가토 해마(hippocampus)에서 acetylcholine(ACh) 유리에 미치는 cAMP의 역할에 관한 지견을 얻고자하여 $[^3H]-choline$으로 평형시킨 해마 slice 및 시냅토솜(synaptosome)을 사용하여 $[^3H]-ACh$ 유리에 미치는 여러가지 약물들의 영향을 관찰하였다. Adenylate cyclase 활성화제인 forskolin$(0.1{\sim}30{\mu}M)$은 전기 및 고농도 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리를 용량 의존적으로 증가시켰으며, dbcAMP 또한 ACh 유리를 강화시켰다. Muscarine성 흥분제인 oxotremorine$(0.1{\sim}30{\mu}M)$은 전기 및 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리 효과를 용량 의존적으로 감소시켰으며, 이러한 효과는 forskolin 및 atropine에 의하여 차단됨을 관찰할 수 있었다. 한편 $K^+-channel$ 억제제인 glibenclamide$(1,\;10{\mu}M)$는 자체로는 $K^+$ 자극에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리를 약간 억제시킴을 관찰할 수 있었으며, 대량의 forskolin$(10\;{\mu}M)$에 의한 $[^3H]-ACh$의 증가효과를 감약시킴을 알 수 있었다. 이상의 실험 결과로 가토 해마의 presynaptic muscarinic autoreceptor를 통한 ACh 유리의 조절에는 세포내 cAMP의 관여가 확실하다 하겠으나, 일부 $K^+-currents$의 관여를 배제할 수는 없을 것으로 사료된다.

Racemic ketamine을 사용하여 개구리의 좌골신경 및 toe muscle에 대한 작용을 관찰하였다. 실험방법으로는 214 mM sucrose을 사용하여 서로 다른 두 종류의 투여 방법으로 세포막의 활동 전압에 대한 영향을 electric recording으로 관찰하였다. 즉, intracellular 투여는 single sucrose gap technique으로, extracellar 투여는 double sucrose gap technique을 사용하였으며 그 실험 결과는 아래와 같았다. 1. Racemic ketamine은 개구리의 좌골신경 및 toe muscle의 활동전압을 intracellular 및 extracellular 투여시 모두 의의 있게 억제하였다. 2. 개구의 toe muscle에서 $K^+$-수축을 억제하였다. 3. naloxone은 ketamine의 억제작용을 완전히 차단하지는 못하였다.

허혈심근의 재관류시 arachidonic acid가 반응성 산소대사물의 발생원으로서 심근 손상에 미치는 영향을 검토하였다. Langendorff 관류장치를 이용하여 흰쥐 적출심장을 0.5ml/min의 저용량으로 관류 (45분)한 후 정상관류 (7 ml/min)로 복귀 시키므로써 실험적인 허혈-재관류 심장을 만들었다. 재관류시 Na arachidonate $(10^{-7}{\sim}10^{-2}{\mu}g/ml)$를 투여한 후 superoxide anion 생성을 관찰하고, 심근 손상의 지표로 lactic dehydrogenase(LDH)유리를 측정 하였으며 이들에 대한 각종 arachidonic acid 대사 억제 약물의 영향을 비교 검토하였다. Superoxide anion 생성은 SOD-억제성 ferricytochrorme C 환원 반응을 이용하였다. 연구성적은 다음과 같다. 1) 저용량 관류후 재관류시 ferricytochrorme C환원은 superoxide dismutase (SOD, 300 U/ml) 및 indomethacin (60 nmole/ml), ibuprofen $(30\;{\mu}g/ml)$에 의하여 억제되었다. 2) Na arachidonate는 용량의존적으로 ferricytochrorme C 환원을 증가 시켰으며 반응성 산소대사물 제거효소인 superoxide dismutase (SOD, 300 U/ml)에 의하여 현저히 억제되었다. 3) Na arachidonate $(10^{-3}\;{\mu}g/ml)$에 의한 superoxide anion 생성은 cyclooxygenase 억제약물인 indomethacin (60 nmol/ml), lipooxygenase 억제약물인 nordihydroguaiaretic acid$(NDGA,\;0.1\;{\mu}mole/ml)$, arachidonic acid의 substrate inhibitor인 eicosatetraynoic acid $(ETYA,\;1\;{\mu}g/ml)$에 의하여 현저히 억제되었다. 4) Na arachidonate는 LDH 유리를 증가시켰으며 SOD에 의하여 유의하게 억제 되었다. 5) Na archidonate에 의한 LDH 유리증가는 indomethacin, NDGA, ETYA에 의하여 유의하게 억제 되었다. 이상의 결과로 흰쥐의 허혈-재관류심근에서 arachidonic acid는 그 대사 과정에서 반응성 산소대사물을 발생하고 이는 심근세포손상에 부분적으로 기여할 수 있을 것으로 여겨졌다.

