이상기후로 인한 건조 스트레스에 의해 식물의 기공전도도와 광합성의 감소로 생장과 작물생산량이 감소하는 피해가 발생하고 있다. 이러한 식물의 스트레스를 완화하는 유용 곰팡이를 선발하기 위해 국내 농경지에서 41 균주를 분리하였으며, 발아율 검사로 2종의 곰팡이를 선발하였으며, 식물검정을 통해 최종 Trichoderma sp. GL02를 선발하였다. GL02를 고추 식물체에 처리하였을 때, 대조구에 비해 기공전도도가 증가하고, MDA와 전기전도도는 감소하는 것으로 보아, GL02를 처리한 고추 식물체는 건조 스트레스가 완화되며, 건조 후 재관수하였을 때 회복도 효과적이었다. 이러한 결과는 GL02는 고추 식물체에 건조 스트레스를 완화시키는 유용한 소재로 사용될 수 있음을 시사한다. 또한, 추후 포장 실험을 통하여 Trichoderma sp. GL02의 건조 스트레스 완화 효과가 고추 생산량과 연관이 있는지 확인해 볼 예정이다.
Rhizobium균을 이용하여 근류균 접종제를 생산하기 위한 기초연구로 우수한 증량제(carrier material)를 선발하고, 근류균의 접종량, carrier의 숙성 및 보존온도, 멸균조건등 근류균 접종제 생산을 위한 각종 조건을 확립하기 위하여 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 근류균 접종제 생산을 위한 carrier material source로는 퍼라이트 및 토탄이 우수한 것으로 나타났다. 2. 근류균의 접종량(inoculum size)에 따른 경시적 생존율은 접종초기 $10^4cells/g$ 이하의 균주를 접종하여도 1~2주후에는 $5{\times}10^8cells/g$로 증가하여 $10^8cells/g$ 접종구와 비슷한 균수를 나타내었다. 3. Carrier의 숙성 및 보존온도에 따른 근류균의 경시적 생존율은 특별한 보온이나 냉장시설없이 실온($20^{\circ}C$) 보존에서도 $10^9cells/g$의 높은 균수가 12주째까지 유지되었다. 4. Carrier의 멸균방법에 따른 근류균의 경시적 생존율은 가압습열멸균 처리구에서 생존율이 가장 양호하였으나 각 처리에 따른 큰 차이는 볼 수 없었고, 특히 퍼라이트의 경우에는 멸균처리없이도 12주째 까지 $10^9cells/g$ 이상의 높은 균수를 유지하였다.
토양에 존재하는 진균인 Gliocladium virens는 식물병을 감소 또는 방제할 수 있는 생물학적인 특성에 의하여 G. virens는 지난 수십년간 실용가능성이 큰 생물학적 방제균(또는 길항균)으로 집중적으로 연구되었다. 이 균이 식물병의 발생을 감소시키는 생물적 방제효과는 항생작용, 중복기생, 근권에서의 생존과 집단번식, 뿌리표면에서의 정착 등에 의한 것으로 분류되고 있다. 특히, 항생물질인 gliotoxin, gliovirin, viridin 등은 Rhizoctonia solani 및/또는 Pythium spp. 등에 항생효과가 뚜렷하고, 식물병의 발생과 직접적인 상관관계를 나타내고 있어 G. virens의 식물병의 방제에 관련된 중요한 작용기작으로 제시되어 있다. 또한, 근권에서 이균의 생존과 집단증식 및 뿌리표면에서의 정착은 식물병의 방제와 상관관계를 나타낼 수 있는 중요한 작용기작으로 제시되고 있다. 그러나 이균이 R. solani 등에 기생하는 현상은 식물병의 생물적 방제의 직접적인 연관관계를 나타내고 있지 않다. G. virens을 이용의 생물적 방제효과를 증진시키기 위한 방법으로 다음과 같은 두 가지 방법을 들 수 있다. 