the highest liposome leaking activity and α-helical propensity in the sodium dodecyl sulfate solution, compared with other peptides. Liposome disruption activity was closely correlated with the anti-Gram positive bacterial activity. All of the peptides showed no hemolytic activity. Th1 was considered to be useful as an antimicrobial peptide with broad spectrum without toxicity.
The 102 farms received a positive result of the bulk milk drug residue test were selected to investigate the reasons of drug residues in bulls milk. The most frequent causes of drug residues were milker or producer mistakes (28.4%), failure to observe withdrawal time (21.5%), and withholding milk from treated quarters only (19.6%). Milker or producer mistakes occurred high at the farms having a parlor system (4 cases out of 11 farms), and related to the inadequate records and marking of treated cows. The lack of knowledge on the absorption of antibiotic from treated quarters and its excretion from untreated quarters caused mainly withholding milk from treated quarters only. Among the 91 farms identified the cause of drug residues, most of the route of drug administration was intramammary infusion (81.3%), and mostly drug used for the treatment of cows was ${\beta}$-lactam antibiotic (57.1%)
Kim, Jin Woo;Cho, Mi Young;Jee, Bo-Young;Park, Myoung Ae;Kim, Na Young
Journal of fish pathology
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v.27
no.1
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pp.67-75
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2014
Aquaculture drugs have used to prevent disease in aquaculture field for many years. In spite of many advantages, overdose and abuse may cause environmental pollutions and antibiotic resistances. Many countries try to protect the environment, biospecies and food safety. Recently, Korea enact laws and ordinances such as the Aquatic Animal Disease Control Act. The purpose of this act to contribute to the stable production and control system for aquatic diseases. The Maximum residue limits (MRLs) of aquaculture drugs have been established by Ministry of Food and Drug Safety (MFDS) and Drug licensing was in National Fisheries Research and Development Institute (NFRDI) by Aquatic Animal Disease Control Act. There is 750 items in aquaculture drugs and these are classified into 4 group, which is approval, necessary for prescription, unregulated and safety drug, and banned drug. MRLs of 30 items in aquaculture drug have been established by Food Sanitation Act. Future research is required to determine the suitable for abundant varied fishes of drugs for side effects and safety.
We have designed a 20-residue hybrid peptide CA(1-8)-MA(1-12) (CAMA) incorporating residues 1-8 of cecropin A (CA) and residues 1-12 of magainin 2 (MA) with high bacterial cell selectivity. CAMA-P2 is an ${\alpha}$-helical antimicrobial peptide designed from a CAMA hybrid peptide and substitution of Gly-Ile-Gly hinge sequence of CAMA to Pro influences the flexibility at central part of CAMA. Based on structure-activity relationships of CAMA peptides, to investigate the effects of the total positive charges on antimicrobial activity of CAMA-P2, the $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys analogue (CAMA-syn1) was synthesized. The role of tryptophan at C-terminal ${\alpha}$-helix on its antimicrobial activity as well as synergistic activity was also investigated using $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys/$Phe^{18}{\rightarrow}$Trp analogue (CAMA-syn2). Also, we designed CAMA-syn3 by substitution of $Lys^{16}$ located opposite side of substituted $Lys^{14}$ of CAMA-syn1 with Leu residue, resulting in increase of hydrophobicity and amphipathicity of the peptide. All of CAMA-syn analogues showed good antimicrobial activities similar to those of CAMA and CAMA-P2. The CAMA-syn1 and CAMA-syn2 showed low hemolytic activity and cytotoxicity against human keratinocyte Haca-T cells while CAMA-syn3 showed hemolytic activity and cytotoxicity at its MIC value. We then investigated their abilities to act synergistically in combination with the antimicrobial flavonoids and synthetic compounds screened in our laboratory. The results showed that all peptides exhibited synergistic effects with dihydrobinetin, while only CAMA-syn2 exhibited synergistic effects with YKAs3001 against both S. aureus and MRSA, suggesting that Trp residue at C-terminus of CAMA-syn2 may facilitate the polar antibiotic flavonoids and synthetic compounds to permeabilize the membrane. This study will be useful for the development of new antibiotic peptides with potent antimicrobial and synergistic activity but without cytotoxicity.