${\beta}-$수용체 효능약물 ((-)-NE), 길항약물 $((\pm)-propranolol,\;labetalol)$ 및 PDE 억제약물(imazodan, KR-30045, KR-30075 등)에 대한 ${\beta}-adrenoceptor$ binding 실험을 ${\beta}_1/{\beta}_2$ 비선택적 radioligand인 $(-)-[^3H]-DHA$를 사용하여 실시하였다. Saturation 실험에서 ${\beta}_1$ 및 ${\beta}_2$ 수용체를 모두 갖고 있는 rat 좌심실의 ${\beta}$ 수용체에 대한 $(-)-[^3H]-DHA$의 $K_d$ 값은 $1.5{\pm}0.43\;nM$, $B_{max}$는 $22.0{\pm}0.9\;fmol/mg$ protein이었다. $({\pm})propranolol$, labetalol 및 (-)NE는 단일상으로 $(-)-[^3H]-DHA$의 결합을 억제하였으며 Ki 값은 각각 $17.0{\pm}0.43\;nM$, $57.3{\pm}1.30\;nM$, $1.57{\pm}0.95\;{\mu}M$로 나타났다. 실험에 사용한 모든 PDE 억제약물들은 $(-)-[^3H]-DHA$ 결합을 $10^{-3}\;M$의 고농도에서도 10% 미만으로 억제했다. 실험결과, propraolol, labetalol 및 NE는 ${\beta}_1/{\beta}_2$ 수용체에 대해 비선택적인 약물로 나타났으며, imazodan 및 신합성 PDE 억제약물들은 rat 심근에 있는 ${\beta}-$수용체에 친화성이 거의 없음을 알 수 있었다.

내피세포가 제거된 토끼의 적출 장간막 동맥에서 토끼의 대동맥 내피세포로 부터 A23187과 acetylcholine은 NO와 유사한 혈관 이완성 물질 (EDRF)을 유리한다. 이에 첨가하여 A23187은 acetylcholine과는 달리 superoxide anion에 의하여 파괴되지 않는 EDRF도 유리시킴을 확인하고 이의 특성에 대하여 연구하였다. 정상적인 생리영양액에서는 A23187과 acetylcholine의 용량-반응 곡선은 내피세포에 의존하지 않는 sodium nitroprusside의 곡선과 유사하였다. 이들은 methylene blue에 의하여 억제되었다. Hypoxanthine (HX)과 xanthine oxidase (XO)를 bath내로 투여시 phenylephrine에 의한 수축이 일과성으로 증가한 후 지속적으로 이완되었다. HX-XO 반응중에는 A23187은 장간막 동맥을 즉각적으로 이완시켰으나 acetylcholine의 이완작용은 소실되었다. A23187에 의하여 야기되는 장간막동맥의 이완은 50 mM $K^+-PSS$로 수축을 야기시켰을 때에는 나타나지 아니하였다. Superoxide dismutase를 전처치하였을 때는 HX-XO 반응중에도 acetylcholine 뿐만아니라 A23187에 의한 장간막 동맥의 수축은 이완되었다. 한편, acetylcholine에 의하여 야기되는 장간막 동맥의 이완은 A23187에 의하여 야기되는 이완에 비하여 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)에 훨씬 더 민감하게 억제되었다. 내피세포의 기능과는 무관한 sodium nitroprusside에 의하여 야기되는 이완은 PMA에 의하여 영향을 받지 아니하였다. 이상의 결과로 미루어 볼때, A23187과 acetylcholine은 methylene blue에 의하여 억제되는 내피세포 의존성 이완을 야기시키고, 첨가하여 A23187은 어떤 병적 환경 아래서는 superoxide anion과 PMA에 저항성을 지닌 혈관이완성 물질을 유리하는 것으로 사료된다. 앞으로 A23187에 의하여 유리되는 혈관 이완성 물질이 superoxide anion에 의존하여 생성된 것인지에 대하여는 추후의 연구과제이다.

