IgA is the predominant immunoglobulin isotype in mucosal secretions(1). It has been reported that a population of Peyer's patch T cells can selectively induce IgM bearing B cells to switch to surface IgA bearing B cells(2,3). Further, IL-4, IL-5, and IL-6 alone and in combination, can significantly influence murine IgA B cell differentiation in vitro(4-7). However, it remains an open question which cytokines have a major role in class switching to the IgA isotype. Recently, it has been reported that transforming growth factor .betha.1(TGF .betha.1) alone, or in combination with IL-2 increases IgA secretion by LPS-activated surface IgA negative (sIgA$\^$-/) murine spleen B cells while concurrently downregulating IgM and IgG secretion by such cells(8-11). In the present study, limiting dilution analysis was used to demonstrate, at the clonal level, that TGF .betha.1 has siginificant activity as an IgA isotype switch factor.
Mice were fed semi-purified diets containing 0, 2, 10 and 25 ppm(mg/kg) deoxynivalenol over 8 weeks and were assessed for effects on bodyweight gain, serum immunolglobulin levels and surface immunoglobulin bearing lymphocyte ratio. 1. The rate of body-weight gain was significantly reduced (p<0.05) at the 10 and 25 ppm of DON, whereas the mice ingesting the diet containing 2 ppm DON was not. 2. IgA in serum immunolglobulin was significantly increased (P<0.05) at the 10 and 25 ppm of DON, but IgG, IgM were decreased, whereas exposure to 2 ppm DON was not change. 3. Concentration of IgA from Peyer's patch of mice fed DON exhibited increased at 10, 25 ppm. 4. Lymphocytes surface marker studies revealed that IgA, IgG and IgM were 2.2%, 0.4% and 1.5% respectively. These results suggest that dietary exposure to DON alters regulation of IgA production
단일클론항체 AP64 IgM은 인간의 급성 비임파성 골수암(ANLL) 세포주 HL60에 결합하며 쥐의 ANLL 세포에도 교차결합(cross-react)한다. 또한 complement에 의해 매개되어지면 골수암 억제효과를 나타낸다. 본 연구에서는 RT-PCR에 의해 AP64 IgM을 분비하는 하이브리도마의 $V_H$ 및 $V_L$ cDNA로부터 유래된 재조합 single-chain variable domain fragment (ScFv)를 제조하였다. $V_H$ 및 $V_L$은 15개 아미노산으로 구성된 linker $(G_4S)_3$으로 연결되었다. 재조합 ScFv는 Escherichia coli BMH 71-18에서 single polypeptide chain으로 발현되었다. Periplasmic extract를 $Ni^+$-NTA-agarose affinity column에 가하여 발현된 재조합 ScFv를 정제하였으며 westernblot으로 정제된 단백질을 탐지하였다. 정제된 재조합 ScFv는 AP64 IgM 모항체가 탐지하는 항원과 같은 HL60 세포의 표면항원(약 30 kDa)을 인지하였다. 그러나 HL60의 표면항원에 대한 ScFv의 결합력은 AP64 IgM 모항체보다 낮아서 추후 이에 대한 개선이 필요하다. 종합하여 볼 때 HL60 세포주에 특이적인 재조합 ScFv는 진단 또는 치료목적으로 유용한 생물학적 제재가 될 수 있을 것이다.
ln the present work to determine effect of a Streptococcus pneumoniae conjugate vaccine, S.pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was ex amined. This JY-Pol contained approximately 92% and 6% carbohydrate and protein, respectively. Gel electrophoresis revealed the presence of the surface protein in the JY-Pol. By the double immunodiffusion and isotyping ELISA analyses, administration of JY-Pol that was adsorbed to alum adjuvant (JY-Pol/Alum) into mice induced IgM, IgG, and IgA specific for the S.pneumoniae capsule. The ATCC capsular polysaccharide adsorbed to alum (ATCC-Pol/Alum) provoked only IgM in mice. In survival tests, mice that were immunized with the JY-Pol/Alum before intravenous challenge with live S.pneumoniae survived entire period of 46 day-observation, whereas all mice that received ATCC-Pol/Alum or only diluent instead of the vaccination died within 5 and 12 days, respectively. Results from footpad-edema test showed that JY-Pol/Alum formula provoked the cellular immunity as determined by swelling of the mouse footpad. These data indicate that the naturally conjugated JY- Pol enhances resistance of mice against disseminated pneumococcal disease due to S.pneumoniae by both humoral and cellular immune responses.
The antigen location of Cryptosporidium parvum, which stimulates antibody formation in humans and animals, was investigated using infected human sera. Immuno-electron microscopy revealed that antigenicity-inducing humoral immunity was located at various developmental stages of parasites, including asexual, sexual stages, and oocysts. The amount of antigen-stimulating IgG antibodies was particularly high on the oocyst wall. The sporozoite surface was shown to give stimulation on IgG and IgM antibody formation. Trophozoites implicated the lowest antigenicity to humoral immunity, both IgG and IgM, by showing the least amount of gold labeling. Immunogold labeling also provided clues that antigens were presented to the host-cell cytoplasm via feeder organelles and host-parasite junctions.
