본 연구는 PMA (Phorbol 12-myristate 13-acetate)에 의해 MMP 활성이 증가된 섬유육종세포에서 MMP-2와 -9의 mRNA 발현 및 단백질 활성에 대한 만형자의 억제 효과를 zymography와 RT-PCR 방법에 의해서 측정하였다. 만형자 시료는 dichloromethane에 의해서 두 번 추출되었으며 동일한 과정을 methanol를 사용하여 반복하였다. 각각의 용매에 의해서 얻어진 추출물을 합한 후에 zymography를 이용하여 이 추출물의 MMP-2와 -9에 대한 억제효과를 측정한 결과 유의적인 억제효과를 나타내었다. 억제활성 성분을 추적하기 위하여 극성에 따른 추출물의 용매분획을 실시하여 n-hexane, 85% aq. MeOH, n-butanol, 및 water 분획층을 얻었다. 이 4가지 용매분획에 대한 MMP 억제활성을 측정하였으며 측정한 결과 85% aq. MeOH 분획층이 zymography와 RT-PCR 실험에서 MMP-2와 -9에 대해 가장 강한 억제효과를 나타내었다. 이상의 결과는 만형자 추출물이 암전이 억제제 개발을 위한 좋은 원천이 될 수 있는 가능성이 있음을 제시한다.
남천(Nandina domestica) 열매를 물과 에탄올 추출 후 극성이 상이한 유기용매를 순차적으로 분획하여 각 추출물의 생리활성을 측정하였다. 폴리페놀은 EE(ethyl acetate fraction of ethanol extract)에서 922.22 mg/g이었으며, 플라보노이드는 EB(butanol fraction of ethanol extract)에서 282.49 mg/g을 함유하였다. WA(aqueous of water extract)와 EH(n-hexane fraction of ethanol extract)는 0.1 mg/mL에서 93% 이상의 전자공여활성을 나타내었으며, 분획물의 농도 증가에 따른 전자공여능의 유의적 차이는 없었다. SOD 유사활성은 1.0 mg/mL의 EA(aqueous of ethanol extract)에서 56.36%로 가장 우수하였으며, EH와 EC(chloroform fraction of ethanol extract)에서도 50% 이상의 활성을 나타내었다. 아질산염 소거는 pH 1.2의 EC에서 82.03%로 가장 높았다. Xanthine oxidase 저해율은 0.5 mg/mL에서 WE를 제외한 모든 분획물에서 90% 이상의 저해율을 나타내었으나, WE는 46.75%로 가장 우수한 tyrosinase 저해효과를 나타내었다. 이상의 결과 남천 열매 분획물은 다량의 폴리페놀과 플라보노이드를 함유하고 생리활성 효과가 우수하여 천연 항산화 제재 및 이를 이용한 의약품 개발 가능성을 지닌 약용 식물자원인 것으로 판단된다.
예비 실험 결과 항산화 효과가 있는 패모, 어성초, 쇠비름 그리고 들깨박의 75%ethanol 추출물을 얻고 이를 다시 chloroform, ethyl acetate, butanol 그리고 물 순으로 용리, 분획물을 얻고 이들과 함께 tocopherol, citric acid, ascorbic acid를 팜유와 돈지에 첨가, Rancimat으로 항산화 효과를 비교하였다. 쇠비름 추출물이 돈지에 대한 산화 억제 효과가 가장 높았으며(AI 1.41)모든 실험 식물 추출물의 ethyl acetate 분획불에서 가장 높은 항산화성을 보였고 synergist로서는 ascorbic acid가 우수하였고 ${\delta}-tocopherol$을 혼합시에도 효과가 상승하였다. 패모, 어성초, 쇠비름의 ethyl acetate 분획층과 ascorbic acid 200ppm씩을 팜유에 첨가하였을 때 antioxidative index(AI)는 각각 1.60, 1.53 그리고 1.47이었고 쇠비름과 들깨박 ethyl acetate 분획층과 ${\delta}-tocopherol$ 200ppm씩을 돈지에 첨가했을 때 AI는 각각 3.19 및 3.63으로 높은 항산화 효과를 보였다.
