The aim of this study was to investigate the effects of red ginseng-derived non-saponin fraction (NSF) on inflammatory responses and monocyte-to-macrophage differentiation in RAW264.7 and THP-1. NSF effectively inhibited inflammatory responses by downregulating nitric oxide (NO) production and protein levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2). NSF ($2000{\mu}g/mL$) decreased the levels of NO, iNOS, and COX-2 by 33, 83, and 64%, respectively. NSF inhibited the differentiation of monocyte-to-macrophage by decreasing cell adherence along with downregulation of the cluster of differentiation molecule $11{\beta}$ ($CD11{\beta}$) and CD36. In addition, pro-inflammatory cytokines, such as tumor necrosis factor-alpha, interleukin 6, and monocyte chemoattractant protein 1 (MCP-1), were significantly reduced with NSF treatment. The NSF-mediated inhibition of inflammatory responses was due to the regulation of nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$) and nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (Nrf2). NSF effectively suppressed the translocation of $NF-{\kappa}B$ into the nucleus, while nuclear Nrf2 and its target protein, heme oxygenase-1, levels were significantly increased.
Protopanaxadiol (PPD) is a mixture of protopanaxadiol type saponins with a dammarane skeleton, from Korean red ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer; Araliaceae). Korean ginseng is well-known herb to treat almost all kinds of diseases in Oriental medicine. This herb was particularly prescribed for treatment various inflammatory diseases, including rheumatoid arthritis, atherosclerosis, and diabetes mellitus, for centuries. To understand the efficacy of ginseng against inflammatory diseases, we aimed to show anti-inflammatory activities of the PPD in murine macrophage cell line, RAW264.7 cells using nitric oxide (NO) production assay and the expressions of pro-inflammatory cytokines, such as tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), and IL-6, and monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1). We found that PPD saponin significantly blocked LPS ($1{\mu}g/ml$)-induced NO production in a dose-dependent manner. In addition, PPD abrogated the expressions of LPS-induced pro-inflammatory cytokines, such as IL-$1{\beta}$ and MCP-1. Moreover, cyclooxygenase (COX)-2, a critical enzyme to produce prostaglandin E2 (PGE2), was significantly inhibited by PPD in LPS-activated RAW264.7 cells. Taken together, these results suggested that anti-inflammatory efficacy of Korean red ginseng on inflammatory diseases is, at least, due to the NO inhibitory activity and the inhibition of the expressional level of inflammatory cytokines and/or mediators.
To search for cytotoxic components from Allium victoriallis , MTT assays on each extract and an isolated component, gitogenin 3-O-lycotetroside, were performed against cancer cell lines. Cytotoxicities of most extract were shown to be comparatively weak, though $IC_50$ values of $CHCl_3$fraction was found to be <31.3-368.4 $\mu\textrm{g}/ml$. From the incubated methanol extract at $36^{\circ}C, eleven kinds of organosulfuric flavours were predictable by CG-MS performance. The most abundant peak was revealed to be 2-vinyl-4H-1,3-dithiin(1) by its mass spectrum. Further, this extract showed significant cytotoxicities toward cancer cell lies. Silica gel column chromatography of the n-butanol fraction led to the isolation of gitogenin 3-O-lycotetroside (3) along with astragalin (4) and kaempferol 3, 4'-di-O-$\beta$-D-glycoside (5). This steroidal saponin exhibited significant cytotoxic activities ($IC_50$, 6.51-36.5 $\mu\textrm{g}/ml$) over several cancer cell lines. When compound 3 was incubated for 24 h with human intestinal bacteria, a major metabolite was produced and then isolated by silica gel column chromatography. By examining parent and prominent ion peak in FAB-MS spectrum of the metabolite, the structure was speculated not to be any of prosapogenins of 3, suggesting that spiroketal ring were labile to the bacterial reaction. These suggest that disulfides produced secondarily are the antitumor principles.
