To develop effective skin whitening agents, we tested natural herbal extracts for their melanogenic inhibitory activities. Sedum samentosum was selected for its inhibitory effect on melanogenesis in B16 melanoma cells. Ethanolic extract of S. samentosum (SSE) was evaluated for antioxidative effect and tyrosinase inhibitory activity of melanogenesis. We investigated the changes in protein level and mRNA level of tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2 by using western blotting and RT-PCR, respectively. SSE showed scavenging activities of free radicals and reactive oxygen species (ROS) with the $IC_{50}$ of 342.7 $\mug/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and 64.69 $\mug/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. SSE treatment suppressed the biosynthesis of melanin up to 46% and reduced tyrosinase activity up to 51% at 100 $\mug/ml$ in B16 melanoma cells. The tyrosinase activity and tyrosinase expression in B16 melanoma cells were reduced in a dose-dependent manner by SSE. Also, SSE was able to significantly inhibit tyrosinase and TRP-1 expression in mRNA level. These results suggest that SSE inhibited melanin production which may be dependent on tyrosinase activity and expression in B16 melanoma cells, and an effective whitening agent for the skin.
In this study, we evaluated the whitening activity of prethanol A and water extracts from Abeliophyllum distichum Nakai. The extracts were prepared using 0, 50, 70, and 100% prethanol A at $121^{\circ}C$, 1.2 atm for 15 minutes. To confirm effective extraction, the acteoside content of each extract was analyzed with the HPLC-PDA method. The antioxidant activity was evaluated using DPPH and ABTS scavenging activity assays, and the whitening activity was evaluated based on inhibitory activities on the protein and mRNA expression of tyrosinase, tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), tyrosinase-related protein 2 (TRP-2), and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) in B16 F10 cells. Each extract showed strong antioxidant and whitening activity. $IC_{50}$ values of antioxidant activity from each extract were in order of 100%, 70%, 50%, and 0%. In addition, whitening activity inhibited the protein and mRNA expression of melanin synthesis factor, following the same pattern as antioxidant activity. In conclusion, water and prethanol A extracts of A. distichum showed effective antioxidant and whitening activity and are thus considered to be valuable materials for whitening cosmetics. The results of this study will also provide basic data for the safe and efficient production of A. distichum as a cosmetic material.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2022.09a
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pp.104-104
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2022
Dendropanax morbiferus H. Lev has been reported to have some pharmacologic activities and also interested in functional cosmetics. We found that the water extract of D. morbiferus leaves significantly inhibited tyrosinase activity and melanin formation in α-melanocyte stimulating hormone (MSH)-induced B16-F10 cells. D. morbiferus reduced melanogenesis-related protein levels, such as microphthalmia? associated transcription factor (MITF), TRP-1, and TRP-2, without any cytotoxicity. Two active ingredients of D. morbiferus, (10E)-9,16-dihydroxyoctadeca-10,17-dien-12,14-diynoate (DMW-1) and (10E)-(?)-10,17-octadecadiene-12,14-diyne-1,9,16-triol (DMW-2) were identified by testing the anti-melanogenic effects and then by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) analysis. DMW-1 and DMW-2 significantly inhibited melanogenesis by the suppression of protein kinase A (PKA)/cyclic AMP (cAMP)-responsive binding protein (CREB) and p38 MAPK phosphorylation. DMW-1 showed a better inhibitory effect than DMW-2 in α-MSH-induced B16-F10 cells. D. morbiferus and its active component DMW-1 inhibited melanogenesis through the downregulation of cAMP, p-PKA/CREB, p-p38, MITF, TRP-1, TRP-2, and tyrosinase. These results indicate that D. morbiferus and DMW-1 may be useful ingredients for cosmetics and therapeutic agents for skin hyperpigmentation disorders.
