Using enrichment procedures, we isolated organic solvent-tolerant Bacillus sp. BCNU 5005 from waste water and soil in the Ulsan industrial plant region. BCNU 5005 had a maximum similarity of 98% with B. subtilis and was designated as B. subtilis based on phylogenetic analyses using 16S rDNA sequences. Generally, most bacteria and their enzymes are destroyed or inactivated in the presence of high concentrations of organic solvents. However, the lipase activity of B. subtilis BCNU 5005 was very stable in the presence of various kinds of solvents (25%, v/v) except chloroform, ethylbenzene and decane. Furthermore, BCNU 5005 was determined to have a degradative ability towards organic solvents. This organic solvent tolerant Bacillus sp. BCNU 5005 could be used as a new potential resource for biotransformation and bioremediation.
The p60 protein of Listeria spp. is a Listeria-Genus-specific, major extra-cellular protein, which is used as an indicator protein for the detection of these bacteria from contaminated foods. In this study, p60 protein were recombinantly produced in E. coli and were purified using amylose resin based column chromatography. Purified recombinant-p6O was used to generate monoclonal antibody against native p60. Antibody from hybridoma cell line, 1H4, specificically reacted with native p60 protein isolated from pathogenic Listeria spp. such as L. monocytogenes, L. ivanovii, L. welshimeri II, but did not or relatively weakly reacted with non-pathogenic Listeia species, L. innocua or other bacterial proteins. Antibody from 1H4 was produced using ascites fluid method and it may be useful to develop the Listeria-detection kits based on immunological method.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.387-391
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1986
Serum samples from 51 patients with clinically suspected typhoid fever were tested for immunoglobulin G (IgG), IgM and IgA antibodies against the whole bacteria antigen of Salmonella typhi by an enzyme-linked immunosorbent assay. The levels of IgG and IgA antibody to-whole bacteria antigen were higher in the culture-proven patients than in controls. The levels of IgM antibody to- whole bacteria antigen showed better discrimination between culture negative patients and controls than those of IgG or IgA antibody to-whole bacteria antigen. The enzyme-linked immunosorbent assay was much more sensitive than the Widal test. It would be a useful tool for the diagnosis of typhoid fever with a single serum sample.
치조골 흡수는 파골세포와 matrix metalloproteinases (MMPs)에 의한 골의 무기질과 유기질의 파괴로 일어나는 과정이다. 세균성 산물, 주로 내독소는 치은조직 내에서 염증세포의 유주, 사이토카인 생산, 조직파괴 효소 분비 및 파골세포 활성 등의 국소 면역반응을 유도한다. A. actinomycetemcomitans는 급진성 치주염의 원인 균주중 하나로 그 내독소는 치조골의 흡수와 관련된다. MMP-13은 세균성 산물이나 염증성 사이토카인의 자극에 의해 분비되며, 최근의 연구 결과들은 MMP-13이 치주질환의 진행과 골 흡수 과정에서 일정한 역할을 담당하는 것으로 보고하고 있으나, A. actinomycetemcomitans 내독소와 MMP-13과의 관련성에 대한 연구는 미미하다. 이에 이번 연구에서는 A. actinomycetemcomitans 내독소에 의한 MMP-13의 발현과 파골세포 형성을 세포배양을 통하여 관찰하였고, 백서 구개부 치은에 A. actinomycetemcomitans 내독소를 주입하여 흡수가 진행되고 있는 치조골에서 파골세포의 분화와 MMP-13의 발현을 TRAP 염색, 면역조직화학적 방법 등을 통해 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. MMP-13 mPNA의 발현은 A. actinomycetemcomitans 내독소 (1ug/ml)로 24시간 자극한 마우스 치주인대 섬유모세포에서 생리식염수로 자극한 세포에 비하여 약 2.6배 증가하였으며 마우스 대식세포에서는 TRAP 양성 세포가 대조군보다 더 많이 나타났다. A. actinomycetemcomitans 내독소를 주입한 백서 치주조직에서는 대조군보다 더 심한 골소실을 보였다. TRAP-양성 다핵 파골세포 유사세포는 치주염군과 대조군 모두 치조골에서 관찰되었다. TRAP-양성 다핵 파골세포 유사세포는 치주염군에서 대조군보다 유의하게 많은 숫자가 관찰되었으며, 치주염군에서 대조군보다 유의하게 많은 숫자가 관찰되었다. MMP-13 면역양성 반응은 치주염군에서 거친 골연을 갖는 치조골상에 배열된 조골세포와 그 인접한 치주인대에서 관찰되었으며 대조군에서는 MMP-13 면역 양성 반응이 치조골 표면에서만 일부 관찰되었다. 이상의 결과는 A. actinomycetemcomitans 내독속가 MMP-13의 발현을 증가시키며 파골세포의 활성을 통하여 치조골의 흡수를 유도함을 시사한다. 또한 A. actinomycetemcomitans 내독소 투여에 의한 실험적 모델은 백서에서 중등도의 골 소실을 동반한 만성 치주염 모델로 향후 치주질환 치료제의 효과를 평가하는데 유용하게 사용될 수 있으리라 기대된다.
