In this study,the result shows that polyvinyl alcohol-sodium alginate (PVA-SA) gel bead crosslinked with sodium sulfate are better among the different methods by comparing the relative mechanical strength, mechanical strength swelling and expansion coefficient of beads in water. Subsequently, anammox biomass entrapment by PVA-SA gel was introduced into continuous stirred tank reactor (CSTR). After 24 operation days, the nitrogen removal efficiency achieved 60%, while the nitrogen loading rate (NLR) was $0.14kgN/m^3/d$ and the experiment data indicated that PVA-SA gel bead crosslinked with sodium sulfate can be used to initiate anammox process. Furthermore, it is an alternative for culturing anammox in a long-term operation.
The optimal conditions for the continuous production of $\gamma$-aminobutyric acid by immobilization of Lactobacillus brevis BH-21 using column type reactor were investigated. The optimal conditions of operation were 2.2 mm diameter bead of 3.0% sodium alginate at 10 mL/h of substrate feeding rate. Continuous production by immobililzed cells showed the highest productivity with replacement of fresh medium in every 48h for fourth fermentatoin cycle following the rendition of $\gamma$-aminobutyric acid productivity. A productivity of $\gamma$-aminobutyric acid could be obtained for 25 days by continuous column type reactor under optimal conditions.
In an attempt to develop the immobilized biocatalysts based on immobilized Saccharomyces cerevisiae, immobilized yeast was investigated with respect to the conditions affected to ethanol productivities. Saccharomyces cerevisiae was immobilized in the form of the beads by magnetic-calcium alginate, non magnetic-calcium alginate and acrylamide polymerization. Magnetic immobilized yeast, nonmagnetic immobilized yeast and polyacrylamide immobilized yeast were compared in respect of their pH stability, thermostability, heat tolerance, the relation between the concetration of native yeast and retained activity of immobilized yeast, the activity depending on bead size of immobilized yeast, and the effects of magnesium and cobalt on the activities. The more small bead had retained the higher activity for the three kinds of immobilized yeast. In case of 1.0mm diameter of beads, the retained activity was 40~50% for the all groups. The pH stability profile for the immobilized yeast showed a broad range of optimun activity while the native yeast gave a sharp pick for its optimun pH value. The thermostability was at the range of 25~55$^{\circ}$C for the immobilized yeast groups. It was investigated that the influent magnesium and cobalt concentration, and the relative activity have an influent on heat tolerance at steady state. Both protein content released from immobilized yeast and activity of immobilized yeast were changed after activation of immobilized yeast cell.
This work describes neo-fructooligosaccharides (neo-FOSs) production using the immobilized mycelia of Penicillium citrinum. Some critical factors were evaluated to optimize maximal production of neo-FOS. Optimal alginate and cell concentrations were determined to be $1.96\%$ alginate and $7.17\%$ cell, respectively, by statistical analysis. The optimal concentration of $CaCl_{2}$, which is related to bead stability, was determined to be 2 M. It was possible to increase the neo-FOS production by adding 15 units of glucose oxidase to the batch reaction. By co-immobilizing cells and glucose oxidase, neoFOS productivity increased $123\%$ compared with the whole-cell immobilization process. Based on the results above, a co-immobilization technique was developed and it can be utilized for large-scale production.
Ethanol production by calcium alginate-immobilized baker's yeast (Saccharor/tyces cereviszae) was studied in the batch fermentation using glucose medium as a feed. Immobilied cells were stable between $30^{\circ}C$ and $40^{\circ}C$ whereas free cells were stable between $30^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$ The beads were showed constant ethanol productivity during 720 hours (30 days) over. Fermentation characteristics of immobilized baker's yeast were examined changing the initial glucose concentration of broth in fermentation. Initial glucose concentrations employed were 50, 100, 150 and 200 g/l, respectively. In 15% gucose medium, maximum specific growth rate, maximum ethanol yield and ethanol concentration were observed as 0.092 $h^{-1}$, 0.45, 67.5 g/l, respectively.
In this study, we investigated the performance of an immobilized ${\beta}$-galactosidase inclusion bodies-containing Escherichia coli cell reactor, where the cells were immobilized in alginate beads, which were then used in repeated-batch operations for the hydrolysis of o-nitrophenyl-${\beta}$-D-galactoside or lactose over the long-term. In particular, in the Tris buffer system, disintegration of the alginate beads was not observed during the operation, which was observed for the phosphate buffer system. The o-nitrophenyl-${\beta}$-D-galactoside hydrolysis was operated successfully up to about 80 h, and the runs were successfully repeated at least eight times. In addition, hydrolysis of lactose was successfully carried out up to 240 h. Using Western blotting analyses, it was verified that the ${\beta}$-galactosidase inclusion bodies were sustained in the alginate beads during the repeated-batch operations. Consequently, we experimentally verified that ${\beta}$-galactosidase inclusion bodies-containing Escherichia coli cells could be used in a repeated-batch reactor as a biocatalyst for the hydrolysis of o-nitrophenyl-${\beta}$-D-galactoside or lactose. It is probable that this approach can be applied to enzymatic synthesis reactions for other biotechnology applications, particularly reactions that require long-term and stable operation.