The intention of this study was to confirm the possible use of an ethanol extracts of Nelumbinis Rhizomatis Nodus (NRN) as a cosmetic material. To this end, we extracted NRN with 70% ethanol and performed biological activity evaluation of whitening efficacy and wrinkle reduction. We performed cellular tyrosinase inhibition and melanin contents assay to check the whitening activity of NRN and carried out a toxicity evaluation of NRN via an MTT assay and the amounts of associated proteins that affect melanin production in a melanoma cell line (B16F10). And collagenase inhibitory assay was performed for the evaluation of anti-wrinkle of samples. In addition, a toxicity evaluation using an MTT assay and matrix metalloprotease (MMP-1) and procollagen synthesis inhibition by NRN were evaluated in a fibroblast cell line (CCD-986sk). Western blot results for the whitening activity evaluation revealed that the levels of two proteins related to melanin production, tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase-related protein-2 (TRP-2), were decreased in a dose-dependent manner. Moreover, collagenase inhibition activity at a concentration of $500{\mu}g/ml$ NRN by measuring epigallocatechin-3-gallate (EGCG) was increased by more than 80% compared to the control group. Meanwhile, procollagen synthesis was reduced by 68.8% in the UVB-induced CCD- 986sk cells group whereas collagen synthesis recovered by 80.2% with $25{\mu}g/ml$ NRN. The MMP-1 expression rate showed 20.2% reduction at $25{\mu}g/ml$. The results of the experiments verified the whitening and wrinkle suppression effects of NRN and confirmed that it could be used as a safe natural cosmetic material in the future.
Kim, Yoon Suk;Lee, Young Hwa;Lee, Jin Young;Yi, Yong sub
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.41
no.4
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pp.383-389
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2015
In this study, we investigated the inhibitory effect on melanin synthesis of Ginkgo biloba seed oil. The results showed 9.96% inhibitory effect scavenging activity on DPPH and showed a value of 1.33 mM of $FeSO_4$ at a concentration of 0.06% in DMSO by using FRAP assay. G. biloba seed oil inhibited tyrosinase activity up tp 37.72% and suppressed the biosynthesis melanin up to 48.02% at 0.06% in B16/F10 mouse melanoma cell. In G. biloba seed oil treated group tyrosinase, TRP-1, TRP-2 and MITF gen expression levels significantly decreased compared to the contral group at a concentration of 0.04% and 0.06%. In conclusion, these results indicated that G. biloba seed oil extract have a good antimelanogenetic effects.
The objective of the present study was to evaluate the skin whitening effect of the extracts, Lycii fructus (LF), Dry-L. foilum (DLF) and Fresh-L. folium (FLF). Tyrosinase inhibition activities was 44% in DLF ethanol extracts at a $500{\mu}g/mL$. When the tyrosinase activities in B16F10 murine melanoma cell were tested, the activities in DLF ethanol extracts was 14% at a $50{\mu}g/mL$ concentration. The protein expression of microphthalmia-associated transcription factor, tyrosinase related protein 1 (TRP-1), TRP-2, and tyrosinase, which are all melanin related factors, showed that LF, DLF and FLF extracts inhibited the protein bio-synthesis in B16F10 melanoma cell. Especially the DLF extract showed greater decrease of protein expressions. Results indicate that the DLF extract tested in the present study had skin whitening activity and can be used as a function a ingredients for food and cosmetic compositions.
Lee, Hyun Myung;Lee, Sung Ok;Moon, Eunjung;Do, Moon Ho;Kim, Sun Yeou
Natural Product Sciences
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v.20
no.1
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pp.33-38
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2014
In recent times, the demand for edible medication for the treatment of hyperpigmentation has increased significantly. Therefore, the discovery of a stable, safe and inexpansive antimelanogenic component from natural substances, such as grains, is of particular interest. The levels and activities of some metabolites and/or enzymes can be increased. In the present study, we investigated the antimelanogenic effects of water-soluble extracts from barley (BE), malt (ME) and germinated barley (GBE) in melan-a cells. The inhibitory effects of ME and GBE on melanin production were significantly greater than that of BE. Interestingly, the content of ferulic acid, the proposed active component of barley, was also higher in ME and GBE than in BE by HPLC analysis. Western blot analysis of the expression of melanogenic enzymes in melan-a cells treated with BE, ME or GBE indicated the expression of both tyrosinase and tyrosinase-related protein 2 (TRP-2) significantly decreased after treatment with BE, ME or GBE. These results suggest that besides BE, ME and GBE also inhibit melanin production most likely through suppression of tyrosinase and TRP-2 expression. ME and GBE were more efficacious at inhibiting melanin production than BE was and may also represent potential skin-whitening agents.
