Protease Nexin-1 (PN-1) inhibits the activity of several serine proteases including thrombin, urokinase (uPA)-type plasminogen activator and trypsin. Tissue- and reproductive organ-specific mRNA levels of the PN-1 were investigated in Sprague-Dawley adult rat. PN-1 mRNA expression in rats was found in brain (forebrain, hindbrain), heart, liver, lung, ovary and oviduct. The level of PN-1 mRNA in male and female among the tissues was the highest in forebrain of the female. PN-1 expression in reproductive organs was found only in ovary and oviduct. These results suggest that PN-1 expression is dependent on the sex and may be related to folliculogenesis and early embryogenesis.
In the research of proteomics, mass spectrometry analysis is the essential method for identification of the unknown proteins. Trypsin treatment for the sample preparation of mass spectrometry is the inevitable procedure[1]. However, sample preparation procedure is cumbersome and time consuming. To resolve these problems, Temperature controllable microreactor was designed and fabricated. It consists of metering chamber, micro channel, reaction chamber, platinum (Pt) thin film heater and a temperature sensor so that micro metering and mixture of reagent with temperature control can be done on the same chip. The total size of the fabricated microreactor was $37{\times}30{\times}1\;mm^3$ and the size of channel cross section was $200{\times}100{\mu}m^2$. PID temperature controller was realized using NI DAQ, PCI-MIO-l6E-1 board and LabVIEW program.
To investigate biological activity of noni extracts treated with HCl and trypsin, we measured the antioxidant activity through vitro assay and cellular system. Both water and lipid soluble fraction of noni extracts dose-dependently scavenged DPPH radical. Superoxide scavenging activity of lipid soluble fraction after treating HCl and trypsin was significantly more potent than those of other fractions in NBT/xanthine oxidase assay, which suggests that antioxidant activity of noni extracts was increased by the treatment with HCl and trypsin. In antioxidant assay using RBL 2H3 cells, water soluble fraction of noni extracts had little effect on silica-induced reactive oxygen species generation, whereas lipid soluble fraction inhibited in a dose dependent manner. In non-treated noni extracts, effect of water soluble fraction on silica/$CuSO_4$-induced lipid peroxidation was more potent than that of lipid soluble fraction. However, the effects of noni extracts were reversed in noni extracts treated with HCl and trypsin. These data suggest that water soluble substances may be converted into lipid soluble substances by the treatment with HCl and trypsin. From the above results, it is suggested that lipid soluble fraction of noni extracts contain antioxidant used in vitro assay and RBL 2H3 cellular system. Such an effect of noni extracts may be increased by the treatment with HCl and trypsin.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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1991.04a
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pp.187-199
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1991
Penicillium verruculosum 배양액으로부터 소단위체 분자량이 60,000(cellobiohydrolase I)과 66,000(cellobiohydrolase II) 및 76,000(cellobiohydrolase III)인 cellobiohydrolase를 분리 정제하여 그들의 일반적 특성을 검토하였다. 이들 세 효소들은 모두 당단백질로서 cellobiohydrolase I, II 그리고 III는 각각 $8.6\%$, $4.2\%$ 그리고 $8.5\%$의 당함량을 나타냈으며 세 효소 모두 pH 4.5 - 5.0, 온도 $50 - 60^{\circ}C$에서 최적조건을 나타냈다. Cellobiohydrolase I, II 및 III는 모두 Avicel, cotton, 여지 등의 결정성 섬유소 뿐만 아니라 carboxymethyl cellulose에도 활성도를 나타냈다. 정제된 cellobiohydrolase I, II 및 III의 Avicel에 대한 비 활성도는 각각 0.07, 0.10, 그리고 0.07 unit per mg. of protein 이었으며 Avicel 분해 생성물은 거의 cellobiose였다. 또한 p-Nitrophenyl-$\beta$-D-cellobioside를 기질로 하였을 때 이들 세 효소 모두 포도당에 의해 활성도가 저해되지 않은 반면 cellobiose에 의해서는 저해되었다. 아미노산조성, 트립신에 의한 펩타이드들의 용출양상 그리고 항체를 이용한 Immunoblotting 결과로부터 cellobiohydrolase II와 III는 동일 유전자산물이거나 1차 구조가 거의 유사한 단백질로 추정된다. Cellobiohydrolase II로부터 분리한 2 개의 펩타이드의 아미노산 서열은 Trichoderma cellobiohydrolase I과 상동성을 보였으며 또한 이 두 호소의 아미노산조성은 매우 유사하였다.
