Objectve : Okadaic acid is a specific inhibitor of serine/threonine protein phosphatase 1 and 2A. In order to know the mechanism of apoptosis induced by okadaic acid, we treated FRTL-5 thyroid cells with okadaic acid and measured the changes of important proteins that are involved in apoptosis. Materials and Methods: We measured caspase 3 activity, $PLC-{\gamma}1$ degradation, the expression of XIAP, cIAP1, cIAP2, and cytochrome c release in okadaic acid-treated FRTL-5 thyroid cells. Results: Okadaic acid-induced caspase 3 activation and $PLC-{\gamma}1$ degradation and apoptosis were dose-dependent with a maximal effect at a concentration of 80 nmol and time-dependent with a maximal effect at 24 hours after treatment. The elevated caspase 3 activity in okadaic acid treated FRTL-5 thyroid cells are correlated with down-regulation of XIAP and cIAP1, but not cIAP2. General and potent inhibitor of caspases, z-VAD-fmk. abolished okadaic acid-induced caspase 3 activity and $PLC-{\gamma}1$ degradation. The release of cytochrome c in okadaic acid-induced FRTL-5 thyroid cells was dose-dependent with a maximal effect at a concentration of 80 nmol. Conclusions: These findings suggest that mechanism of okadaic acid-induced apoptosis is associated with cytochrome c release and increase of caspase 3 activation in FRTL-5 thyroid cells.
As a novel approach for disease control and prevention, nutritional modulation of the intestinal health has been proved. However, It is still unknown whether branched-chain amino acid (BCAA) is needed to maintain intestinal immune-related function. The objective of this study was to determine whether BCAA supplementation in protein restricted diet affects growth performance, intestinal barrier function and modulates post-weaning gut disorders. One hundred and eight weaned piglets ($7.96{\pm}0.26kg$) were randomly fed one of the three diets including a control diet (21% crude protein [CP], CON), a protein restricted diet (17% CP, PR) and a BCAA diet (BCAA supplementation in the PR diet) for 14 d. The growth performance, plasma amino acid concentrations, small intestinal morphology and intestinal immunoglobulins were tested. First, average daily gain (ADG) (p<0.05) and average daily feed intake (ADFI) (p<0.05) of weaned pigs in PR group were lower, while gain:feed ratio was lower than the CON group (p<0.05). Compared with PR group, BCAA group improved ADG (p<0.05), ADFI (p<0.05) and feed:gain ratio (p<0.05) of piglets. The growth performance data between CON and BCAA groups was not different (p>0.05). The PR and BCAA treatments had a higher (p<0.05) plasma concentration of methionine and threonine than the CON treatment. The level of some essential and functional amino acids (such as arginine, phenylalanine, histidine, glutamine etc.) in plasma of the PR group was lower (p<0.05) than that of the CON group. Compared with CON group, BCAA supplementation significantly increased BCAA concentrations (p<0.01) and decreased urea concentration (p<0.01) in pig plasma indicating that the efficiency of dietary nitrogen utilization was increased. Compared with CON group, the small intestine of piglets fed PR diet showed villous atrophy, increasing of intra-epithelial lymphocytes (IELs) number (p<0.05) and declining of the immunoglobulin concentration, including jejunal immunoglobulin A (IgA) (p = 0.04), secreted IgA (sIgA) (p = 0.03) and immunoglobulin M (p = 0.08), and ileal IgA (p = 0.01) and immunoglobulin G (p = 0.08). The BCAA supplementation increased villous height in the duodenum (p<0.01), reversed the trend of an increasing IELs number. Notably, BCAA supplementation increased levels of jejunal and ileal immunoglobulin mentioned above. In conclusion, BCAA supplementation to protein restricted diet improved intestinal immune defense function by protecting villous morphology and by increasing levels of intestinal immunoglobulins in weaned piglets. Our finding has the important implication that BCAA may be used to reduce the negative effects of a protein restricted diet on growth performance and intestinal immunity in weaned piglets.