Effect of enzyme treatment on physicochemical characteristics of small tea bean percolate were estimated. Three types of small red bean percolate were prepared by heat treatment for 30 min at $95^{\circ}C$ (1st), 30 min at $95^{\circ}C$ (2nd), and 40 min at $120^{\circ}C$ (3rd). They were then treated with 0.5% ${\alpha}-amylase$ (v/v) for 4 hr at $108^{\circ}C$ (${\alpha}-amylase$ treatment), then with 0.5% ${\beta}-amylase$ (v/v) for 4 hr at $60^{\circ}C$ (${\alpha}-$ and ${\beta}-amylase$ treatment). Crude saponin contents of 1st-3rd percolates were 0.82, 1.44, and 1.52 mg/g, respectively. ${\circ}Brix$ of small red bean percolates treated with enzymes increased to $0.8-1.2\;{\circ}Brix$ with 2nd and 3rd percolates showing no significant difference between ${\alpha}-amylase$ and ${\alpha}-$ and ${\beta}-amylase$ treatments. pH of 3rd percolate treated with ${\alpha}-$ and ${\beta}-amylase$ decreased from initial 6.2 to 4.7. Hunter L value of small red bean percolate treated with ${\alpha}-$ and ${\beta}-$ decreased, whereas a and b values increased. Small red bean beverage made with 3rd percolate showed high score in flavor, taste, and overall acceptability. Results suggest small red bean percolate treated with enzymes could be used for preparation of small red bean beverage.
Background: Although Korean Red Ginseng (KRG) has been traditionally used for a long time, its anti-inflammatory role and underlying molecular and cellular mechanisms have been poorly understood. In this study, the anti-inflammatory roles of KRG-derived components, namely, water extract (KRG-WE), saponin fraction (KRG-SF), and nonsaponin fraction (KRG-NSF), were investigated. Methods: To check saponin levels in the test fractions, KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF were analyzed using high-performance liquid chromatography. The anti-inflammatory roles and underlying cellular and molecular mechanisms of these components were investigated using a macrophage-like cell line (RAW264.7 cells) and an acute gastritis model in mice. Results: Of the tested fractions, KGR-SF (but not KRG-NSF and KRG-WE) markedly inhibited the viability of RAW264.7 cells, and splenocytes at more than 500 mg/mL significantly suppressed NO production at $100{\mu}g/mL$, diminished mRNA expression of inflammatory genes such as inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, tumor necrosis factor-${\alpha}$, and interferon-${\beta}$ at $200{\mu}g/mL$, and completely blocked phagocytic uptake by RAW264.7 cells. All three fractions suppressed luciferase activity triggered by interferon regulatory factor 3 (IRF3), but not that triggered by activator protein-1 and nuclear factor-kappa B. Phospho-IRF3 and phospho-TBK1 were simultaneously decreased in KRG-SF. Interestingly, all these fractions, when orally administered, clearly ameliorated the symptoms of gastric ulcer in HCl/ethanol-induced gastritis mice. Conclusion: These results suggest that KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF might have anti-inflammatory properties, mostly because of the suppression of the IRF3 pathway.
Ginsenoside Rp1 (G-Rp1) is a saponin derivate that provides anti-metastatic activities through inhibition of the NF-${\kappa}B$ pathway. In this study, we examined the effects of G-Rp1 on regulatory T cell (Treg) activation. After treatment of splenocytes with G-Rp1, Tregs exhibited upregulation of IL-10 expression, and along with dendritic cells (DCs), these Tregs showed increased cell number compared to other cell populations. The effect of G-Rp1 on Treg number was augmented in the presence of lipopolysaccharide (LPS), which mimics pathological changes that occur during inflammation. However, depletion of DCs prevented the increase in Treg number in the presence of G-Rp1 and/or LPS. In addition, G-Rp1 promoted the differentiation of the memory types of $CD4^+Foxp3^+CD62L^{low}$ Tregs rather than the generation of new Tregs. In vivo experiments also demonstrated that Tregs and DCs from mice that were fed G-Rp1 for 7 d and then injected with LPS exhibited increased activation compared with those from mice that were injected with LPS alone. Expression of TGF-${\beta}$ and CTLA4 in Tregs was increased, and upregulation of IL-2 and CD80/CD86 expression by DCs affected the suppressive function of Tregs through IL-2 receptors and CTLA4. These data demonstrate that G-Rp1 exerts anti-inflammatory effects by activating Tregs in vitro and in vivo.
Park, Kyoung Jin;Suh, Won Se;Cha, Joon Min;Park, Jong Eel;Woo, Kyeong Wan;Kim, Sun Yeo;Lee, Kang Ro
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.48
no.4
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pp.261-267
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2017
As part of the search for bioactive constituents of Korean medicinal plants, twelve steroids (1-12) were isolated from the rhizomes of Dioscorea nipponica. The isolated compounds were identified as diosgenin ($3{\beta}$, 25R)-spirost-5-en-3-ol (1), 25(R)-dracaenoside E (2), dioscin (3), gracillin (4), prosapogenin B (5), 25(R)-dracaenoside G (6), diosgenin 3-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl($1{\rightarrow}3$)-${\beta}$-D-glucopyranoside (7), ophipogonin C′ (8), 7-oxodioscin (9), protodioscin (10), hypoglaucin F (11), and protoneogracillin (12). Their structures were characterized by spectroscopic data and identified by comparing these data with those in the literatures. All the isolates (1-12) were evaluated for their neuroprotective effects through induction of nerve growth factor in C6 glioma cells and effects on nitric oxide (NO) production in murine microglia cell line BV-2. Compounds 7 and 12 were found to induce upregulation of NGF secretion without causing significant cell toxicity and compound 4 exhibited potent anti-neuroinflammatory activity.