첫째, 길항효과가 높은 G. virens 균주를 선발하기 위하여 여러 종류의 토양에서 길항력이 높은 G. virens의 선발이 지난 수십년간 진행되고 있다. 또한, 특정 길항효과를 발현하는 유전자를 G. virens의 염색체에 도입하고 이를 발현시킴으로써 생물적 방제효과를 증진시키는 것으로 이러한 방법은 1980년 후반부터 진행되고 있다. 둘째, G. virens의 길항효과가 최대의 효율로 발현될 수 있도록 최적의 미세환경을 갖추고 있으며 농민이 편리하게 사용할 수 있는 G. virens의 운송매체의 개발이 중요하다. 운송매체의 개발에 의한 'Glioguard'는 G. virens의 포자를 alginate 입자에 제형화한 것으로서 미국에서 시판되고 있다. Aldicarb, metalaxyl, atrazine 등의 농약을 분해할 수 있는 능력은 G. virens의 다른 생물적 특성중의 하나이다. 특히, parathion을 분해할 수 있는 Flavobacterium sp.의 유전자(opd)가 G. virens의 염색체에 도입되여 발현될 수 있는 방법이 제시되었으며, 이는 G. virens을 이용한 토양에서의 특정한 농약의 분해효율을 증진시킬수 있는 가능성을 제시한 것이다. 그러나, G. virens를 이용한 농약의 생물적 분해에 관한 연구는 기초단계로 평가되고 있으며, 포장에서 이를 실용화하기 위해서는 향후 지속적인 연구가 필요하다.
본 연구는 목재부후균을 이용한 토양개량제를 개발하고자 리그닌 분해 우수균으로 선발된 SJ-28 균주의 처리가 상추재배에 미치는 효과를 조사하여 비교하였다. 시판 유기질퇴비에 균처리를 실시하여 상추를 재배하였다. Control 구에서의 총 중량이 약 2434 g인데 비해 균처리 토양개량제 처리구(FPG)에서는 총 중량이 약 4425 g으로 가장 높게 나타났다. 또한 FPG 처리구에서 토양에 유익한 방선균의 수가 많은 증가를 보였고 사상균의 수도 증가하였다. 반면 유익하지 않은 세균의 수도 FPG 처리구에서 가장 많은 감소를 나타내었다. 선발균 SJ-28 처리구에서 효과가 우수하게 나타나 토양개량제로서의 가능성을 보여 주었다.
미생물을 이용한 인삼 재배지 내 잔류 tolclofos-methyl의 효과적 분해를 목적으로, tolclofos-methyl에 대한 분해능을 보이는 미생물을 선발하였다. 선발된 미생물은 16S rDNA 염기서열분석을 통하여 Sphingomonas 속으로 동정되었다. 선발 미생물 Sphingomonas sp. 224는 1/10 농도의 LB 배지에 함유된 20 mg/L 농도의 tolclofos-methyl을 배양 72시간 이내에 95% 이상 분해하는 것으로 확인되었다. 또한 이 미생물이 tolclofos-methyl을 분해하여 얻어지는 산물로 2,6-dichloro-4-methyl phenol이 확인됨에 따라 미생물이 생산하는 가수분해 효소에 의한 분해 경로를 가지는 것으로 추정되었다. Tolclofos-methyl 분해 미생물 Sphingomonas sp. 224를 인삼경작지 토양에 처리하여 이들 토양에 잔류되어 있는 tolclofos-methyl에 대한 분해능을 확인 한 결과, 20 mg/Kg 농도의 토양 잔류 tolclofos-methyl에 대하여 14일 이내에 약 50%의 분해력을 보이는 것으로 확인되었다. 이것은 단일 미생물을 이용한 배지 및 토양 내 tolclofosmethyl의 생분해 효과를 처음으로 확인한 연구 결과이다.