흰쥐 말초혈액에서 얻은 T 림프구를 아드레날린성 ${\beta}-$수용체 효현제 및 concanavalin A(Con-A)로 자극해 다음과 같은 결과를 얻었다. 자극이 없는 상태에서의 주 인산화 단백은 분자량 44kD, 등전점 6.8의 단백이었으며 효현제로 자극시키면 분자량 44kD, 등전점 6.3의 단백이 새로이 인산화되어 나타났다. 이 분자량 44kD, 등전점 6.3의 단백은 forskolin에 의해 역시 인산화되며 A-kinase 억제제인 H-8을 전처치하면 인산화의 억제가 나타났다. 또한 Con-A로 자극시키면 44 kD/pI 6.3 단백의 인산화가 증가되었으며 이 인산화의 증가는 CaM kinase 억제제인 W-7 전처치에 의해 억제되었다. H-7은 분자량 44 kD, 등전점 6.8 단백의 인산화를 감소 시켰다. 이상의 결과로 분자량 44 kD 등전점 6.3의 단백은 A-kinase와 CaM kinase 모두에 의해 인산화 되는 기질단백으로서 tryptic peptide map상에서 44 kD/pI 6.8 단백과 44 kD/pI 6.3 단백은 서로 다른 단백임을 알 수 있었다.

염증성 질환의 원인 인자중 하나로 알려진 사람 호중구 Cathepsin G를 두단계의 크로마토그라피를 거쳐 분리하였다. 이 순수 분리된 효소를 이용하여 토끼에서 항체를 In Vivo 합성하고 그 혈액으로부터 순수 항체를 분리하였다. NSAIDs 약제중 phenylbutazone, sulindac, oxyphenbutazone, salicilic acid등은 이 효소를 강력하게 억제하였으며 $IC_{50}$은 $0.3{\sim}0.8\;mM$ 이었다. 고려인삼의 지용성분획도 tetracycline, novobiosin, rifamycin이 Cathepsin G의 효소 활성도에 대해서 강력한 억제 작용을 나타내었으나 다른 항생제는 그 작용이 무시할 수 있을 정도였다. 그러나 tetracycline계열의 항생제의 경우 실제 치료 효과를 나타내는 혈중농도에서 강한 억제 작용을 보였다. 특히 항균 작용과 관계하는 tetracycline의 4번 위치의 N-dimethy radical을 제거한 tetracycline은 감염군의 약제 저항성을 피할 수 있을 것으로 생각되므로 만성 염증성질환의 장기 치료에 이용될 수 있는 새로운 약제로써 제시한다.

