Nickel Chloride coated protein chip plates were developed by using a spin coating method after $H_2$ plasma treatment. The adsorption ability of histidine tagged protein was investigated at various times of plasma treatment. The properties of the nickel chloride and protein on the surface of the slides were assayed using particle size analysis and the extent of the protein adsorption was determined by using a bio imaging analyzer system. The results show that the ability of protein adsorption decreased as increasing the time of $H_2$ plasma treatment. The mechanism on the ability of protein adsorption at the plate surface is discussed on results and discussions. The results also suggest that the surface stabilization of protein chip plates treated by plasma technology may be applicable in biosensor markets.
The objective of the this study was to investigate the binding capacity and removal ability of lactic acid bacterial strains obtained from Korean soybean paste for mutagenic heterocyclic amines (HCAs) formed during cooking of protein-rich food at high temperature. Among 19 strains identified by carbohydrate fermentation and 16S rRNA sequencing, the live cell or cell-free culture supernatant of Lactobacillus acidophilus D11, Enterococcus faecium D12, Pediococcus acidilactici D19, L. acidophilus D38, Lactobacillus sakei D44, Enterococcus faecalis D66, and Lactobacillus plantarum D70 inhibited the mutagenesis caused by either 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b] indole (Trp-P-1) or 3-amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b] indole (Trp-P-2) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. The bacterial cells of the isolated strains showed greater binding activity than the pure cell wall, exopolysaccharide, and pepetidoglycan. The carbohydrate moieties of the cell wall or protein molecules on the cell surface have a significant role in binding Trp-P-1 and Trp-P-2, since protease, heating, sodium metaperiodate, or acidic pH treatments significantly (P<0.05) reduced the binding efficacy of the tested bacteria. Addition of metal ions or sodium dodecyl sulfate decreased the binding ability of E. faecium D12, L. acidophilus D38, and E. faecalis D66. Therefore, the binding mechanisms of these strains may consist of ion-exchange and hydrophobic bonds. Especially, the high mutagen binding by L. acidophilus D38 and L. plantarum D70 may reduce the accumulation or absorption of Trp-P-1 and Trp-P-2 in the small intestine via increased excretion of a mutagen-bacteria complex.
Choi, Jin-Yong;Park, Jae-Sung;Kim, So Ra;Park, Mijung
Journal of Korean Ophthalmic Optics Society
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v.16
no.4
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pp.383-390
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2011
Purpose: The present study was conducted to investigate whether refractive powers of soft contact lenses were induced by the deposition of tear proteins when wearing soft contact lenses. Methods: The soft contact lenses (material: etafilcon A, hilafilcon A and comfilcon A) with refractive powers of -1.00 D, -3.00 D, -5.00 D and -7.00 D were incubated in artificial tear for 1 day, 3 days, 5 days, 7 days and 14 days, respectively. After incubation, their refractive powers were measured by wet cell method with an auto-lens meter and their protein deposited on the lenses was determined by the method of Lowry. Results: Among three types of soft contact lenses, the most protein deposition was detected in ionic etafilcon A lens material and significant change of its refractive power was manifested. In other words, refractive powers of etafilcon A lenses firstly decreased after 1 day incubation in artificial tear and then gradually increased with increasing incubation period again. The observed change in refractive powers of all diopters of etafilcon A material was beyond the scope of standard error and bigger in the lens with lower optical power. On the other hand, non-ionic hilafilcon A showed less protein deposition as much as about 20% in etafilacon A and statistically significant increase of refractive powers with increasing incubation period in artificial tear. The change in refractive power of hilafilcon A was also beyond the scope of the standard of error when incubating in artificial tear and greater in the lens with lower diopter. The least protein deposit was shown in silicone hydrogel lens material, comfilcon A as approximately 10% of it in etafilcon A, indicating less change in refractive power within the standard range of error. Conclusions: The large change of refractive powers that was beyond the scope of standard error by the deposition of tear proteins on soft contact lenses was differently detected depending on lens materials in the current study. Thus, the deposition of tear proteins induced by longer period of lens wearing may be one of the causes that induces blurred vision, suggesting that soft contact lens wearers with the amount of tear proteins may need to choose proper lens material.