Park, Eun-Kee;Ryu, Yong-Jae;Cha, Chun-Nam;Yoo, Chang-Yeul;Kim, Suk;Lee, Hu-Jang
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.4
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pp.233-239
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2016
This study was conducted to analyze penicillin G (PEG), streptomycin (STR) and neomycin (NEO) residues in milk of healthy lactating cows. Milk samples were collected from all four quarters of 12 dairy cows 2−7 days after intramammary infusions of an ointment containing PEG, STR and NEO once (n = 4; group I) or twice (n = 4, group II) daily. Ultra-performance liquid chromatography coupled with electrospray tandem mass spectrometry was used to determine the antibiotic residues in the samples. The correlation coefficient ($r^2$) of the calibration curves for all antibiotics was > 0.999 and the limits of detection and quantification were $0.002-0.005{\mu}g/mL$ and $0.007-0.02{\mu}g/mL$, respectively. Recovery rates were ranged from 75.5 to 92.3%. In group I, PEG, STR and NEO residues were detected in milk at 2, 3 and 2 days post-treatment, respectively, which were below the maximum residue limit (MRL). In group II, PEG, STR and NEO residues were detected in milk at 2, 3 and 3 days post-treatment, respectively, which were bellow the MRL. These results suggest that a 3-day for milk withdrawal period after the ointment treatment might be sufficient for reduction of the antibiotic residues below the MRL.
The 43-residue defensin-like peptide coprisin, which is isolated from dung bettle, Copris tripartitus, is a potent antimicrobial peptide. In our previous work, we determined the tertiary structure of coprisin and found that alpha helical region of coprisin from residue 19 to residue 30 is important for its antimicrobial activities. Here, we designed cop12mer and cop9mer analogs of coprisin based on the tertiary structure of coprisin. To investigate the relationship between hydrophobicity and antimicrobial activities and develop the potent peptide antibiotics, we designed cop9mer-1 with substitution of $His^2$ with Trp in cop9mer. The results showed that cop9mer-1 has higher toxicities as well as improved antimicrobial activities compared to cop9mer. In order to reduce the toxicity of cop9mer-1, we designed cop9mer-2 and cop9mer-3 with substitution of $Cys^3$ with Lys or Ser. Substitution of $Cys^3$ with these hydrophilic amino acids results in lower cytotoxicities compared to cop9mer-1. Cop9mer-2 with substitution of $Cys^3$ with Lys in Cop9mer-1 showed high antibacterial activities against drug resistant bacteria without cytotoxicity. Antibiotic action of cop9mer-1 analog appears to involve permeabilization of the bacterial cell membrane while cop9mer-2 and cop9mer-3 may have different mechanism of action. These results imply that that optimum balance in hydrophobicity and hydrophilicity in these 9-meric peptides plays key roles in their antimicrobial activities as well as cytotoxicities.
Penicillin antibiotics such as penicillin G, ampicillin and amoxicillin have been widely used in the pig industry to control salmonellosis, bacterial pneumonia, and urinary tract infections. Extensive use of antibiotics in veterinary clinics has resulted in tissue residues and bacterial resistance. To prevent unwanted drug residues entering the human food chain, extensive control measures have been established by both government authorities and industries. The demands for reliable, simple, sensitive, rapid and low-cost methods for residue analysis of foods are increasing. In this study, we established a rapid prediction test for the detection of pigs with unacceptable tissue residues of penicillins. The recommended therapeutic doses of three penicillins, penillin G (withdrawal time, 7 days), ampicillin (withdrawal time, 7 days) and amoxicillin (withdrawal time, 14 days), were administered to three groups of 20 pigs each. Blood was sampled before drug administration and during the withdrawal period. The concentration of penicillins in plasma, determined by a semi-quantitative ELISA, were compared to that of internal standard, 4 ppb, which corresponded to the Maximum Residue Limit in milk. The absorbance ratio of internal standard to sample (B/Bs) was employed as an index to determine whether drug residues in pig tissues were negative or positive. That is, a B/Bs ratio less than 1 was considered residue positive, and larger than 1 negative. All 60 plasma samples from pigs were negative to three penicillins at pretreatment. Penicillin G could be detected in the plasma of the treated pigs until day 4 post-treatment and ampicillin until day 2, whereas amoxicillin could be detected until day 10 of its withdrawal period. The present study showed that the semi-quantitative ELISA could be easily adapted to detect residues of penicillin antibiotics (penicillin G, ampicillin and amoxicillin) in live pigs.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1998.11a
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pp.133-133
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1998
Tylopeptins A and B are novel peptides from methanol extract of fruit body of mushroom, Tylopilus neofelleus, These novel peptides were isolated by reverse-phase HPLC. And they have been shown to consist of one acetylated N -terminal residue, fourteen amino acids, and leucinol, C-terminal amino alcohol. Sequencial determination and complete 1H and 13C resonance assignments were based on positive ion F AB mass spectroscopy and two dimensional NMR techniques using HOHAHA, ROSEY, HMQC, and HMBC. These compounds are active against some Gram-positive bacteria, but inactive against phathogenic fungi and Gram-negative bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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