Sphingolipid metabolites regulate many aspects of cell proliferation, differentiation, and apoptosis. In the present study, we have assessed the effects of the novel phytosphingosine derivative, N-acetylphytospingosine (NAPS), on the depigmentation of murine B16F10 melanoma cells, and have also attempted to identify the possible signaling pathway involved, in comparison with $C_{2}-ceramide$. NAPS and $C_{2}-ceramide$ both inhibited the growth of the B16F10 cells in a dose-dependent manner. Melanin content and tyrosinase activity were significantly reduced in response to treatment with NAPS and $C_{2}-ceramide$ at concentrations in a range between $1-5\;{\mu}M$. However, the levels of tyrosinase mRNA, as well as the levels of tyrosinase related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase related protein-2 (TRP-2) genes and the level of tyrosinase protein remained unaffected by treatment with either NAPS or $C_{2}-ceramide$. We also attempted to determine the signaling pathway exploited by NAPS and $C_{2}-ceramide$. Interestingly, the phosphorylation of Akt/PKB at serine 473 by NAPS was reduced at the 5 minute mark, whereas $C_{2}-ceramide$ induced the phosphorylation of Akt/PKB at serine 473. Finally, Akt/PKB activity in the NAPS-treated cells was elevated in comparison with the untreated cells. LY294002, a specific PI3-K inhibitor which is located upstream of Akt/PKB, inhibited the phosphorylation of Akt/PKB, but induced an increase in melanin synthesis. These results suggest that the activation of Akt/PKB at serine 473 is related with the suppression of melanin production in the B16F10 mouse melanoma cells. Therefore, the mechanisms exploited by NAPS and $C_{2}-ceramide$ responsible for the depigmentation of B16F10 cells were concluded to involve the inhibition of melanosomal tyrosinase activity.
Hah, Young-Sool;Kim, Eun-Ji;Goo, Young Min;Kil, Young Sook;Sin, Seung Mi;Kim, Sang Gon;Kang, Ha Eun;Yoon, Tae-Jin
Journal of Life Science
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v.32
no.5
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pp.355-361
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2022
Melanin pigments are the main cause of skin color. They are produced in melanocytes and then transferred to keratinocytes, which eventually gives the skin surface a variety of colors. Although many skin-lightening or depigmenting agents have been developed, the demand for materials to reduce pig- mentation is still increasing. Here, we tried to find materials for skin-lightening or depigmentation using natural compounds and found that mistletoe (Viscum album var. coloratum) extracts (ME) had an inhibitory effect on tyrosinase activity. As a result, ME significantly reduced pigmentation in human primary melanocytes. In addition, a promoter reporter assay revealed that ME inhibited the transcription of microphthalmia-associated transcription factor (MITF), melanophilin (MLPH), tyrosinase-related protein-2 (TRP-2), and tyrosinase (TYR) genes in HM3KO melanoma cells. In addition, ME decreased the protein level for pigmentation-related molecules, such as TYR and TRP-1. Furthermore, it markedly inhibited the melanogenesis of zebrafish embryos, an in vivo evaluation model for pigmentation. To elucidate the action mechanism of ME, we investigated its effects on intracellular signaling. Eventually, the ME dramatically decreased the phosphorylation of the cAMP responsive element binding protein (CREB), AKT, and ERK. The data suggest that ME may inhibit the melanogenesis pathway by regulating the signaling pathway related to pigmentation. Taken together, these data propose that ME can be developed as a depigmenting or skin-lightening agent.
Hair graying is processed by loss of melanin production caused by the decrease of activity and number of melanocyte and the accumulation of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) in the hair follicle with increase of age. The purpose of this study was to investigate the effect the Black oryzasativa ethanolic extract (BLEE) on the melanin production. In this study BLEE at $8{\mu}g/ml$ or more showed a significant 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity and reduction power. BLEE at $16{\mu}g/ml$ or more showed promoted tyrosinase activity and melanin production. In addition BLEE scavenged intracellular $H_2O_2$ in 2',7'-dichlorodihydrofluorescein (DCF) fluorescence assay in B16F1 cells. However, Western blot analyses displayed that BLEE decreased the expression level of catalase, but no effect on the expression level of tyrosinase, tyrosinase associated protein-1 (TRP-1), tyrosinase associated protein-2 (TRP-2) and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) transcription factor involved in melanogenesis. Thus, the promotive effect of BLEE on melanin production is attributed to the increase of tyrosinase activity and the reduction of intracellular $H_2O_2$ level. In conclusion, BLEE played a key role in in promoting melanin production, which suggests that the BLEE could be applied as a potential functional material in the development of hair care cosmetics related to the promotion of melanin production for the growth of black hair.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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