Two experiments were conducted to determine the effects of different dietary lysine levels on the apparent nutrient digestibility, the serum amino acid (AA) concentration, and the biochemical parameters of the precaval and portal vein blood in growing pigs. In Experiment 1, 15 noncannulated pigs received diets with different lysine densities (0.65%, 0.95%, and 1.25% lysine) for 13 d. A total collection digestion test was performed, and blood samples were collected from the precaval vein at the end of the experiment. In Experiment 2, four cannulated pigs were fed the same diets of Experiment 1. The experiment used a self-control experimental design and was divided into three periods. On d 5 of each period, at 0.5 h before feeding and hourly up to 8 h after feeding, single blood samples were collected from catheters placed in the portal vein. In Experiment 1, some serum AAs (including lysine), serum urinary nitrogen (SUN), and total protein (TP) concentrations were significantly affected by the dietary lysine levels (p<0.05). Moreover, the 0.65% lysine treatment showed a significant lower apparent digestibility of gross energy, dry matter, crude protein, and phosphorus than the other treatments (p<0.05). In Experiment 2, serum lysine, histidine, phenylalanine, threonine, valine, isoleucine (p = 0.0588), triglyceride, and SUN (p = 0.0572) concentrations were significantly affected by the dietary lysine levels (p<0.05). Additionally, almost all of the determined serum AA and total AA concentrations reached their lowest values at 0.5 h before feeding and their highest values at 2 h after feeding (p<0.05). These findings indicate that the greatest absorption of AA occurred at 2 h after feeding and that the dynamic profile of serum AA is affected by the dietary lysine levels. Moreover, when the dietary lysine content was 0.95%, the growing pigs achieved a better nutrient digestibility and serum metabolites levels.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.1
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pp.96-101
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2013
This study was carried out to investigate the changes in antioxidant activity, and the isoflavone and free amino acid content in fermented tofu of the ingredients of kimchi (red pepper, garlic, ginger, and anchovies) and lactic acid bacteria (Pediococcus acidilactici KL-6) during 24 weeks of fermentation at $20^{\circ}C$. The total polyphenol content of various types of fermented tofu such as the control (tofu with kimchi ingredients mixture), tofu and kimchi ingredients with lactic acid bacteria (TL), and tofu in pre-fermented kimchi ingredients with lactic acid bacteria (TPL) ranged from 156.34 to 165.17 mg/g, showing that TPL was significantly higher in terms of fermentation time (6 weeks) compared to others. The DPPH free radical scavenging activity of TPL (84.11%) was higher than that of the control (76.68%) and TL (78.95%) after 12 weeks fermentation at $20^{\circ}C$. The changes of nitrite scavenging activity and SOD-like activity in the tested tofu showed the same tendency as the DPPH free radical scavenging activity during 14 weeks fermentation TPL showed statistically significant levels of increased antioxidant activity, so we compared the isoflavone and free amino acid content. The isoflavone and free amino acid content of TPL was 2.34 mg/g and 20.81 mg/g after 14 weeks fermentation, respectively.
In order to investigate the proper processing of food wastes with miraculous soil-microorganisms (MS) for final use of swine feeds, calory, amino acid and fatty acid in food wastes were determined in relation with fermentation process with MS microorganism complex. Aflatoxin test was also performed to check safety of the fermented food wastes. Calory of food wastes was determined in average $7.60\;Kcal{\cdot}g^{-1}\;D.W.$ In finally processed food wastes, total content of amino acid was $93.0\;mg{\cdot}g^{-1}]\;D.W$, showing 18.5% of increase by the anaerobic fermentation. Essential and non-essential amino acids were measured at respectively 34.43 and $58.56\;mg{\cdot}g^{-1}\;D.W.$ Leucine, phenylalanine, isoleucine and threonine of essential amino acids and proline and glutamic acid of non-essential amino acids were highly composed as compared to others. The composition of fatty acid in food wastes was also increased by anaerobic fermentation for 3 weeks. Palmitic acid, oleic acid and palmitoleic acid were more important in quantity. Present results indicate that food wastes properly processed with MS have enough calory and are safe from aflatoxin, and that anaerobic fermentation with MS microorganism in an efficient process for hydrolyzing protein and lipids in food wastes.
Mideoduck drips were mixed with amino acids (Met, Tau, Gly, Ala, Thr, Cys), thiamine and sugars (Glucose, Ribose) for flavor modification and evaluation using the Maillard reaction. To mask the seafood flavor, onions, spring onions, garlic, ginger, citric orange and green tea were mixed with Mideoduck drips at $160^{\circ}C$ for 2.5 hr in a stainless still reaction bomb. The glucose/thiamine model reaction system was estimated to be lower than the ribose/thiamine model system, and an extreme case is the ribose/Met model system. Mixed system of glucose, ribose and taurine containing sulfur compounds showed fair results. Among the Mideoduck drips mixed with sugars and amino groups, only thiamine model systems were estimated to be normal. The flavor composition of Mideoduck drips/sugars model system, and long chain fatty acids were composed of 31.32~62.71% total flavor content. The 1,2-benzenedicarboxylic acid dibutylester contents made up more than 20% of the model system in groups A, B and C. From the model system in this study, drip/glucose, drip/ribose, drip/glucose/citric orange, and drip/glucose/glycine/cystine groups showed most intense good flavor.
