Objective : This study was performed to estimate the effects of OMC-2010 extract on cytokine production in mouse spleen cells. Methods : Mouse spleen cells were pre-treated with ethanol and water extract of OMC-2010 for 1 h, then stimulated with lipopolysaccharide (LPS, 1 ${\mu}g/ml$) for 48 h. Then the cells were harvested for real-time reverse transcription polymerase chain reaction to detect cytokines. Results : OMC-2010 ethanol extract significantly inhibited the LPS-induced interleukin (IL)-1beta, tumor necrosis factor (TNF)-alpha and IL-5 mRNA expressions, but not shown such changes in IL-6, IL-4, IL-13. OMC-2010 water extract significantly inhibited the LPS-induced TNF-alpha, and IL-5 mRNA expressions, but not shown such changes in IL-1beta, IL-6, IL-4, IL-13. Conclusions : Theses results could suggest that both ethanol and water OMC-2010 extract could inhibit the TNF-alpha and IL-5 mRNA expression.
Ion chromatographic method has been applied for burnup measurement of irradiated nuclear fuel by dynamic system using 1-octanesulfonate as a cation exchanger and $\alpha$-hydroxyisobutyric acid as an eluant. A number of elution techniques were evaluated for the optimum separation of plutonium, uranium and neodymium. These elements were individually separated and collected by gradient elution between 0.05 M and 0.40 M of $\alpha$-hydroxyisobutyric acid in a single column, and finally determined by isotope dilution mass spectrometry. The burnup data from this method were compared with those from conventional anion exchange method. The results showed a good agreement within 3.5 % of difference between two methods.
The fragmentation patterns and ion-molecule reactions of two alkyn alcohols, 2-propyn-1-ol (HC≡$CCH_2$OH) and 2-methyl-3-butyn-2-ol (HC≡CC($CH_3)_2$OH), were investigated using Fourier transform mass spectrometry (FTMS). The most abundant fragment ions formed from the molecular ions were [M-H]$^+$ for 2-propyn-1-ol and [M-$CH_3]^+$ for 2-methyl-3-butyn-2-ol. The dehydrated ion, [M-$H_2O]^+$ was formed only from 2-propyn-1-ol in which $\alpha$ -hydrogen atoms were available for $\alpha,\;\alpha$ -elimination reaction. The protonated molecules were dissociated into [M+H-$H_2O]^+$ and [M+H-$C_2H_2]^+$ through dehydration and deacetylenylation processes. The formations of [M+H-$H_2O]^+$ and [M+H-$C_2H_2]^+$ from 2-methyl-3-butyn-2-ol were more favorable than those from 2-propyn-1-ol due to stabilization by two methyl groups at $\alpha$ -carbon. Ion-neutral complexes formed at long ion trapping time gave dehydrated and/or deacetylenylated ion products by further dissociation.
Low temperature micro-calorimeters have been employed in the field of high resolution alpha spectrometers. These alpha detectors typically consist of a superconducting or metal absorber and a temperature sensor. The temperature sensor can be a transition edge sensor (TES), a metallic magnetic calorimeter (MMC) or other low temperature detectors for an accurate measurement of temperature change due to an alpha particle absorption. We report a recent study of the heat flow between a replaceable absorber and a temperature sensor. A piece of gold foil in $2.4{\times}2.7{\times}0.03\;mm^3$ is used as an absorber. A $40\;{\mu}m$ diameter Au:Er paramagnetic sensor is attached to another small piece of gold foil in $400{\times}200{\times}30\;{\mu}m^3$ to serve as the temperature sensor. This sensor assembly, Au:Er and gold foil, is placed on a miniature SQUID susceptometer in a gradiometric configuration. The thermal connection between the absorber and the sensor was made with three gold bonding wires. The measured thermal conductance shows a linear dependence to the temperature. The values are in a good agreement with Wiedemann-Franz type thermal conductance of the gold wires.
A bacterial strain (Strain N-08) capable of extracellularly producing high level of non-reducing oligosaccharide (NR-OS) isolated from soil. The strain was identified phylogenetically by 16S rDNA sequence analysis and found to be very close to Arthrobacter crystallopoietes. The high production of NR-OS was observed in the basal culture medium containing maltose as a sole carbon source. The NR-OS in culture supernatant was purified by glucoamylase treatment and Dowex-1 (OH.) ion exchange chromatography and its structure was characterized. This oligosaccharide consisted of only glucose. Methylation analysis indicated that this fraction was composed mainly of non-reducing terminal glucopyranoside. Matrixassisted laser-induced/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) and electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS)/MS analyses suggested that this oligosaccharide comprised non-reducing disaccharide unit with 1,1-glucosidic linkage. When this disaccharide was analyzed by $^1H$-NMR and $^{13}C$-NMR, it gave the same signals with $\alpha$-D-glucopyranosyl-(1,1)-$\alpha$-Dglucopyranoside. These results indicated that the NR-OS produced by A. crystallopoietes N-08 was ${\alpha}1$,${\alpha}1$-trehalose. This is the first report of the trehalose which can be produced directly from maltose by A. crystallopoietes N-08.
