Objectives : Gambigyeongsinhwan 16 (GGEx16), gambigyeongsinhwan 18 (GGEx18) and gambitongseong capsule are shown to be involved in the regulation of obesity. Therefore, the aim of this study was to compare the reporter activity of anti-obesity genes such as peroxisome proliferator-activated receptor ${\alpha}$ ($PPAR{\alpha}$) and $PPAR{\delta}$ by GGEx16, GGEx18 and gambitongseong capsule. Methods : After NMu2Li liver cells, C2C12 skeletal muscle cells and 3T3-L1 preadipocytes were treated with GGEx16 (1 ${\mu}g/ml$), GGEx18 (1 ${\mu}g/ml$) and different concentrations of gambitongseong capsule, the transactivation of $PPAR{\alpha}$ and $PPAR{\delta}$ was measured by a luciferase reporter gene assay. Results : $PPAR{\alpha}$ reporter gene activity in NMu2Li liver cells and 3T3-L1 preadipocytes was significantly increased by GGEx16, GGEx18 and gambitongseong capsule compared with control, whereas $PPAR{\alpha}$ reporter gene activity in C2C12 skeletal muscle cells was significantly increased by GGEx18 only compared with control. Similarly, $PPAR{\delta}$ reporter gene activity in 3T3-L1 preadipocytes was also significantly increased by GGEx18 compared with control. $PPAR{\delta}$ reporter gene activity in C2C12 skeletal muscle cells was significantly increased by GGEx16 and GGEx18 compared with control although $PPAR{\delta}$ reporter gene activity in NMu2Li liver cells was not changed by these three formulas. Conclusions : These results suggest that all three formulas have the ability to stimulate $PPAR{\alpha}$ and $PPAR{\delta}$ transactivation in animal cell lines with high metabolic rates. In particular, this effects were most prominent in GGEx18-treated cells. In addition, it is likely that GGEx18 may be used as an effective anti-obesity composition.
본 연구는 뽕나무 열매 착즙 분말 (MJ)이 지방세포 분화과정에서 염증에 관여하는 유전자 발현 및 miR-132/143 조절에 미치는 효과에 중점을 두고 조사하였다. MJ는 3T3-L1 지방세포 분화 동안 지질축적이 억제되었고 PPAR-γ, CEBP-α 및 aP2와 같은 지방형성 유전자 발현을 억제하였다. 또한 염증 조절 매개체인 TNF-α, IL-6, MCP-1 및 iNOS 유전자 발현이 MJ 처리에 의해 감소되었다. MJ의 지질 축적 억제 효과는 염증과 지방분화에 관여하는 miR-132/143의 발현 감소와 관련이 있음을 확인하였다. 따라서 MJ는 염증을 동반하는 비만 예방 및 치료에 도움이 될 수 있는 식품 소재로서 가능성이 있음을 시사하고 있다. 그러나 MJ의 주요 성분인 안토시아닌의 생체이용율은 1-2% 미만으로 추정되며 예상되는 표적 조직이나 혈류에서 미량 검출되는 것으로 알려져 있다 [33]. 이를 해결하기 위해서는 생체 내 동물실험을 통한 다각적인 분석이 향후 진행되어야 할 것으로 판단된다.
비만은 감염원 없이 진행되는 낮은 수준의 만성적인 전신성 염증상태로 간주되며, 만성대사질환의 원인이 된다. 본 연구에서는 미나리를 발효하여 만든 식초가 3T3-L1 지방전구세포의 분화 및 RAW 264.7 세포에서의 항염증 효과에 미치는 영향을 확인하였다. MDI (IBMX, dexamethasone, insulin)에 의해 분화가 유발된 3T3-L1 지방전구세포에 대한 미나리 식초의 분화 억제능을 Oil-red-O staining을 통해 확인하였으며, western blot법을 통해 지방세포 형성 시 중요한 전사인자인 peroxisome proliferator-activated receptor-${\gamma}$ (PPAR-${\gamma}$)와 CCAAT-enhancer-binding protein ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$)의 발현을 감소시키는 것으로 나타났다. 또한, 미나리 식초가 lipopolysaccharide (LPS)에 의해 염증이 유발 된 RAW 264.7 세포의 nitric oxide (NO) 생성을 억제시켰으며, inducible NO synthase (iNOS)와 cyclooxygenase-2 (COX-2)의 단백질 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 이러한 결과들을 통해 미나리 발효 식초는 지방세포 분화와 염증 억제 효과를 가지고 있음을 확인하였다. 따라서 미나리 발효 식초는 대사성 질환을 예방할 수 있는 천연물 소재로 이용 가능할 것으로 생각된다.