For centuries, dandelion(Taraxacum officinale) is widely used as a food and a medicinal herb. However, there is inadequate documented information on the chemical composition of T. officinale consumed in korea. This study was attempted to analyze proximate component, amino acid, free sugar, mineral and fatty acid composition in T. officinale to establish the value as an useful food material. Moisture, ash, crude protein and fat contents in leaf are 7.85, 11.35 21.6 and 5.12%, respectively. Moisture and ash contents of root were 7.73 and 4.82%. Crude protein and fat contents of root were 11.8 and 1.73%, respectively. The major free amino acid was asparagine, arginine, serine and proline etc. The total contents of free amino acid in leaf and root were 1476.98 and 2710.06 mg%, respectively. The major free sugar in T. officinale was glucose, fructose, sucrose and maltose. Sucrose was also detected in a large amount. The major fatty acid of T. officinale are palmitic acid, stearic acid, oleic acid, linoeic acid and linolenic acid. The fatty acid compositions of leaf and root were different each other. Linolenic acid(63.6%) was the major fatty acid of the leaf and linoleic acid(56.4%) was the major fatty acid of the root. Most of mineral contents were high in leaf and root. Especially K content was higher in leaf than root.
Nitrogenous extractives and amino acids were analyzed with the dorsal muscle from wild and cultured bastard(Paralichthys olivaceus), and flounder (Pleuronichthys cornutus). Cultured bastard was higher in moisture content, and lower in crude lipid and protein content than those of wild one. Contents of free amino acids from wild and cultured bastard, flounder were 305.03mg/100g, 253.42mg/100g, and 340.10mg/100g, respectively. The profile of free amino acids in these samples was very similar, although there were a relatively difference in glycine, threonine, proline contents. Content of IMP in wild bastard (408.31mg/100g) and cultured one (356.26mg/100g) were higher than that of flounder (178.61mg/100g). Wild bastard contained higher trimeth-ylamine oxide and total creatinine than cultured one. Total amino acid contents of dorsal muscle from wild and cultured bastard, and flounder were 21.94g/100g, 20.12g/100g, and 17.63g/100g, respectively. The major amino acids of these samples were glutamic acid, aspartic acid, leucine and isoleucine.
Koh, Eun Mi;Lee, Eun Kyeong;Song, Chi Hun;Song, Jeongah;Chung, Hae Young;Chae, Chang Hoon;Jung, Kyung Jin
Toxicological Research
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v.34
no.4
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pp.333-341
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2018
Ferulate is a phenolic compound abundant in wheat germ and bran and has been investigated for its beneficial activities. The aim of the present study is to evaluate the efficacy of ferulate against the oxidative stress-induced imbalance of protein tyrosine kinases (PTKs), protein tyrosine phosphatases (PTPs), and serine/threonine protein phosphatase 2A (PP2A), in connection with our previous finding that oxidative stress-induced imbalance of PTKs and PTPs is linked with proinflammatory nuclear factor-kappa B $(NF-{\kappa}B)$ activation. To test the effects of ferulate on this process, we utilized two oxidative stress-induced inflammatory models. First, YPEN-1 cells were pretreated with ferulate for 1 hr prior to the administration of 2,2'-Azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH). Second, 20-month-old Sprague-Dawley rats were fed ferulate for 10 days. After ferulate treatment, the activities of PTKs, PTPs, and PP2A were measured because these proteins either directly or indirectly promote $NF-{\kappa}B$ activation. Our results revealed that in YPEN-1 cells, ferulate effectively suppressed AAPH-induced increases in reactive oxygen species (ROS) and $NF-{\kappa}B$ activity, as well as AAPH-induced PTK activation. Furthermore, ferulate also inhibited AAPH-induced PTP and PP2A inactivation. In the aged kidney model, ferulate suppressed aging-induced activation of PTKs and ameliorated aging-induced inactivation of PTPs and PP2A. Thus, herein we demonstrated that ferulate could modulate PTK/PTP balance against oxidative stress-induced inactivation of PTPs and PP2A, which is closely linked with $NF-{\kappa}B$ activation. Based on these results, the ability of ferulate to modulate oxidative stress-related inflammatory processes is established, which suggests that this compound could act as a novel therapeutic agent.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.11
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pp.1647-1653
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2010
Glycosaminoglycan (GAG) was purified from polysaccharide extracted from sea hare muscle on DEAE-Sepharose column and investigated for the functional groups, distribution of sugars, composition of disaccharide and structure of GAG. Purified GAG was composed of disaccharide above 55% of total sugar. Purified GAG showed amide I peak in 1648/cm and C-O stretch peak as properties of carbohydrate, amino acid peak in 1457/cm, and peak in 866/cm as properties of monosaccharide by FT-IR. Fucose, N-acetylgalactosamine, N-acetylglucosamine, glucose, galactose, mannose and xylose were found in MALDI-TOF MS/MS spectra of hydrolysates by chondroitin sulfate ABC lyase and heparanase I. Purified GAG was expected to be heparan sulfate including N-acetylgalactosamine and N-acetylglucosamine above 70% of total sugar. The structure of GAG was supposed as GlyUA(2S)-GlcNS and GlyUA-GlcNS(6S) with O-linkage on protein core.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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