We investigated the question whether the efficacy of cleaning tear components on RGP lens and preserving the superior wettability of RGP lens depended on the different type of contact lens care system - RGP lens care solution, SCL care solution, combined solution both for SCL and RGP lens or saline solution. The removal efficacy of the deposited protein was examined by Lowry protein assay and Scanning Electro Microscope(SEM) and residual lipid concentration on RGP lens was determined by High Pressure Liquid Chromatology(HPLC). Wettability was assessed with an equilibrium water-in-air contact angle method. When cared by RGP lens solution, it was demonstrated that 62 percent out of the adhered protein on RGP lens were removed and the removal efficacy of RGP lens solution was not only 4 times than saline solution and the alternative but also higher twice than SCL solution. Contrarily, the SCL solution had the most excellent removal efficacy of the adhered protein on SCL. These results suggest that the cleaning efficacy is thought to be affected by the other factors like the viscosity of care solutions, which mutual contact between RGP lens and care solutions is on the increase due to the viscosity enhancer in RGP lens care solution. RGP lens solution had the greatest removing efficacy to cholesterol and the residual cholesterol concentration was decreased to 50%. It is significant for RGP lens to preserve the superior wettability which means the predictive value for comfortable wearing and it showed that the RGP lens solution offered the most excellent efficacy to maintain the surface wettability. Combined solution both for SCL and RGP lens had weak efficacy of cleaning and maintaining wettability for RGP lens compared to RGP lens care solution.
Na, Ho-Kyun;Kim, Tae-Il;Lim, Sang-Hoon;Cho, Ki-Young;Chung, Chong-Pyoung;Han, Soo-Boo;Ku, Young
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.35
no.1
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pp.153-161
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2005
파이브로넥틴은 세포외기질에 존재하는 당단백질로 세포의 부착, 이동, 성장 및 분화에 관여하며, 섬유아세포 성장인자는 세포의 증식 이동 및 분화에 영향을 주는 중요한 성장인자로 알려져 있다. 최근 연구에 의하면, 파이브로넥틴은 조골세포의 타이태늄 임플란트 표면으로 이주와 증식 및 골생성을 촉진하며, 섬유아세포 성장 인자는 파이브로넥틴에 상승작용을 한다고 보고된 바 있다. 이 실험의 목적은 파이브로넥틴 및 섬유아세포 성장인자의 복합 단백질을 이용하여 타이태늄 임플란트의 골 반응을 알아보는 것이다. 체중 2.5 kg 내외의 건강한 18 마리의 웅성가토를 준비하여 무균 사육하였고, 순수 타이태늄을 절삭가공하여 직경 3.5mm, 길이 6mm 의 machined surface를 지니는 screw type 의 임플란트를 준비하였다. 사람의 유전자를 기초로, 유전자 재조합법을 통해, 적절한 primer를 이용하여 얻은 섬유아세포 성장인자를 파이브로넥틴 III 형 분절의 9-10 번 도메인에 결합시켜 얻은 복합 단백질을 준비된 임플란트에 표면처리하여 실험군으로 하였고, 표면처리하지 않은 임플란트를 대조군으로 하여, 가토의 좌우 경골에 각각 2 개씩의 임플란트를 식립하였다. 4주 후, 가토를 희생시켜 각 경골 당 한 개의 임플란트에서 뒤틀림 제거력을 측정하였고 나머지 임플란트 식립 부위 에서는 경골을 포함하는 조직표본을 제작하였다. 조직표본상에서 골접촉이 가장 좋은 3 개의 나사산의 길이를 측정하고, 나사와 접촉하는 골의 길이를 측정하여 골-임플란트 접촉도를 구하고, 같은 부위에서 나사산 사이의 면적과 골이 차지하는 면적을 비교하여 골생성률을 얻었다. 실험군과 대조군의 결과는 Student t-test 를 이용하여 신뢰도 95% 수준에서 통계학적 유의성을 검정하였다. 파이브로넥틴과 섬유아세포 성장인자의 복합 단백질로 표면처리된 임플란트와 표면처리를 하지 않은 임플란트는 뒤틀림 제거력에서는 통계적 유의성이 나타나지 않았으나, 골-임플란트 접촉도와 골생성률에서 복합 단백질로 처리된 임플란트가 통계적으로 유의하게 높은 결과를 보였다. 이상의 연구결과로, 섬유아세포 성장인자와 파이브로넥틴 복합 단백질로 처리한 타이태늄 임플란트가 주변 골 형성을 촉진시켜, 골유합을 증진시킴을 알 수 있었다. 따라서, 복합 단백질이 타이태늄 임플란트의 성공률을 높이기 위한 표면개질 물질로 이용될 가능성을 확인할 수 있었다.