본 연구에서는 신생혈관형성 제어에 바탕을 둔 비만세포제어 정도를 확인하기 위하여 4가지 지역 천연산물인 전호(Anthrisci radix), 파고지 (Psoraleae semen), 희첨 (Siegesbeckiae herba) 및 산수유 (Corni fructus)를 이용한 지방 축적물 변화 및 기전을 확인하기 위해 3T3-L1 adipocyte를 이용한 Oil Red O 염색 및 western blot을 실시하였다. 그 결과 전호, 파고지, 희첨, 산수유의 세포 독성 이내의 농도 증가에 따라 지방 축적물이 감소됨을 보였다. 또한 western blot을 위해 lipogenesis와 관련된 SREBP-1 및 adipogenesis와 관련된 $PPAR\gamma$와 C/$EBP\alpha$의 신호전달 정도를 확인한 결과 4가지 지역 천연산물의 농도 증가에 따라 단백질의 발현양이 감소됨을 확인하였다. 이는 4가지 지역 천연산물 추출물이 지방분화와 관련된 신호분자를 차단함으로써 지방형성이 억제되었음을 보였다. 따라서 4가지 지역 천연산물인 전호, 파고지, 희첨 및 산수유는 신생혈관형성 억제에 따른 항비만제제로서의 이용 가능함을 시사하였다.
항암제로 알려진 cisplatin과 t-BHP를 토끼에 투여하여 유도된 급성 신부전 시 산조인 추출액을 처리하였을 때 신장 세포의 보호에 미치는 항산화 효과를 조사하였다. 신장을 분리한 후 신피질 절편 실험에서 세포의 손상을 유발하는 지질과산화 및 LDH 실험에서 t-BHP 단독 처리 시 대조군에 비하여 각각 3배, 5배 이상 증가하였으나 산조인 추출액 0.5%를 동시 처리하였을 때는 대조군 수준으로 감소하였다. Creatinine 측정과 지질과산화 실험에서 cisplatin $5mg{\cdot}kg^{-1}$을 복강 투여한 군의 creatinine 농도가 $2.13{\pm}0.1mg{\cdot}dl^{-1}$로 나타났으나 산조인 추출액 $50mg{\cdot}kg^{-1}{\cdot}day^{-1}$을 7일간 전처리 후 cisplatin 투여 48시간 경과한 군은 $0.84{\pm}0.1mg{\cdot}dl^{-1}$로 creatinine의 농도가 약 60% 감소되는 신장보호 효과를 나타내었고, 지질과산화 검사는 cisplatin 단독 투여 시 대조군에 비하여 1.6배 높게 나타났으나 산조인 추출액 전처리 시 1.1배로 대조군과 유사하였다. 병리조직 검사는 cisplatin 단독 처리군에서 근위곱슬세관이 대조군에 대하여 더 붉게 염색되었으며 근위곱슬세관은 내강의 융모세포가 탈락하여 공포를 형성하였다. 그러나 산조인 추출액을 7일간 전처리한 군에서는 근위곱슬세관이 대조군과 유사한 염색소견을 보였고 근위곱습세관도 내강의 융모세포 탈락이 거의 나타나지 않았다. 따라서 cisplatin과 t-BHP에 의해 유발된 신장세포 손상에 대하여 산조인 추출액이 항산화 효과를 보였다.
