• 제목/요약/키워드: 조직재생

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폴리머 적층 시스템과 실험계획법을 이용한 다양한 공극 패턴에 따른 PCL 인공지지체의 제작 연구 (Fabrication of PCL Scaffolds According to Various Pore Patterns Using Polymer Deposition System and Design of Experiments)

  • 사민우;최선웅;이재욱;김종영
    • 대한기계학회논문집A
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    • 제41권7호
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    • pp.645-653
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    • 2017
  • 골 조직 공학에서 폴리카프로락톤(Polycaprolactone, PCL)은 생분해성 및 생체적합성의 합성고분자로서 인공지지체의 제작에 널리 이용되고 있는 생체재료 중 하나이다. 인공지지체의 제작에서 지지대폭은 생체 내/외 실험에서 공극 크기뿐만 아니라 공극률에도 영향을 미치기 때문에 지지대 폭을 일정하게 유지하는 것이 조직 재생에 중요하게 고려되는 부분이다. 본 연구에서는 온도, 공압, 이송 속도, 그리고 노즐 팁 높이를 이용하여 체계적이고 효율적인 인공지지체 제조 공정이 될 수 있도록 실험 계획법을 통해 최적 공정 조건을 탐색하였다. $150{\mu}m$ 지지대 폭을 가지는 PCL 인공지지체를 제작하는 것이 목표였으며, 한 가지의 공극 패턴이 아니라 다양한 공극 패턴에 따른 PCL 인공지지체를 제작하는 연구를 수행함으로써 모든 실험 그룹에서 지지대 폭이 일정함을 증명하였다.

Simian virus 40의 T항원 도입으로 수립한 지방유래줄기세포주의 효율적인 무혈청 배양법 및 무혈청 배지조성 (Composition of a Medium for Serum-free Culture of an Adipose-derived Stem Cell Line Established with a Simian Virus 40 T Antigen)

  • 김규빈;주우홍;김동완
    • 생명과학회지
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    • 제24권12호
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    • pp.1301-1307
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    • 2014
  • 지방유래줄기세포(adipose-derived stem cell; ADSC)는 조직재생을 위한 탁월한 수단으로 인정되고 있으나 세포증식속도가 느려 ADSC의 배양용 배지에는 대게 fetal bovine serum (FBS)이 첨가된다. FBS는 세포에 다양한 영양분을 공급하지만 세포의 기능에 영향을 미칠 수 있는 미 동정 물질도 많이 함유하고 있다. FBS에 의한 예상밖의 영향과 동물유래물질의 오염을 방지하기 위해 ADSC의 무혈청 배양법에 관한 연구가 광범위하게 이루어지고 있다. 본 연구에서는 ADSC세포에 SV40의 T항원 유전자를 도입하여 증식속도를 향상시킨 ADSC-T세포주의 효율적인 무혈청 배양법을 확립하기 위해 ADSC-T의 세포증식에 미치는 아미노산복합체, 비타민 복합체 및 여러가지 영양분 혼합물(B27)의 영향을 검토하였다. 그 결과, ADSC-T세포를 DMEM/F12 무혈청 배지에 현탁하여 plate에 주입하였을 때는 증식하지 않았으며 아미노산, 비타민 및 B27 영양소복합체는 증식촉진효과를 나타내지 않았다. 그러나 ADSC-T세포를 유혈청 DMEM배지로 24시간 배양 후 DMEM/F12 무혈청 배지로 교체하여 배양했을 때는 세포가 증식하였으며 이때, 비타민 복합체와 B27 영양소복합체는 증식촉진효과를 나타내었다. 또한 Stem pro 배지를 이용하면 ADSC-T의 무혈청 부유배양이 가능한 것으로 나타났다. ADSC-T세포는 분자량 70 kDa 부근의 단백질을 다량으로 분비하였으며, 성장인자 중에서 insulin-like growth factor (IGF)와 fibroblast growth factor basic (FGF basic)는 유혈청 배양보다 무혈청 배양에서 더 많이 분비되었다.