Effects of heat treatment on functional properties of soy protein were examined. Soy protein isolate (SPI) was prepared from Korean soybean varieties, Manli and Taekwang, subjected to heat treatment at $60^{\circ}C$ for 30, 60, 90, and 120 min. pH-solubility results of SPI showed typical U-shape profiles with minimum solubility at pH 4-5 of isoelectric points of soy proteins, longer heat treatments showing slightly higher solubility. Water absorption, emulsifying activity, emulsion stability, and emulsion capacity of SPI increased, while oil absorption decreased, with heating time in Manli variety. Manli and Taekwang showed the highest emulsion capacities after 90-and 60-min heat treatments, respectively. Foam expansion of all SPIs increased with heating time up to 90 min. Texture profile analysis showed heat treatment up to 90 min significantly increased hardness, adhesiveness, springiness, gumminess, and chewiness, whereas significantly decreased cohesiveness of SPI gels (p<0.05).
The formation of hydrophilic surface based on polymers has received great attention due to the anti-adhesion of bacteria on solid substrates. Anti-adhesion coatings are aimed at suppressing the initial step of biofilm formation via non-cytotoxic mechanisms, and surfaces applied hydrophilic or ionic polymers showed the anti-adhesion effect for bioentities, such as proteins and bacteria. This is attributed to the formation of surface barrier from hydration layers, repulsions and osmotic stresses from polymer brushes, and electrostatic interactions between ionic polymers and cell surfaces. The antifouling polymer coating is usually fabricated by the grafting method through the bonding with functional groups on surfaces and the deposition method utilizing biomimetic anchors. This mini-review is a summary of representative antifouling polymers, coating strategies, and antibacterial efficacy. Furthermore, we will discuss consideration on the large area surface coating for application to public facilities and industry.
The ability of probiotics containing Lactobacillus acidophilus to adhere to the intestinal epithelium may play an important role in colonization of the gastrointestinal tract and preventing enteric pathogen such as enterohemorrhagic E. coli(EHEC O157:H7. In the study, we investigated the adhesion to human intestinal epithelial cells(HT-29) of strains of L. acidophilus(3 from human, 2 from pig, and 1 from calf). All of the tested strains of L. acidophilus were highly observed adhesion ability(from 10$\^$6/ to 10$\^$7/ cfu/mL), compared to L. rhamnosus GG as control. Also, adhered strains of L. acidophilus were significantly preserved in serial wash-out steps. However, no correlation could be observed between cell surface hydrophobicity and adhesion abilities of the tested strains of L. acidophilus. Inhibition of adhesion of EHEC O157:H7 was also examined, a 2 log cycle reduction was observed by all of the tested strains of L. acidophilus. These results suggest that the strains of L. acidophilus with high adhesion ability are resistant to wash-out and adhesion ability inhibition by selected strains of L. acidophilus helps to prevent adhesion of EHEC O157:H7 to intestinal epithelial cells.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.19
no.3
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pp.382-388
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2018
In this study, the SELEX method was used to screen for and select aptamers with high selectivity and affinity for Streptococcus mutans, which is the causative agent of dental caries. Aptamers are single stranded oligonucleotides of DNA or RNA with high selectivity and affinity for target molecules because of their specific three-dimensional structures that are used to collect biometric information. When compared to antibodies in vitro, aptamers are more advantageous because of their ease of use in the screening process, low cost, chemical stability, and lack of restrictions on the target molecules. We sorted DNA aptamers, which contain 44 bp or 38 bp primer sequences in 5' and 3', 39 bp random sequences in the middle.We then analyzed the character and affinity to S. mutans. Aptamers of specific oligonucleotides that combine with S. mutans were selected and these results are selectively fused to S. mutans. The results confirmed that DNA aptamers can be used for rapid diagnosis and treatment of dental caries caused by bacteria of the oral cavity, namely S. mutans.
Staphylococcus aureus is a major human pathogen that is associated with various types of local and systemic infection. Staphylococcal protin A (SPA), a highly expressed surface component of S. aureus, may have a role in virulence such as activating inflammation and interfering with immune clearance. We examined the effect of recombinant SPA on inflammatory response in human HaCaT keratinocytes. The recombinant SPA protein was prepared using the pET-28a Vector System in Escherichia coli. The expression of pro-inflammatory related adhesion molecules and cytokines in HaCaT cells incubated for 6, 12, and 24 h with SPA (2 ${\mu}g$/ml) was analyzed by comparative RT-PCR or ELISA. The expression of E-selectin, ICAM-1, MCP-1, IL-6 and IL-8 was significantly increased in HaCaT from 6 to 24 h after treatment with SPA. SPA showed the effect on the adhesion-promoting ability of U937 monocytes to HaCaT cells. Our data demonstrate that SPA stimulates inflammatory response of HaCaT cells, implicating an important factor for exacerbation of skin inflammation of immunologic disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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