Lectin was isolated from locular fluid of tomato by affinity chromatography using Sephadex G-200, and studied its some biochemical properties. SDS-PAGE of the isolated lectin revealed a tetramer composed of two identical subunits with molecular weights of 39 and 23 kDa. The isolated lectin was agglutinated by trypsin-treated human ABO type blood erythrocytes with similar potency, and the most activity of agglutination was found at B type blood erythrocyte. This lectin showed maximum thermal stability at $70^{\circ}C$, and was relatively stable to heat with the higher activity at $40-80^{\circ}C$. The optimal temperature and pH of this lectin were $50^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively.
Biochemical characterization of lectin isolated from fruit of cherry tomato through neutral saline extraction, ammonium sulfate precipitation, and affinity chromatography on Sephadex G-200 was studied. The lectin was agglutinated by trypsin-treated human ABO erythrocytes, and the most pronounced activity of agglutination was observed at B type erythrocyte. The analysis of the lectin by SDS-PAGE showed the high intensity band with molecular weights of 10.7 kDa. The optimal temperature and thermal stability of the lectin was $40^{\circ}C$ and $40-60^{\circ}C$, respectively. The maximal pH of this lectin was pH 7.2.
The prolein components of each crystal toxin of Bacillus thuringiensis kurstaki and alzawai were separated by SDS-PAGE. The major clqistal proteins from both shins were composed of paiypeptides having molecular weights of 130 kd and 64 kd. Digestive mixture of both. toxins with t~ypsin and gut juices shared 62 kd polypeptide which may be major actwe toxh. However, aizawal produced much less amount of 62 kd polypeptide than kurstaki did. On ingestion with Bt &-endotoxin, larvae of Hyphantria cunea developed 45 kd stress protein in the several tissues including fat body, which was induced by heat and cold shock.
Objectives: We investigated the antioxidant and antibacterial activities of Pinus densiflora ethanol extracts (PDEE) treated with trypsine as a protease. Methods: Various antioxidant activities were evaluated by measuring total contents of polyphenol and flavonoid, DPPH electron-donating ability and $ABTS^+$ radical scavenging activity of test material. To compare the antibacterial activity, paper disc diffusion assay was performed against two resident bacteria in human skin (Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis). Results: As for the total contents of polyphenol and flavonoid, and the electron-donating ability and ABTS+ radical scavenging activity, both PDEE and trypsin-treated Pinus densiflora ethanol extract (T-PDEE) showed high antioxidant activity in dose-dependent manner. And the T-PDEE showed slightly higher activity than PDEE, which indicated protease treatment seemed to affect in antioxidant activity. In the result of paper disc diffusion assay, antibacterial activity was confirmed in all two types of skin resident bacteria. T-PDEE was more active than PDEE and it seems that treatment of protease may increase the antibacterial activity of PDEE. Conclusion: All of these results, we confirmed that treatment of protease to PDEE can increase the antioxidant and antibacterial activities, and it can be explained thought that this would be applicable as a cosmeceutical material in the future.
The contents of the several antinutritional factors and lipoxygenase activity of 19 soybean varieties recommended for cultivation in Korea were analyzed. The ranges of raffinose and stachyose contents, which are the flatulence factors, were $0.74{\sim}1.58%\;d.b.\;and\;3.34{\sim}5.30%d.b.$, respectively and the total amount of these sugars was high in the varieties of Hill, Baekun and Jangbaek. The contents of trypsin inhibitor and phytate phosphorus in the soybean varieties ranged from 21.2 to 37.0 TI/g, d.b. and from 337 to 605mg%, d.b. respectively. The lipoxygenase activity of $163.6{\sim}403.5unit$ was shown in the 19 soybean varieties, and Padal, Jangbaek and S-133 were the varieties with the higest activity.
Digestion rates of protein, carbohydrate, and lipid in the two kinds of extruding processed soybean meals, heated (H-SBM) and raw (R-SBM), were tested for evaluate the effectiveness of soybean meal in the rainbow trout diet. The relation between digestion rate of protein and trypsin inhibitor (TI) was also determined. The protein digestion rate of both H-SBM and R-SBM were increased up to $95{\%}$ by extruding process compared to the none treated soybean meal. The digestion rate of carbohydrate in R-SBM was increased by extruding process whereas the one in H-SBM was not. The activity of trypsin inhibitor was almost diminished by the extruding process and digestion rate of dietary protein was improved. However, the reason of this improvement was not clear whether caused by the deactivation of trypsin inhibitor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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