김치에서 분리한 Lactobacillus plantarum CIB 001 급여가 고콜레스테롤혈증 흰쥐의 지질대사에 미치는 영향 (Effects of Lactobacillus plantarum CIB 001 on Lipid Metabolism of Hypercholesterolemic Rats)

  • 차상도;유지원;김태운;조호성;이동희
    • 한국식품과학회지
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    • 제44권3호
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    • pp.324-330
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    • 2012
  • 김치유산균인 L. plantarum CIB 001(KCTC 11717 bp)을 고콜레스테롤을 식이를 섭취시킨 흰쥐에게 급여하여 혈청 지질 성상 및 간 조직의 변화를 살펴보았다. 4주간의 실험식이로 고콜레스테롤 유도한 후, 6주간 고콜레스테롤 식이와 함께 CIB 001 유산균을 $5.0-7.5{\times}10^9$ CFU/day 수준으로 급여한 결과 총 콜레스테롤을 HCD군에 비해 약 30% 정도 유의하게 감소시켰고 중성지방을 약 32% 정도 유의하게 감소시켰다. HDL-콜레스테롤에 있어서는 HCD군에 비해 CIB 001를 급여한 군(HCDL)이 약 40% 유의적으로 증가하였고, LDL-콜레스테롤은 감소하는 경향을 보였으나 표준편차가 커서 유의성이 없었다. 동맥경화지수(AI)와 심장위험인자(CRF)를 비교하였을 때, HCD군에 비하여 HCDL군에서 AI가 약 6배 유의하게 낮아졌고 CRF도 약 1.9배 유의적으로 낮아졌다. 또한, 간 조직을 관찰한 결과, 고콜레스테롤 식이에 의해 유발된 지방 변성과 손상의 경우 HCDL군에서 중심정맥을 중심으로 정상 모양의 재생과 지방 변성을 감소시키는 것이 관찰되었다. 따라서 CIB 001의 투여가 콜레스테롤 과잉혈증 상태에서 높아진 혈장 지질을 저하시키고 간 기능을 개선시켰으며 동맥경화와 심장질환의 가능성을 감소시키는 것으로 나타냈다.

자구자(Hovenia dulcis Thunb) 추출물이 Streptozotocin으로 유발된 고혈당 생쥐에 미치는 영향 (Effect of Hovenia dulcis Thunb Extract on the Hyperglycemic Mice Induced with Streptozotocin)

  • 김정상;나창수;은종방
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권5호
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    • pp.632-637
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    • 2005
  • 본 연구는 streptozotocin(STZ)을 투여하여 고혈당이 유발된 생쥐에 지구자(Hovenia dulcis) 추출물의 투여가 미치는 영향을 구명하기 위하여 수행하였다. 대조군(Con군)은 STZ로 고혈당을 유발한 후 생리식염수 2 mL/kg를 투여하였으며, 실험군은 고혈당이 유발된 생쥐에 지구자 추출물 0.01 g/kg(H1군)과 0.049/kg(H2군)를 매일 5주간 구강 투여하였다. 체중은 CG군이나 H1군에 비하여 H2군에서 가장 높았다. 혈당량은 대조군에 비하여 H1군과 H2군 모두에서 전반적으로 유의성있게 감소하였다. 당내성 검사 결과 대조군에 비하여 H1군과 H2군 모두에서 우수한 소견을 보여주었다. 인슐린 면역조직화학 결과 대조군 췌장의 췌장섬은 파괴되어 있었으나, H1군과 H2군에서는 인슐린-양성 세포들이 다수 관찰되었다. IGF-I과 II의 면역조직화학 결과 대조군에서는 소수의 샘포세포에서 양성반응을 보였으나, H2군에서는 다수의 샘포세포에서 아주 높은 면역반응성을 보여 주었다. 이상의 결과로 보아 지구자 추출물은 STZ로 유발된 손상으로부터 $\beta$-세포의 회복 또는 재생과 췌장 샘포세포의 IGF발현에 관여하는 것으로 사료되었다.

성견의 하악 골 결손부에 이식한 생체 유래 골 이식재 (OCS-B)에 대한 치조골의 반응 (Bone reaction to bovine hydroxyapatite grafted in the mandibular defects of beagle dogs.)