The volitile compounds Produced from the Maillard reaction of D-glucose and DL-alanine or DL-$\alpha$-aminobutyric acid using water or propylene glycol as a reaction amdeum were analysed by gas chromatofiraphy and mass spectrometry. From two kinds of reaction products in water 18 compounds were identified. The major compounds in a reaction product of glucose with alanine were 5-hydroxy methyl-2-furfural, 2-acetyl pyrrole and 2-formyl-5-methyl pyrrole, and those in a reaction product of glucose with $\alpha$-aminobutyric acid were 2-ethyl crotonaldehyde and 2-methyl-3, 5-dihydroxy-4H-pyran-4-one including the above 3 compounds. From two kinds of reaction products in propylene glycol solution, 35 compounds were identified. The major compounds in a reaction product of glucose with alanine were alkyl pyraainef, 2-methyl furfuryl alcohol and 2-acetyl pyrrole, and those in a reaction product of glucose with $\alpha$-aminobutyric acid were propionaldehyde PGA, 2-ehtyl crotonaldehyde, 2-acetyl pyrrole and 2-acetyl-5-ethyl furan.
Helices 4 and 5 of the Bacillus thuringiensis Cry4Ba $\delta$-endotoxin have been shown to be important determinants for mosquito-larvicidal activity, likely being involved in membrane-pore formation. In this study, the Cry4Ba mutant protein containing an additional engineered tryptic cleavage site was used to produce the $\alpha4$-$\alpha5$ hairpin peptide by an efficient alternative strategy. Upon solubilization of toxin inclusions expressed in Escherichia coli and subsequent digestion with trypsin, the 130-kDa mutant protoxin was processed to protease-resistant fragments of ca. 47, 10 and 7 kDa. The 7-kDa fragment was identified as the $\alpha4$-loop-$\alpha5$ hairpin via N-terminal sequencing and mass spectrometry, and was successfully purified by size-exclusion FPLC and reversed-phase HPLC. Using circular dichroism spectroscopy, the 7-kDa peptide was found to exist predominantly as an $\alpha$-helical structure. Membrane perturbation studies by using fluorimetric calcein-release assays revealed that the 7-kDa helical hairpin is highly active against unilamellar liposomes compared with the 65-kDa activated full-length toxin. These results directly support the role of the $\alpha4$-loop-$\alpha5$ hairpin in membrane perturbation and pore formation of the full-length Cry4Ba toxin.
Ben Abdelmalek, Imen;Urdaci, Maria Camino;Ali, Mamdouh Ben;Denayrolles, Muriel;Chaignepain, Stephane;Limam, Ferid;Bejar, Samir;Marzouki, Mohamed Nejib
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.11
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pp.1306-1318
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2009
The filamentous ascomycete Sclerotinia sclerotiorum is well known for its ability to produce a large variety of hydrolytic enzymes. Two $\alpha$-amylases ScAmy54 and ScAmy43 predicted to play an important role in starch degradation were showed to produce specific oligosaccharides essentially maltotriose that have a considerable commercial interest. Primary structure of the two enzymes was established by N-terminal sequencing, MALDI-TOF masse spectrometry and cDNA cloning. The two proteins have the same N-terminal catalytic domain and ScAmy43 derived from ScAmy54 by truncation of 96 amino acids at the carboxyl-terminal region. Data of genomic analysis suggested that the two enzymes originated from the same $\alpha$-amylase gene and that truncation of ScAmy54 to ScAmy43 occurred probably during S. sclerotiorum cultivation. The structural gene of Scamy54 consisted of 9 exons and 8 introns, containing a single 1,500-bp open reading frame encoding 499 amino acids including a signal peptide of 21 residues. ScAmy54 exhibited high amino acid homology with other liquefying fungal $\alpha$-amylases essentially in the four conserved regions and in the putative catalytic triad. A 3D structure model of ScAmy54 and ScAmy43 was built using the 3-D structure of 2guy from A. niger as template. ScAmy54 is composed by three domains A, B, and C, including the well-known $(\beta/\alpha)_8$ barrel motif in domain A, have a typical structure of $\alpha$-amylase family, whereas ScAmy43 contained only tow domains A and B is the first fungal $\alpha$-amylase described until now with the smallest catalytic domain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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