Paraquat 독성작용에 있어서 mitochondria의 잠재적인 역할을 평가하기 위하여, 이 약물의 산소 radical 생성과 지질과산화 반응에 미치는 영향을 mouse간의 submitochondrial particle 과 microsome에서 비교하여 보았다. Submitochondrial particle 사용시 NADH를, microsome 사용시 NADPH를 전자공여체로 이용한 경우 paraquat는 두 분획에서 superoxide anion과 hydrogen peroxide의 생성을 증가시켰다. 동일한 조건하에서 paraquat는 hydroxyl radical의 생성을 시사하는 methional로 부터 ethylene의 생성을 증가시켰다. 그러나, paraquat에 의한 이들 각각의 효과는 microsome에서 보다 submitochondrial particle에서 약간 낮았다. 한편, 두 분획 모두에서 paraquat는 지질과산화 반응을 촉진시켰다. Submitochondrial particle과 microsome에서의 Paraquat에 의한 지질과산화반응은 i) 두 분회에서 지질과산화는 SOD에 의해서 부분적으로 억제됨을 보였고, DETAPAC(iron chelator)에 의해서는 완전히 억제되었고, catalase와 hydroxyl radical scavenger에 의해서는 억제되지 아니하였으며, ii) 반응내 $ADP-Fe^{3+}$ 첨가로 paraquat에 의한 지질과산화는 더욱 증가되었지만 methional로 부터 ethylene 생성은 감소하여 hydroxyl radical 생성과 지질과산화 사이에는 상관성이 없음으로 보아 같은 기전을 통해 촉진됨을 알 수 있었고 이러한 촉진작용은 perferryl ion을 통하여 일어나리라 추측되었다. Submitochondrial particle에서 paraquat에 의해 촉진된 산소라디칼 생성과 지질과산화 반응은 p-hydroxymercuribenzoate(NADH dehydrogenase 억제제)에 의하여 억제되었으나 다른 respiratory chain 차단제들에 의해서는 거의 영향을 받지 않음으로 보아 mitochondria에서의 paraquat의 redox-cycling은 CoQ 보다는 NADH dehyrogenase와 관련이 있음을 시사하였다. 이상의 결과로 보아 산소 radical의 생성과 지질과산화를 유도하는 paraquat의 redox-cycling은 microsome에서와 마찬가지로 mitochondria에서도 일어나며, 이결과 생체내에서의 paraquat의 독작용에 관여함을 짐작할 수 있다.

Adenylate cyclase 효소를 활성화시키는 약물인 Forskolin의 흰쥐 적출관류 부신으로부터 Ach, excess $K^+$, McN-A-343 및 caffein에 의한 catecholamines (CA) 분비작용에 대한 영향을 검색하고, 그 기전을 규명코자 연구를 시행하여 다음과 같은 연구결과를 얻었다. Forskolin (1.0 uM)은 흰쥐 부신적출정맥내로 1분동안 관류시킨 후 Ach(50 ug), excess $K^+$(56 mM), DMPP (100 uM) 및 caffeine (0.3 mM)에 의한 CA 분비작용을 현저히 증강시켰으나 McN-A-343에 의한 CA분비작용에는 영향을 미치지 않았다. Forskolin 자체는 CA분비작용을 일으키지 못하였다. 또한 세포의 calcium을 제거한 상태에서도 위 약물에 의한 CA분비작용에 대하여 유의한 증강작용을 나타내었다. 그러나 McN-A-343의 CA작용에는 영향이 없었으나 위의 약물의 CA분비작용을 유의하게 강화시켰다. Cyclic AMP를 증가시키는 약물로 알려져 있는 dibutyryl cyclic AMP (DBcAMP)는 300 uM농도를 1분간 관류시 Ach, excess $K^+$ 및 DMPP의 CA 분비작용을 뚜렷하게 증강시켰으나 McN-A-343 및 caffeine의 CA분비에는 별다른 영향이 없었다. DBcAMP 자체도 CA분비작용에는 영향을 미치지 못하였으나 또한 DBcAMP는 세포의 칼슘제거시에도 위의 약물에 의한 CA분비작용을 의의있게 증강시켰다. 그렇지만, McN-A-343의 CA분비작용은 증강시키지 못하였다. 이상의 연구결과로 보아 Forskolin는 adenylate cyclase를 활성화 시킴으로써 cyclic AMP 농도를 증가시켜 세포내로 칼슘유입을 증강시키며, 또한 세포내의 칼슘이동에도 관여함으로써 cholinergic nicotinic stimulation 및 depolarization에 의한 CA분비작용을 상승시키는 것으로 사료되어진다.