대두 자반병에 대하여 저항성인 계통 선발을 위한 Mass-screening technique를 확립하고 이 종자잡종법을 이용하여 수집재내종 및 각 품종의 저항성검정을 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 조숙성인 수집재내종 50계통의 자반병 자연감염률과 종자접종에 의한 자주빛 색소 형성률간에 나타난 정의 상관관계는 r=0.121로서 고도의 유의성이 인정되었으며 이 종자접종법은 효과약인 Mass-screening technique으로서 방사선을 이용한 돌연변이육종에서 자반병저항성 계통선발에 이용가능성이 높았다. 2. 자반병 자연감염률이 극히 낮은 만숙성 수집재내종 85계통은 종자접종에 의하여 대부분이 이병성 반응을 보였으며 이는 포장에서의 만숙계통의 저항성이 유전적인 특성이기 보다는 병해도피 현상에 기인한 것으로 생각되었다. 3. 대두품종의 저항성검정에서 우리나라 대두 36품종을 비롯하여 일본과 대만의 각 16품종, 베트남 11품종, 필리핀 8품종 및 미국 38품종 등 대부분이 이병성이였고 미국품종인 Sac, Hill, Harosoy등이 비교적 저항성 이었다. 4. 각 지역에서 분리한 대두 자반병균 244 isolates 중에서 배지에서 자주빛 색소를 형성하지 않는 두 균주를 제외하고는 모두가 암조건에서는 감자한천배지에서, 광조건에서는 오트밀한친배지에서 자주빛 색소형성이 잘 되었으며 배지에서의 색소형성 정도는 종자에서의 병원성과 밀접한 상관이 있었다.
야생에서 수집한 균주를 이용하여 우량 단핵계통을 선발하고, 선발한 단핵주를 이용하여 교잡을 통하여 새로운 품종 '갈뫼' 를 육성하였다. 갈뫼 품종은 균사배양 최적온도는 $25^{\circ}C$, 자실체발생 적온은 $14^{\circ}C$, 생육온도는 $7{\sim}180^{\circ}C$이었다. 갈뫼 자실체의 갓색깔은 갈색이며, 대기부는 진갈색으로 전형적인 야생팽이의 특성을 가셨고, 갓표면에 다소의 점성이 있었다. 갈뫼는 갈색 다수성 품종으로 발이가 고르고, 대가 곧고 강하며, 갓은 반반구형으로 생산력이 안정적이었다. 또한 갈뫼는 조리시 백색팽이 보다 씹는 저작감이 우수하므로 이를 홍보에 적극 이용할 필요가 있다.
Pseudomonas agarici에 의해 발생하는 세균성회색무늬병은 양송이 재배에서 문제가 되는 대표적인 병해이다. 본 연구에서는 세균성회색무늬병의 생물학적 방제법에 이용할 수 있는 길항미생물의 항균활성과 선발된 길항미생물에 대해 폿트 수준의 생물검정 실험을 실시하였다. 재배중인 양송이 배지에서 세균성회색무늬병 병원균을 강하게 억제하는 길항세균 HC12를 선발하였으며, 생리 생화학적 실험과 유전적 실험결과 HC12균주는 Alcaligenes sp.로 동정되었다. Alcaligenes sp. HC12를 양송이에 처리한 결과 63%의 방제효과를 보였다. 따라서 Alcaligenes sp. HC12가 양송이버섯 세균성회색무늬병 방제를 위해 합성농약을 대체할 수 있는 친환경 방제제가 될 수 있을 것으로 생각된다.
미생물 제제의 실내 pot 실험을 통한 효능 실험에서 선발된 Monacrosporium thaumasium을 이용한 KBC3017 제제의 실외 포장 실험을 통해 최적의 구성과 효능 조건을 찾았다. 선발된 균주의 미생물제제 제조를 위해 첨가한 첨가제 중 무기증량제로 Diatomite와 유기증량제로 생옥분이 효과적이었으며, 처리량별 선충 밀도 억제효과는 처리량이 많을수록 효과가 높았으나, 적정 처리량은 2%의 diatomite와 옥가루가 포함된 KBC3017 제제를 이용하여 방제하였을 때 71%의 선충 방제 효과가 나타났다. 이 방제가는 대조구와 비교하였을 때 뿌리와 줄기에서 보다 좋은 효과가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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