International journal of advanced smart convergence
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제10권4호
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pp.225-232
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2021
Obesity is caused by the accumulation of triglycerides in adipocytes by the differentiation and lipid synthesis process of pre-adipocytes, and excessive accumulation of adipocytes by the activated Adipogenesis process within the differentiated cells. Therefore, inhibiting the differentiation of adipocyte cells or controlling the adipogenesis process is known as an effective treatment method for obesity. This study evaluates the inhibition of Red beet root extract on pancreatic lipase and pre-adipocyte cell differentiation. Also it evaluates the Red beet root extract activities on C/EBP-𝛼,𝛽, and PPAR-𝛄. The experiments proved that the Red beet root extract inhibits pancreatic lipase by concentration dependency. Further, in 3T3-L1 inhabitation experiment, it was found Red beet root extract inhibited adipocyte formation. Red beet root extract also inhibits the expression of C/EBP-𝛼, C/EBP-𝛽, and PPAR-𝛾 which effect the process of adipocytic differentiation. We therefore concluded that RBE has a high potential to further studies on anti-obesity effect.
Objectives The purpose of this study is to investigate the effects of Crataegi Fructus Pharmacopuncture(CFP) on the adipogenesis in 3T3-L1 cells, lipolysis in rat epididymal adipocytes and histological changes in porcine adipose tissue. Methods Inhibiton of preadipocyte differentiation and/or stimulation of lipolysis play important roles in reducing obesity. 3T3-L1 preadipocytes were differentiated with adipogenic reagents by incubating for 3days in the absence or presence of CFP ranging from 0.01 to 1mg/mL. The effect of CFP on adipogenesis was examined by measuring GPDH activity and by Oil Red O staining. Mature adipocytes from rat epididymal fat pad was incubated with CFP ranging from 0.01 to 1mg/mL for 3 hrs. The effect of CFP on lipolysis was examined by measuring free glycerol released. Fat tissue from pig skin was injected with CFP ranging from 0.1 to 10mg/mL to examine the effect of CFP on histological changes under light microscopy. Results The following results were obtained from present study on adipogenesis of preadipocytes, lipolysis of adipocytes and histological changes in fat tissue. 1. Crataegi Fructus Pharmacopuncture inhibited adipogenic differentiation at the concentration of 1.0mg/mL. 2. Crataegi Fructus Pharmacopuncture decreased the activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) at the concentration of 0.1mg/mL. 3. Crataegi Fructus Pharmacopuncture ok. lipolysis at the concentration of 0.1mg/ml. 4. Crataegi Fructus Pharmacopuncture ranging 0.1 to 10mg/mL failed to exert lysis of cell membrane in porcine fat tissue. Conclusions These results suggest that Crataegi Fructus Pharmacopuncture at relatively high concentration inhibited adipogenesis and increased lipolysis of adipocytes. However, Crataegi Fructus Pharmacopuncture didn't exert any effect on lysis of cell membrane in fat tissue.
In this study, we investigated the in vitro anti-obesity, anti-cancer activity and single oral dose toxicity of Inonotus xeranticus extracted by methanol (INXM) or ethyl acetate (INXE). In order to investigate anti-obestity effect of Inonotus xeranticus extracts, the 3T3-L1 cells were treated with these extracts at various concentrations(1, 10, 100 and $300{\mu}g/ml$). It was observed that 3T3-L1 cells treated with $100{\mu}g/ml$ of Inonotus obliquus ethyl acetate extract (INOE), INXM and INXE, in the absence of differentiation cocktail (0.5mM isobutylmethylxanthine (IBMX) $1{\mu}M$ dexamethasone, $1{\mu}M$ insulin), differentiated at a rate of 78.5, 80.9, and 76.4% respectively. Differentiation rates of 86.6% and 83.4% were observed in 3T3-L1 cells which were treated with differentiation cocktail at $100{\mu}g/ml$ of INXM and INXE, respectively. The anti-cancer effect of Inonotus xeranticus extracts was investigated using a method of sulforhodamine B in sarcoma 180 cell line. The cells were treated with these extracts (1, 10, 100 and $300{\mu}g/ml$) for 48 hours. The growth of cells which were treated with $300{\mu}g/ml$ of INXM was inhibited by 80.1%. The growth of sarcoma 180 cells which were treated with 100 and $300{\mu}g/ml$ of INXE was inhibited by 74.7% and 64.5%, respectively. In single oral dose toxicity study, no differences were observed between control and treated groups in clinical signs, body weight gains, and feed and water consumptions. The results indicated that Inonotus xeranticus extracts did not show any toxic effects at 2,000mg/kg in mice, and the $LD_{50}$ of these extracts was found to be higher than 2,000 mg/kg in this experiment. From the above results, Inonotus xeranticus methanol and ethyl acetate extracts might have useful clinical applications in the management of cancer and obesity and may also be useful as a medicinal food.