본 연구에서는 흰쥐의 착상지연을 유도하여 착상기간동안 자궁조직내 prostaglandin (PG) 생합성이 어떠한 인자에 의해서 조절되는가를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 흰쥐의 착상지연과정동안 estradiol을 처리하면 처리후 4시간만에 자궁조직내의 cAMP의 농도가 급격하게 증가하였다. PGE와 $PGF_2{\alpha}$의 농도는 estradiol을 처리한 후 12시간이 경과하였을때 증가하였으나 $PGF_2{\alpha}$의 증가는 통계적으로 유의하지는 않았다. 또한 indomethacin을 estradiol과 동시에 처리하면 estradiol 처리로 인한 PGE와 $PGF_2{\alpha}$의 농도 증가는 나타나지 않았으나 cAMP 농도는 증가하였다. dbcAMP를 처리하면 자궁내 PGE 및 $PGF_2{\alpha}$의 농도가 증가하기 시작하여 estradiol이 투여시에 비하여 4시간 빨리 8시간후에 최고치에 도달하였으며 phosphodiesterase inhibitor인 theophylline을 전처치하면 estradiol만 투여한 것에 비하여 자궁조직내 PGE 및 $PGF_2{\alpha}$의 농도가 유의하게 증가하였다. 이상의 결과로 보아 흰쥐의 착상지연과정동안 estradiol이 자궁의 prostaglandin 합성을 증가시키며 이러한 증가는 cAMP의 증가를 매개하는 것으로 생각된다.

본 연구에서는 흰쥐의 수정란 착상시기에 estradiol이 prostaglandins(PGs) 합성의 전구체인 arachidonic acid를 생성하는데 관여하는 phospholipase $A_2(PLA_2)$의 활성도를 조절하므로써 PGs의 합성을 촉진하는가를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 자궁의 $PLA_2$ 활성도는 수정란이 착상하는 시기인 임신 제 5일에 증가되었으며, 비착상부위에서보다는 착상부위에서 더 높은 것으로 나타났다. Delayed implantation model에서, $PLA_2$ 활성도는 estradiol을 투여한 지 11시간후에 증가되었으며, dbcAMP를 투여한지 8시간후에 증가되었다. 또한 estradiol을 투여하기 2시간전에 phosphodiesterase inhibitor인 theophylline을 투여하면 estradiol만 투여한것에 비하여 $PLA_2$ 활성도가 증가되었다. Estradiol 또는 dbcAMP와 함께 indomethacin을 투여하면 자궁의 PGs합성은 억제되었으나 $PLA_2$ 활성도에는 영향을 주지않았다. 이상의 결과로 보아 흰쥐의 착상시기에 estradiol은 cAMP를 매개로하여 자궁의 $PLA_2$ 활성도를 촉진하므로써 PGs의 합성을 증가시키는 것으로 생각된다.

Adriamycin (Doxorubicin HCl)의 혈관밖 유출에 따른 조직의 손상, 특히 피부괴양 및 괴사 기전을 규명하기 위한 연구의 일환으로 흰쥐 피부세포를 이용한 in vitro 실험에서 adriamycin에 의한 산소라디칼 생성 및 그와 관련된 세포독성 기전으로 지질과산화를 검토하였다. Adriamycin은 흰쥐 태자 피부의 배양세포에서 lactic dehydrogenase(LDH) 유리를 용량 및 시간 의존적으로 증가 시켰으며, NADPH 및 NADH 첨가 조건에서 $superoxide\;anion(O^-\;_2{\cdot})$ 생성을 현저히 증가시켰다. Adriamycin은 지질과산화 반응의 척도인 malondialdehyde(MDA) 생성을 역시 NADPH, NADH 존재하에서 용량의존적으로 증가시켰고, 산소라디칼 제거물질들인 superoxide dismutase (SOD), catalase 및 thiourea와 항산화물질인 butylated hydroxytoluene(BHT), ${\alpha}-tocopherol$은 MDA 생성증가를 현저히 억제하였다. 1, 3,-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea(BCNU)를 처리하여 산화성 공격에 대한 방어기전의 하나인 glutahione 체계를 억제할 경우 adriamycin에 의한 MDA 생성은 더욱 현저히 증가하였고, 이는 역시 항산화 물질들에 의하여 억제되었다. 이상의 연구성적에서 adriamycin은 산소라디칼 생성의 증가와 그에 따른 지질과산화를 촉진하므로서 피부세포에 손상을 줄 것으로 사료되었다.