  • 변유경;박준범;김태일;설양조;이용무;구영;이혜자;정종평;한수부;류인철
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제36권1호
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    • pp.39-49
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    • 2006
  • 1. 목 적 이 연구의 목적은 성견의 하악 골 결손부에 이식한 생체 유래 골 이식재에 대한 치조골의 반응을 알아보는 것이다. 2. 연구방법 및 재료 생후 1년 이상 된 성견 4마리의 하악 제2소구치 및 제 4 소구치를 발거하고 발치와에 금원심 폭경 8mm, 협설 폭경 5mm, 치조정에서의 깊이 6mm인 결손부를 형성하였다. 4주간의 자연 치유 후 판막을 형성하여 결손부의 크기를 확인하였다. 각각의 결손부 크기가 일정하도록 수정한 후 '이식재+차폐막'군에는 OCS-B을 이식하고 Bio-gide을 차단막으로 사용한 후 봉합하고 '이식재군'은 OCS-B 이식 후 차폐막 없이 봉합하였으며 '비이식'군은 아무런 처치없이 일차봉합하였다. 수술 4, 6주에 실험동물을 각각 희생시켜 실험부위를 적출하고 비탈회 연마 표본을 제작하여 골 치유 양성을 조직학적 및 조직계측학적으로 관찰하였다. 3. 연구결과 이식재 비이식군 및 이식군 모돼서 별다른 부작용없이 잘 치유되었다. 세 실험군 모두에서 술후 4주에 비교하여 술 후 6주에서의 결손부 산생골 형성량이 증가하였다. 술후 4주 소견에서 비이식군은 결손부 주변부위에서 골이 생성되어 나오는 양상을 보였으며 이식군은 이식재 주변으로 골침착 시작되는 것을 관찰할 수 있었다. 술후 6주 소견에서 비이식군은 결손부 경계부로부터의 지속적인 골 생성을 관찰할 수 있었으며 이식군은 이식재 주변으로 침착된 골의 양이 많아지고 신생골이 가교를 형성하는 것을 관찰할 수 있었다. 4. 결 론 차폐막 유무와 상관없이 OCS-B는 염증반응을 전혀 일으키지 않았으며 우수한 골 전도성을 보였다. 또한 결손부의 형태를 잘 유지하여 골재생을 위한 공간을 확보할 수 있었다. 이는 OCS-B가 골이식재로서의 필요조건을 갖추었음을 확인한 결과이며 보다 장기적인 관찰에서 OCS-B의 흡수 가능성을 확인하는 것이 필요할 것으로 보인다.

Charged membrane에 의한 negative electric field가 토끼 장골의 골 치유에 미치는 영향 (The Effect of Negative electric field using charged PTFE membrane on Bone Healing of Rabbit Long Bone)

  • 권용수;박진우;이재목;서조영
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제34권3호
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    • pp.551-562
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    • 2004
  • 골재생을 위한 술식은 자가골, 합성골 등의 이식술, 골견인술, 골유도 재생술 등이 있으며, 더 나은 결과를 위해서 성장 인자나 cytokine의 적용, 전기적 자극 등이 이용될 수 있다. 이 중 골재생을 위한 전기적 자극을 이용한 골재생 방법에서 비교적 양호한 결과가 보고되어지고 있으며, 전기적 자극은 크게 direct current, inductive coupling, capacitive coupling으로 나뉘어 사용, 연구되어지고 있다. 하지만, 위의 전기적 자극들은 비교적 침습적이고, 환자들에게 불편감을 줄 수 있으며, 부가적인 장치가 필요한 단점이 있다. 따라서, 본 실험에서는 골재생을 촉진하기 위한 비침습적인 전기자극의 방법으로, negatively charged membrane을 이용하여, 토끼 요골의 골절성 결손부에서 negative electric field가 골재생에 미치는 영향을 연구하고자 하였다. 8마리 토끼의 양 요골에 10mm의 골절성 결손부를 형성한 후, 코로나 방전 장치로 -l000V로 대전시킨 polytetrafluoroethylene membrane을 사용하여, 실험군에는 negatively charged membrane을, 대조군에는 noncharged membrane을 적용시킨 후, 2, 4, 6, 8주째 2마리씩 희생하여 조직학적, 조직형태학적 분석을 실시하였다. 2주째, 대조군에서 골결손부에 대한 신생골의 비율은 0.32%, 실험군에서는 1.10%로 나타났으며, 4주째 대조군에서 골결손부에 대한 신생골의 비율은 6.86%, 실험군에서는 13.75%로, 대조군에 비해 실험군에서 더 많은 양의 신생골이 관찰되었다. 6주와 8주째도 대조군에 비해 실험군에서 더 많은 신생골이 관찰되었으나, 그 차이는 크지 않았다. 결론적으로, 토끼 요골의 골절성 결손부의 골치유에서 negatively charged membrane을 이용한 전기적 자극은 초기 골치유를 촉진시키며, 따라서, 이러한 방법의 전기극은 장골의 치유에 있어 비침습적이며, 유용한 수단이라고 사료된다.