차조기의 30, 50, 70, 95% 에탄올 추출물과 물추출물의 식품 관련 미생물에 대한 항균 활성과 이들 추출물의 분획물에 대한 항균 활성을 살펴보았다. 본 실험에 사용한 차조기의 무기질은 Ca와 Mg 함량이 각각 595.75 mg%와 467.0 mg%으로 가장 많았다. 에탄올 혼합 추출물과 물추출물의 추출 수율은 에탄올 농도가 낮을수록 증가하여 95%에탄올 추출물은 9.3%, 70% 추출물은 16.5%, 50% 추출물은 18.9%, 30% 추출물은 19.4%, 물추출물(0%)에서는 20.8%이었다. 추출용매의 에탄올 농도가 낮아질수록 hexane 층으로 용출되어 나오는 성분은 감소하고 ethyl acetate 층 분획성분은 점차 증가하는 것으로 나타났다. 에탄올 추출물과 물 추출물의 항균력은 95%, 70%와 50% 에탄올 추출물이 Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis 및 Pseudomonas areuginosa에 대하여 clear zone을 나타내었다. 추출물을 단계별 계통 분획하여 얻은 분획물의 항균력 실험에서는 ethyl acetate층이 실험 대상 미생물 모두에 대하여 항균 활성을 나타내었으며 에탄올 혼합율이 낮을수록 즉, 30% 에탄올과 물추출물의 ethyl acetate분획물의 저해환이 가장 크게 나타났다. 물 추출물의 ethyl acetate 분획물을 첨가한 액체배양에서 500 ppm의 농도에서는 S. aureus, B. subtilis와 P. aeruginosa에 대하여 대조구의 뚜렷한 증가와 대조적으로 낮은 생균수를 보였으며, 1,000 ppm의 농도에서는 실험 균주 모두에 대하여 배양 24시간 내내 생육이 저해되는 것으로 나타났다. 물 추출과 에탄올 추출의 농도와 항균 활성, 폴리페놀 함량 및 플라보노이드 함량이 비례적인 상관관계에 있는 것으로 나타나지는 않으나 30% 에탄올 추출물과 물 추출물의 ethyl acetate분획물이 폴리페놀 함량이 높고 항균력이 가장 강한 것으로 나타났다.
난대성 상록활엽수종의 자원화 및 식품 소재화 탐색을 목적으로 구실잣밤나무(Castanopsis cuspidata var. sieboldii $N_{AKAI}$) 열매(구실잣밤) 추출물의 수율, pH, 당도, 색도, 구성당, 유기산 함량, 페놀 함량 및 항산화활성을 검정하였다. 각 용매에 대한 추출물의 수율은 물 추출물에서 3.6%로 가장 높았고, pH는 6.43의 중성값을 보였으며, 당도는 3.17 $^{\circ}Brix$를 나타내었다. 색도 중 L값은 83.07, a값은 1.49 그리고 b값은 10.48을 나타내었다. 구성당의 조성 및 함량은 fructose 27.11 mg%, glucose 26.29 mg%, galactose 0.86 mg%로 나타났다. 유기산은 총 5종이 동정되었으며, oxalic acid(59.44%), formic acid (23.99%), malic acid (11.24%), citric acid (3.34%), succinic acid (1.99%) 순으로 나타났다. 총 페놀 함량은 물 추출물에서 27.69 mg% 수준으로 가장 높았고, DPPH radical-scavenging 활성은 대조구인 $\alpha$-tocopherol ($SC_{50}\;12.47{\mu}g/mL$)에 비해 낮은 수준이었으나 EtOAc 추출물($SC_{50}\;74.88{\mu}g/mL$)에서 가장 강한 활성을 보였다. 이와 같은 결과를 바탕으로 구실잣밤은 다양한 식품소재 및 기능성 소재로서의 활용성이 기대되었으며, 또 도토리의 대용 및 병용이 가능한 소재로서 실용화 가능성이 확인되었다.
In this study, we investigated the anticancer activity of the fin of Thunnus Thynnus (TT). TT was extracted with methanol (TTM), and then further fractionated into four subfractions by using solvent partition method, affording hexane (TTMH), methanol (TTMM), butanol (TTMB) and aquous (TTMA) soluble fractions. We determined the cytotoxicity of these four fractions in four kind of cancer cell lines, such as HepG2, MCF-7, B16-F10 and HT29 by MTT assay. The TTMM showed the strongest cytotoxic effect at the concentration of 150 ${\mu}g/mL$, displaying 95% on the HepG2 cell lines and 82% on MCF-7 cell line. The morphological changes such as membrane shirinking and blebbing of cells were also observed by TTMM treatment in HT29 cell. In addition, we observed that quinone reductase (QR) activity was elevated by only TTMM and TTMH treatments in HepG2 cell. QR activity was increased to around 2.0 and 1.8 times in TTMM and TTMH treated HepG2 cell at 100 ${\mu}g/mL$, respectively, compared to that in control. Although further studies are needed, the present work could suggest that the fin of TT has a potential to be usable as a chemopreventive agent against cancer.