급격한 기온의 변화가 심한 환절기에 우리는 감기라는 상기도 감염에 잘걸리게 된다. 비록 그 증상이 중하지 않고 또 안정을 하면서 10일정도가 되면 자연히 치유된다 할지라도 때로는 중한 합병증으로 고생하는 수가 있으며 또 두통, 발열, 기관지염, 인후통등으로 인하여 활동이 제한되며 활동능력이 저하되기도 한다. 1991년 6월 20일부터 7월 29일까지 원주 기독병원 내과에서 치료를 받은 30명의 환자에게 $1{\sim}7$일간 SJ-002를 $30\;ml{\times}3/day$를 투여하여 치료한 결과 다음과 같은 유의성 있는 결론을 얻었다. 상기도 감염증 환자 30명 (100.0%) 모두에게서 증상의 호전을 보였다. 부작용은 8명 (26.7%)에서 나타났으며 투약을 중지함으로써 모두 소실되었다. 1. 본 연구에서는 상기도 감염증 환자 30명 (100.0%) 모두에게서 임상증상의 전반적 개선이 관찰되었으며 특히 감기의 제증상에서 나타날 수 있는 증상등의 치료에 유효성이 있는 복합액제라고 생각된다. 2. 복용하는 동안 발전, 변비등의 경미한 부작용 환자 8명이 나타났지만 투약을 중지함으로서 모든 부작용들이 소실되었다. SJ-002(1병 30ml)의 조성은 다음과 같다. Acetaminophen 300mg Ibuprofen 100mg 12.5mg DL-methylephedrine HCl 30mg Caffeine anhydrous 2.5mg Chlorpheniramine maleate 80mg Guaifenesin 15mg Dextromethorphan HBr

1991년 6월 20일부터 7월 30일 까지 경북대학병원 내과에 내원한 33명의 환자를 대상으로 상기도 감염증에 의한 인후통, 기관지염 및 발열이 있는 환자에게 $1{\sim}7$일간 SJ-002액을 1회 30ml 1병 씩 1일 3회 투여하는 방식에서 임상실험을 실시하였다. 치료효과의 판단은 증세의 호전동도를 5단계로 구분하여 평가하였다. 부작용 여부를 알아보기 위하여 약물투여후 백혈구수, 적혈구수, 헤모글로빈수 및 혈관판수등의 혈액검사와 S-GOT, S-GPT, ALP및 Creatinine등의 형청생화학 검사 및 뇨검사도 시행하였다. 전체 33명의 상기도 감염증 환자에게 SJ-002를 투여한 결과 28명 (84.8%)에게서 증상의 호전을 보였으며 5명 (15.2%)은 치료전과 동일하였다. 환자 각각의 임상적 증상 개선은 SJ-002투여 3일째에 거의 개선되었다. 치료도중 부작용은 모두 8명 (24.2%)에서 발생하였다. 이중 2명 (6.0%)은 오심 및 구토등의 부작용이 발생하였으나 투약에 영향을 미치는 정도가 아니었다. 2명 (6.0%)은 경미한 부작용이 발행하였으나 이는 투약을 중지하면 곧 소실되었고, 4명은 경련 및 설사등의 부작용이 발생하여 투약을 중지 하였다. 또 투약후 실시한 혈액검사 및 소변 검사상 적혈구수, 백혈구수, S-GOT, S-GPT, ALP, Creatinine의 증가나 단백뇨 및 당뇨등의 소견을 볼 수 없었다. 전체적인 개선도와 전반적인 안정도를 종합적으로 판단하여 볼 때 SJ-002를 상기도 감염증 환자에게 투여시 28명중 84.8%에게 유용했으며 특히 10명 (30.0%)은 임상증상이 현저히 호전되었다. 감기에 의한 인후통, 기관지염, 발열 및 기침등의 증상을 개선시키기 위해 투여한 SJ-002의 임상실험결과 상기도 감염을 포함한 감기의 제증상을 호전시킴을 알 수 있었고, 여러가지 유의성 있는 복합성분으로 처방된 이액제의 유용성이 한층 커질 것으로 기대되어진다. (성분 및 함량) 1병(30 ml)중 Acetaminophen 300mg Ibuprofen 100mg DL-methylephedrine HCl 12.5mg Caffeine anhydrous 30mg Chlorpheniramine maleate 2.5mg Guaifenesin 80mg Dextromethjorphan HBr 15mg