키토산의 치주조직 재생력에 대한 연구의 고찰: 조직계측학적 메타분석 (Study of chitosan's effects on periodontal tissue regeneration: a meta-analysis of the histomorphometry)

  • 양진혁;채경준;윤정호;정의원;이용근;조규성;채중규;김종관;최성호
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제38권1호
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    • pp.7-14
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    • 2008
  • Purpose: Chitosan & chitosan derivative(eg. membrane) have been studied in periodontal regeneration, and recently many studies of chitosan have reported good results. If chitosan's effects on periodontal regeneration are enhanced, we can use chitosan in many clinical and experimental fields. For this purpose, this study reviewed available literatures, evaluated comparable experimental models. Materials and Methods: Ten in vivo studies reporting chitosan's effects on periodontal tissue regeneration have been selected by use of the 'Pubmed' and hand searching. Results: 1. In Sprague Dawley rat calvarial defect models, amount of newly formed bone in defects showed significant differences between chitosan/chitosan-carrier/chitosan-membrane groups and control groups. 2. In beagle canine 1-wall intrabony defect models, amount of new cementum and new bone showed significant differences between chitosan/chitosan-membrane groups and control groups. The mean values of the above experimental groups were greater than the control groups. Conclusion: The results of this study have demonstrated that periodontal regeneration procedure using chitosan have beneficial effects, which will be substitute for various periodontal regenerative treatment area. One step forward in manufacturing process of chitosan membrane and in use in combination with other effective materials(eg. bone graft material or carrier) may bring us many chances of common use of chitosan in various periodontal area.

성견의 Implant 주위에 $GUIDOR^{(R)}$ BARRIER MEMBRANE 사용후 골신생에 관한 실험적 연구 (AN EXPERIMENTAL STUDY OF $GUIDOR^{(R)}$ BARRIER MEMBRANE ABOUT BONE PROMOTION AROUND DENTAL IMPLANTS PLACED INTO EXTRACTION SOCKET IN DOGS)

  • 양명철;진우정;신효근;김오환
    • Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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    • 제18권1호
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    • pp.135-143
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    • 1996
  • 이 연구의 목적은 성견의 발치와에 식립된 implants에 새로운 골 형성을 유도할 목적으로 사용한 흡수성막의 골유도재생술을 평가하고자 하였다. 성견의 제 3소구치를 발거하고 cylindrial HA-coated implants를 식립하였다. 실험군에는 흡수성막인 $GUIDOR^{(R)}$ 를 덮어 보호를 하고, 대조군은 막으로 보호하지 않았다. 성견은 1, 2, 4개월에 차례로 희생하였으며, 치유과정 및 골형성 정도의 평가를 위해 임상적, 방사선학적, 그리고 조직학적 관찰을 통한 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 치유리간 동안에 실험군의 흡수성막의 안정성과 조직의 만족할 만한 치유능력을 볼 수 있었다. 2. 술후 4개월 정도에서 막이 완전한 흡수를 볼 수 있었다. 3. 미숙골이 정상적인 충판의 성숙골로 바뀌는데 약 4개월의 시간이 필요하였다. 4. 대조군에 비하여 실험군에서 더 많은 골형성을 관찰할 수 있었다. 5. 흡수성막이 implant 매식에 유용하게 이용될 수 있으리라 평가한다.