Kang, Hye Jung;Lee, Jong Woo;Park, Tae Woo;Park, Hye Yoon;Park, Junseong
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.46
no.4
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pp.349-360
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2020
Bio-conversion manufacturing technology has been developed to produce ginsenoside Rd which is increasingly in demand as a cosmetic material due to various possibilities related to improving skin function. In order to convert ginsenoside Rb1 which is contained in red ginseng saponin (RGS) into Rd, several commercial enzymes were tested. Viscoflow MG was found to be the most efficient. In order to optimize the conversion of RGS to ginsenoside Rd by enzymatic transition was carried out using response surface methodology (RSM) based on Box-Behnken design (BBD). The main independent variables were RGS concentration, enzyme concentration, and reaction time. Conversion of ginsenoside Rd was performed under 17 conditions selected according to BBD model and optimization conditions were analyzed. The concentration of the converted ginsenoside Rd ranged from 0.3113 g/L to 0.5277 g/L, and the highest production volume was obtained under condition of reacting 2% RGS and 1.25% enzyme for 13.5 hours. Consequently, RGS concentration, enzyme concentration which is 0.05 less than p-value and among the interactions between the independent variables, the interaction between enzyme concentration and reaction time was confirmed to be the most influential.
Kang Kyoung Ah;Kim Yeong Wan;Kim Seung Uk;Chae Sungwook;Koh Young Sang;Kim Hee Sun;Choo Min Kyung;Kim Dong Hyun;Hyun Jin Won
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.6
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pp.685-690
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2005
We recently reported that the ginseng saponin metabolite, compound K (20-O-$\beta$-D-glucopyra-nosyl-20(S)-protopanaxadiol, IH901), inhibits the growth of U937 cells through caspase-dependent apoptosis pathway. In this study, we further characterized the effects of compound K on U937 cells and found that, in addition to apoptosis, compound K induced the arrest of the G1 phase. The compound K treated U937 cells showed increased p21 expression; an inhibitory protein of cyclincdk complex. The up-regulation of p21 was followed by the inactivation of cyclin D and the cdk4 protein, which act at the early $G_1$ phase, and cyclin E, which acts at the late $G_1$ phase. Furthermore, compound K induced the activation of JNK and the transcription factor AP-1, which is a downstream target of JNK. These findings suggest that the up-regulation of p21 and activation of JNK in the compound K treated cells contribute to the arrest of the $G_1$ phase.
Park, Seon Kyeong;Kim, Jong Min;Kang, Jin Yong;Ha, Jeong Su;Lee, Du Sang;Kim, Ah-Na;Choi, Sung-Gil;Lee, Uk;Heo, Ho Jin
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.11
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pp.1552-1563
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2016
To examine the cognitive function of onion (Allium cepa L.) beverages (odourless and fortified), we analyzed in vitro neuronal cell protection against $H_2O_2$-induced cytotoxicity and performed in vivo tests on amyloid beta ($A{\beta}$)-induced cognitive dysfunction. Cellular oxidative stress and cell viability were evaluated by DCF-DA assay and MTT assay. These results show that fortified beverage resulted in better neuronal cell protection than odourless beverage at lower concentration ($0{\sim}100{\mu}g/mL$). Fortified beverage also showed more excellent acetylcholinesterase (AChE) inhibitory activity ($IC_{50}$: 4.20 mg/mL) than odourless beverage. The cognitive functions of odourless beverage and fortified beverage in $A{\beta}$-induced neurotoxicity were assessed by Y-maze, passive avoidance, and Morris water maze tests. The results show improved cognitive function in both groups treated with beverages. After in vivo tests, cholinergic activities were determined based on AChE inhibition and acetylcholine levels, and antioxidant activities were measured as SOD, oxidized glutathione (GSH)/total GSH ratio, and MDA levels in mouse brain tissue. In a Q-TOF UPLC/MS system, main compounds were analyzed as follows: odourless beverage (five types of sugars and three types of phenolics) and fortified beverages (six types of phenolics and two types of steroidal saponins).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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