In order to find antiviral compounds against Herpes simplex virus type I (HSV-1) and II (HSV2) from natural products, a convenient virus-induced cytopathic effect (CPE) inhibition assay was introduced. More than 300 fractions were prepared by solvent fractionation from sixty collected plants or purchased herbal medicines, and their anti-herpetic activities were evaluated. Among them, several medicinal plants showed potent anti-herpetic activity. Selective indexes (SI) of the EtOAc extract of Caraganae Radix (Caragana sinica) against HSV-1 and HSV-2 were more than 8.06 and 24.79, SI of the MeOH extract of Acer okamotoanum leaves were 3.92 and 3.51, SI of the $CH_{2}Cl_{2}$ extract of Veratri Rhizoma et Radix (Veratrum patulum) were 5.49 and 1.31 and SI of the MeOH extract of aerial part of Osmundae Rhizoma (Osmunda japonica) were more than 3.45 and 1.25, respectively.
Lim, Hee-Kyoung;Yoo, Eun-Sook;Moon, Jeong-Yong;Jeon, You-Jin;Cho, So-Mi K.
Food Science and Biotechnology
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제15권2호
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pp.312-316
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2006
Crude extract of young dangyuja (Citrus grandis Osbeck) fruit was investigated for its antioxidant activity as measured by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity. Among the samples, including 4 Citrus species and various solvent-extracted-fractions of young dangyuja fruit, the water-extracted fraction (WF) and butanol-extracted fraction (BF) showed the greatest DPPH free radical scavenging activity. WF and BF were further examined for their antioxidant activities by three different in vitro assays. The cell viability tests using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reduction assay showed that both fractions significantly reduced $H_2O_2$-induced cytotoxicity in HepG2 cells dose-dependently. Generation of the reactive oxygen species (ROS) was also reduced in cells pretreated with both fractions. In addition, BF showed a higher level of lipid peroxidation inhibitory capacity than WF in $H_2O_2$-treated HepG2 cells. Taken together, these results indicate that young dangyuja fruit can be used as an easily accessible source of natural antioxidants.
This study was conducted in an effort to evaluate the antimicrobial activity and antibiotic-resistant gene regulation from Saliva miltiorrhiza Bunge on methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). A variety of solvent fractions and methanol extracts of S. miltiorrhiza Bunge were tested in order to determine its antimicrobial activities against S. aureus and MRSA. As a result, the hexane fraction of S. miltiorrhiza Bunge evidenced the highest levels of antimicrobial activity against S. aureus and MRSA. The MICs of the hexane fraction against various MRSA specimens were $64. The hexane fraction evidenced inhibitory effects superior to those of the chloroform fraction. The results showed inhibition zones of hexane (16 mm) and chloroform (14 mm) fractions against MRSA KCCM 40511 at $1,000{\mu}g/disc$. The hexane and chloroform fractions inhibited the expression of the resistant genes, mecA, mecR1, and femA in mRNA. Moreover, the results of Western blotting assays indicated that the hexane and chloroform fractions inhibited the expression of the resistant protein, PBP2a. These results reveal that the hexane and chloroform fractions of S. miltiorrhiza Bunge may prove to be a valuable choice for studies targeted toward the development of new antimicrobial agents.
The in vitro antimicrobial potential of the unexplored Moringa oleifera seed coat (SC) was evaluated against some Gram-positive and Gram-negative bacteria and yeast pathogens. Antimicrobial studies with various solvent extracts indicated ethyl acetate to be the best extractant, which was used for the rest of the antimicrobial studies as it tested neither toxic nor mutagenic. Gram-positive bacteria including a methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strain were more susceptible with a minimum inhibitory concentration (MIC) range of 0.03-0.04 mg/ml. The antimicrobial pharmacodynamics of the extract exhibited both concentration-dependent and time-dependent killing. Most of the test organisms exhibited a short post antibiotic effect (PAE) except Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, and Klebsiella pneumoniae 1, which exhibited longer PAEs. Amongst the major phytoconstituents established, flavonoids, diterpenes, triterpenes and cardiac glycosides exhibited inhibitory properties against most of the test organisms. The identified active phytochemicals of the M. oleifera seed coat exhibited antimicrobial potential against a wide range of medically important pathogens including the multidrug-resistant bugs. Hence, the M. oleifera seed coat, which is usually regarded as an agri-residue, could be a source of potential candidates for the development of drugs or drug leads of broad spectrum that includes multidrug-resistant bugs, which are one of the greatest concerns of the $21^{st}$ century.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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