Objectives : In order to investigate the anti-obesity effects of Wolbi-tang(here in after referred to WBT) on the obese gene and obese inhibitory, C57BL/6 mice were induced by high-fat diet. Methods : C57BL/6 mice were divided into 5 groups(normal, only high-fat diet, high-fat diet with Reductil, high-fat diet with WBT 400, 200 mg/kg extract) and fed for 5 weeks. And observed body weight change, total cholesterol, low density lipoprotein cholesterol(LDL-cholesterol), high density lipoprotein cholesterol (HDL-cholesterol), triglyceride, glucose, leptin change, alanine transaminase(ALT), aspartate transaminase(AST), serum creatinine, the expression of ${\beta}3$-adrenergic receptor(${\beta}3AR$), leptin, uncoupling protein(UCP2) gene in 3T3-L1 adipocyte, 3T3-L1 adipocyte proliferation, histological analysis of adipose tissue and liver tissue. Results : 1. Refer to cell cytotoxicity, viability of human fibroblast cells(hFCs) showed not significant changes. 2. The amount of ALT, AST was decreased significantly in WBT 400 mg/kg, 200 mg/kg groups. The amount of creatinine showed not significant changes. 3. Body weight was decreased significantly in WBT 400 mg/kg, 200 mg/kg groups. 4. The amount of total cholesterol and triglyceride was decreased significantly in WBT 400 mg/kg, 200 mg/kg groups. LDL-cholesterol was decreased and HDL-cholesterol was increased significantly in WBT 400 mg/kg groups. 5. The amount of glucose was decreased significantly in WBT 400 mg/kg groups. 6. The amount of serum leptin was decreased significantly in WBT 400 mg/kg, 200 mg/kg groups. 7. The revelation of ${\beta}3AR$ in 3T3-L1 adipocyte was increased significantly in WBT $100{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$ groups. The revelation of leptin was decreased significantly in WBT $100{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$ groups. The revelation of UCP2 was decreased significantly in WBT $100{\mu}g/ml$ group. 8. 3T3-L1 adipocyte proliferation was decreased significantly in WBT $100{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$ groups. The size of adipocyte was decreased relative to the control group in WBT 400 mg/kg group. 9. The adipose vacuoles in liver tissue was decreased relative to the control group. Conclusions : These results suggested that WBT has inhibitory effects of obesity. WBT might be applicated on treatment of obesity and metabolic syndrome. Further studies analysing its effects were needed.
본 연구에서는 잔가시 모자반 추출물의 항비만 및 항산화 효과를 연구하기 위하여 3T3-L1 전지방세포에 분화 유도물질을 처리하여 분화 과정 중에 잔가시 모자반의 지방축적과 ROS 생성 억제 효과를 관찰하였다. 잔가시 모자반 추출물은 XTT assay에서 두 농도(10 및 100 ${\mu}g/mL$) 모두에서 세포 독성을 보이지 않았다. 지방세포 분화 중 세포 내 지방축적 및 ROS 생성량을 비교한 결과, 잔가시 모자반 추출물을 처리한 지방세포의 경우 지방축적량과 ROS 생성량 모두 유의적으로 억제되는 것으로 나타났다. 특히 잔가시 모자반 추출물을 처리함으로써 지방세포 분화와 관련된 전사인자인 $PPAR{\gamma}$와 $C/EBP{\alpha}$ 발현을 유의적으로 감소시켰으며, ROS의 생성과 관련이 있는 주요 효소인 NOX4의 발현 또한 유의적으로 감소하였다. 이 결과를 통해 잔가시 모자반 추출물이 3T3-L1 지방세포 내 중성지방의 축적 억제 효과와 더불어 ROS 생성 억제에 효과적으로 작용함을 확인하였다. 따라서 잔가시 모자반은 비만과 같이 대사증후군 관련 질환의 개선을 위한 천연물 기능성 소재로의 활용이 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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