In this study, we investigated molecular divergences and phylogenetic characteristics of the 16S ribosomal RNA (rRNA) and RNA polymerase beta subunit (rpoB) gene sequences from the order Oscillatoriales (Cyanobacteria). The rpoB of Oscillatoriales showed higher genetic divergence when compared with those of 16S rRNA (p-distance: rpoB=0.270, 16S=0.109), and these differences were statistically significant (Student t-test, p<0.001). Phylogenetic trees of 16S rRNA and rpoB were generally compatible; however, rpoB tree clearly separated the compared Oscillatoriales taxa, with higher phylogenetic resolution. In addition, parsimony analyses showed that rpoB gene evolved 2.40-fold faster than 16S rRNA. These results suggest that the rpoB is a useful gene for the molecular phylogenetics and species discrimination in the order Oscillatoriales.
Microcystis (Cyanobacteria, Chroococcales) is one of the green tide-causing organisms in freshwaters, and some species produce microcystin that is hepatotoxin. In the aspects of freshwater quality controls and health concerns, therefore it is necessary to manage the harmful organisms. In the present study, RNA polymerase beta subunit (rpoB) gene sequences of Microcystis were determined and characterized in order to use a potential marker for the molecular detections of the species. Microcystis rpoB showed high divergences of DNA similarity and genetic distances when compared with those of 16S rRNA, and the molecular differences were statistically significant (Student t-test, p<0.05). Parsimony analyses showed the rpoB gene evolves more than 2-fold faster than 16S rRNA. In addition, phylogeny of the rpoB gene separated each M. aeruginosa strain more clearly compared with a 16S rRNA tree. This study found that the order Chroococcales, including Microcystis, has approximately two rRNA operons and single copy of the rpoB gene in their chromosomes. These results suggest that the rpoB gene is a useful marker for the molecular phylogenetics and the detection of Microcystis.
A novel agar-degrading bacterium SL-5 was isolated from seashore of Homigot at Kyung-Buk province, and cultured in marine broth 2216 media. The bacterium SL-5 was identified as Thalassomonas genus by 16S rDNA sequencing with 96% identity. Growth rate was faster at $27^{\circ}C$ than at $37^{\circ}C$ and agarase was produced as growth-related. The optimum pH of the enzyme activity was 7.0 and the optimum temperature for the reaction was $40^{\circ}C$. Although the enzyme had no thermostability, the enzyme activity was remained over 80% at $60^{\circ}C$. The enzyme hydrolyzed neoagarohexaose to yield neoagarobiose as the main product, indicating that the enzyme is $\beta-agarase$. Thus, the enzyme would be useful for the industrial production of neoagarobiose.
Paenibacillus larvae is a gram-positive, spore-forming bacterium that is etiological agent for american foulbrood disease (AFB), which is the most severe disease in honey bee. To detect P. larvae from infected honeybee-comb or larvae, polyclonal antibody against whole bacterium was produced from guineapig and its specificity was evaluated. After optimization of ELISA-based detection system using these antibodies, a number of different P. larvae strains were analysed. Polyclonal antibody against P. larvae ATCC 25747 showed high affinity to most strains of P. larvae including P. larvae. strain ATCC 9545 (type strain), ATCC 25747 and other korean strain, SJl5 but exhibited no cross-reaction with other bacterial species. Additionally, this type of ELISA system was used for the detection of AFB in field-application The results have shown that this antibody could be useful for the rapid identification and monitoring of P. larvae in honeybee-comb.
A bacterium hydrolysing various organic materials including cellulose, protein, starch and lipid was isolated. The isolate was identified as Bacillus subtilis, and named Bacillus subtilis CK-2 in this paper. This bacterium showed optimal growth at $40\sim45^{\circ}C$, pH 6~9, and 0~3% of NaCl. B. subtilis CK-2 seemed to synthesis highly active autolysin. The hydrolytic enzymes produced by B. subtilis CK-2 were primary enzymes because extracellular enzyme activities varied similarly to the growth curve. The hydrolytic enzymes seemed to be stable at basic pH conditions. From these results, B. subtilis CK-2 was found to bea useful bacterial agent for composting, or for use in feed-production waste in agriculture, fishery, forest materials, livestock farming, and food.
The antibiotic resistant genes (ARG) and mobile genetic elements (MGE) were investigated with the effluent of waste-water treatment plant (WWTP), and river waters of upstream and downstream in order to elucidate the effect of effluent on antibiotic resistance in a natural river. Total numbers of 134~183 of ARG and MGE were detected and the abundance of ARG and MGE was 0.063~0.422 copies per one of 16S rRNA gene in three water samples. Effluent sample contained the highest amount of the total number and abundance of ARG and MGE whereas total viable cells were observed in the lowest amount among the three samples. This indicated that the genes were originated from cells died during the wastewater treatment process. In addition, the co-relationship of abundance between ARG and MGE suggested that acquired resistance was a prevalent mechanism among the antibiotic-resistant bacteria existing in WWTP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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