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다분할조사에 의한 마우스공장소낭선 세포의 선량반응곡선 (Dose- Response Curves of Mouse Jejunal Crypt Cells by Multifractionated Irradiation)

  • 홍성언;안치열
    • Radiation Oncology Journal
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    • 제4권2호
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    • pp.89-97
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    • 1986
  • Co-60 치료기로 마우스 전신에 다분할조사(단일 2, 3, 4, 5, 8, 10, 12, 16회 분할 조사)후 공장소 낭선세포측정법으로 소낭선세포의 재생능력에 대한 선량반응 곡선을 작성하고, 단일선량생존곡선을 분석하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1) 분할조사회수가 증가함에 따라 생존곡선은 고선량으로 이동하고 경사도는 점차 낮아졌다. 2) 단일선량생존곡선에서 Dq=460 cGy로 비교적 broad shoulder를 가지며 initial slope$(^1Do)$는 475 cGy이 었다. 3) $180\~450cGy$까지 분할 조사한 경우 분할조사간격당 평균회복선량은 분할조사선량의 약 $50\%$이었다. 4) 등가효과를 나타내는 분할조사선량과 이에 해당하는 총선량의 역수를 산출하여 선형회귀분석한 $\alpha/\beta$ 값은 8.3Gy로 조기반응조직의 범위(6-l4Gy)에 속하였다. 5) LQ model은 방사선치료에 사용되고 있는 모든 선량에 적용이 가능하고, $\alpha,\;\beta$ 두 요소만 필요하므로, 실질적으로 편리하게 적응할 수 없다. 다분할조사에 대한 stem cell의 반응을 이해함으로써, 실제방사선치료시 위장관에 대한 급성손상을 극소화시키는 변형된 치료방법을 도입하고 다른 조직에도 응용할 수 있는 방사선생물학적 자료가 될 것으로 사료된다.

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담배식물체에서 필수아미노산인 lysyl-glutamyl-tryptophan을 암호화하는 인공유전자의 발현 (Expression of an artificial gene encoding a repeated tripeptide lysyl-g1utamyl-tryptophan in Tobacco Plant)

  • 이수영;나경수;백형석;박희성;조훈식;이용세;최장원
    • 생명과학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.96-105
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    • 2002
  • 식물 단백질의 영양가 향상을 위한 일환으로 필수아미노산의 조성이 풍부한 인공단백질을 암호화하는 인공유전자를 담배 식물체에서 발현을 시도하기 위하여, 식물에서 외래유전자의 발현에 널리 사용되는 Cauliflower mosaic virus (CaMV)의 35S promoter를 이중으로 중첩되도록 하고, (Lys-Glu-Trp)이 64번 반복되는 인공유전자 및 nopaline synthase (nos) terminator를 갖고있는 binary vector pART4-4를 구성하였다. 이 재조합 플라스미드는 Agrobacterium tumefaciens를 이용한 형질전환에 의해 Nicotiann tabacum (Var. Xanthi)으로 도입되었다. Kanamycin이 포함된 신초 유도 배지 및 뿌리 유도배지를 이용하여 정상적으로 재생된 담배 식물체로부터 도입된 인공유전자의 발현을 분석하였다. 추출한 genomic DNA를 EcoRI으로 자른 다음 Southern blot 분석에 의하면, 효소 절단 시 예상되는 1.1 kb에서 band를 형성하였으며 각각의 형질전환 식물체에 인공유전자가 1 또는 3 개씩 도입되어 있음을 확인하였다. Northern blot 분석에 의하면 약 1.2 kb 전사체가 비교적 안정하게 발현되었으며, 잎, 줄기, 뿌리로부터 RNA를 분리하여 promoter의 조직 특이성 발현을 분석한 결과, 잎에서 생성되는 RNA가 줄기나 뿌리 조직보다 안정하게 발현되었다. 형질전환 식물체에서 Western blot에 의한 단백질 분석 결과, 잎에서 추출한 단백질로부터 원하는 크기인 33 kDa의 인공단백질이 생성됨을 확인하였으며 발현 수준은 전체 세포 단백질의 0.1%로서 낮은 수준이었다.