Recently, an autotrophic single-stage nitrogen removal (ASSNR) process based on the anaerobic ammonium oxidation (ANAMMOX) reaction has been proven as an economical ammonia treatment. It is highly evident that double-layered gel beads are a promising alternative to the natural biofilm for ASSNR because of the high mechanical strength of poly(vinyl alcohol) (PVA)/alginate structure and efficient protection of ANAMMOX bacteria from dissolved oxygen (DO) due to the thick outer layer. However, the thick outer layer results in severe mass transport limitation and consequent lowered bacterial activity. Therefore, the effects of the thickness of the outer layer on the overall reaction rate were tested in the biofilm model using AQUASIM for ammonia-oxidizing bacteria (AOB), nitrite-oxidizing bacteria (NOB) and ANAMMOX bacteria. A thickness of 0.5~1.0 mm is preferred for the maximum total nitrogen (TN) removal. In addition, a DO of 0.5 mg/L resulted in the best total nitrogen removal. A higher DO induces NOB activity and consequent lower TN removal efficiency. The optimal density of AO B and NO B density was 1~10% for a 10% ANAMMOX bacterial in the double-layered PVA/alginate gel beads. The real effects of operating parameters of the thickness of the outer layer, DO and concentrations of biomass balance should be intensively investigated in the controlled experiments in batch and continuous modes.
The dual drug-loaded alginate beads simultaneously containing drug in inner and outer layers were prepared by dropping plain (single-layered) alginate beads into $CaCl_2$ solution. The release characteristics were evaluated in simulated gastric fluid for 2 h followed by intestinal fluids thereafter for 12 h. The surface morphology and cross section of dual drug-loaded alginate beads was also investigated using scanning electron microscope (SEM). The poorlv water-soluble ibuprofen was chosen as a model drug. The surface of single-layered and dual drug-loaded alginate beads showed very crude and roughness, showing aggregated particles, surface cracks and rough crystals. The thickness of dual drug-loaded alginate beads surrounded by outer layer was ranged from about 57 to 329mcm. The distinct chasm between inner and outer layers was also observed. In case of single-layered alginate bead, the drug was not released in gastric fluid but was largely released in intestinal fluid. However, the release rate decreased as the reinforcing $Eudragit^{\circledR}$ polymer contents increased. When the plasticizers were added into polymer, the release rate largely decreased. The release rate of dual drug-loaded alginate beads was stable in gastric fluid for 2 h but largely increased when switched in intestinal fluid. The drug linearly released for 4 h followed by another linear release thereafter, showing a distinct biphasic release characteristics. There was a difference in the release profiles between single-layered and dual drug-loaded alginate beads due to their structural shape. However, this biphasic release profiles were modified by varying formulation compositions of inner and outer layer of alginate beads. The release rate of dual drug-loaded alginate beads slightly decreased when the outer layer was reinforced with $Eudragit^{\circledR}$ RS1OO polymers. In case of dual drug-loaded alginate beads with polymer-reinforced outer layer only, the initial amount of druc released was low but the initial release rate (slope) was higher due to more swellable inner cores when compared to polymer-reinforced inner cores. The current dual drug-loaded alginate beads may be used to deliver the drugs in a time dependent manner.
The hydrogen production using immobilized cellsl was conducted using fruit wastewaters at various culture conditions. Three kinds of fruit wastewaters, melon, watermelon and pear were used. Sodium alginate was used as immobilization material. Among them, concentration of reducing sugar which was one of the main components in fruit was the highest at watermelon wastewater, and also hydrogen production was the highest as 2319.2 mL/L in it. Although hydrogen production was not much changed according to sodium alginate concentration, its production was the most at 3%(w/v). As bead size as small, hydrogen production was higher. With inspection of interior, it confirmed that the cell grew well in bead. But the addition of amino acids using as agent for metabolite production had almost no affected on hydrogen productivity. The effective range of $FeSO_4$ addition on hydrogen production were up to 1.2 g/L, and above the concentration, it inhibited the productivity. Organic acids produced during watermelon fermentation were mainly lactic acid, butyric acid, abd acetic acid; and a little of propionic acid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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