광섬유 소산파 센서(fiber-optic evanescent wave sensor)를 제작하였다. 클래드층을 제거한 광섬유 코아 표면에 anti-mouse immunoglobulin G(IgG)를 결합시키고, 형광이 표지된 mouse IgG와의 반응을 직접적인 방법과 경쟁적인 방법을 통하여 측정하였다. 직접적인 방법과 경쟁적인 방법 모두 $1{\mu}g/m{\ell}$이하의 mouse IgG를 측정할 수 있는 감도를 얻을 수 있었다. Anti-mouse IgG는 단순 흡착 방법에 의하여 광섬유 코아 표면의 93.9%에 고정되었고 비특이적 결합반응을 제거하기 위하여 실시한 소혈청 알부민(bovine serum albumin : BSA)을 이용한 표면 코팅 효과는 없었다. Mouse IgG에 결합된 fluorescein의 비율이 높을수록 형광 발생량이 많았으나 관계는 직선적이지 않았다. 본 연구에서 제작된 광섬유 소산파 센서는 $1{\mu}g/m{\ell}$ 이하의 항원 항체 반응을 소산파 여기에 의한 형광량으로 측정할 수 있어 면역센서로의 응용이 가능할 것으로 판단된다.
AIDS 환자의 치명적인 2차 감염을 유발하는 Cryptosporidium parvum 의 Infective stage 인 sporozoites의 단일군 항체를 분리하였다. Oocysts를 효소처리하여 sporozoites를 excystation시킨 후 Isopycnic percoll gradients를 이용하여 sporozoites를 순수분리한 후 단일군 항체 생산을 위한 항원으로 사용하였다. 두 달된 BALB/c 쥐를 immunize한 후 splenocytes와 P3-X63-Ag8 myeloma cells를 융합시킨 후 hybridoma 기술을 이용해 Kor1(IgGl), Ea2(Ig2a) 두 clones을 분리하였으며 정제된 sporozoites를 SDS-PAGE로 분리한 후 Western blot을 이용하여 단일군 항체 Kor1과 Ea2는 20,000 daltons 크기의 항원을 인식하였다. Immunofluorescent assay에서 단일군 항체가 sporozoites 표면에 반응하는 것으로 보아 20-kDa 단백질 항원은 sporozoites 표면에 위치하는 항원으로 밝혀졌으며 C. parvum에 감염되었을 때 항체생성에 관여하는 중요 항원 중 하나일 것으로 추정되었다.
목 적 : 소아 신증후군에서 알부민을 비롯한 단백들과 IgG 치의 감소가 관찰된다. 신증후군에서 관찰되는 IgG 감소에서 IgG 아군간에 차이가 있는 지와 B형 간염 및 홍역 항체의 양성률이 대조군과 차이가 있는지를 알아보았다. 방 법 : 가톨릭대학교 대전성모병원 소아과에 신증후군으로 입원하였던 21명과 같은 연령대의 건강한 환아 25명을 대상으로, 혈청에서 IgG, IgM, IgA, IgE 및 IgG subclasses(IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4), B형 간염 표면 항체(anti-hepatitis B suface IgG, anti-HBs IgG) 및 항홍역 IgG 항체(anti-measles IgG)를 측정하였다. 결 과 : 신증후군 환아들의 평균 연령 $6.9{\pm}3.0$세로, 면역글로불린 평균값은 IgG $390{\pm}187\;mg/dL$, IgG1 $287{\pm}120\;mg/dL$를 보였다. 대조군의 평균 연령은 $7.5{\pm}3.4$세로, IgG $1,025{\pm}284\;mg/dL$, IgG1 $785{\pm}19\;mg/dL$이었다. IgE 값에서 250 IU/mL 이상을 보인 경우는 신증후군에서 11명(52.4$\%$), 대조군에서 7명(28$\%$)이 있었다(.P=0.01). 신증후군 환아에서 IgG 및 IgG 아군 모두에서 유의한 감소를 보였으며(P<0.001), IgM 값은 증가($251{\pm}183\;mg/dL\;vs.\;153{\pm}55\;mg/dL$, P=0.02)를 보였으나 IgA 값은 차이를 보이지 않았다. 한편 Anti-HBs의 양성률은 신증후군 환아군에서 42.9$\%$(21명 중 9명), 대조군에서 52$\%$ (13/25명)를, 항홍역 항체 양성률은 각각 76$\%$ (16/21명)와 92$\%$ (23/25명)를 보였으나 통계학적으로 두 군간에 차이는 없었다. 결 론 : 소아 신증후군 환아에서 IgG 및 모든 IgG 아군의 감소를 보였다. 예방접종에 의한 B형 간염 및 홍역 항체 양성률의 감소가 관찰되었으나 통계학적인 차이는 보이지 않았다. IgG 감소의 기전에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 보인다.
Khanaliha, Khadijeh;Motazedian, Mohammad Hossein;Kazemi, Bahram;Shahriari, Bahador;Bandehpour, Mojgan;Sharifniya, Zarin
Parasites, Hosts and Diseases
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제52권2호
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pp.137-142
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2014
Serologic tests are widely accepted for diagnosing Toxoplasma gondii but purification and standardization of antigen needs to be improved. Recently, surface tachyzoite and bradyzoite antigens have become more attractive for this purpose. In this study, diagnostic usefulness of 3 recombinant antigens (SAG1, SAG2, and SAG3) were evaluated, and their efficacy was compared with the available commercial ELISA. The recombinant plasmids were transformed to JM109 strain of Escherichia coli, and the recombinants were expressed and purified. Recombinant SAG1, SAG2, and SAG3 antigens were evaluated using different groups of sera in an ELISA system, and the results were compared to those of a commercial IgG and IgM ELISA kit. The sensitivity and specificity of recombinant surface antigens for detection of anti-Toxoplasma IgG in comparison with commercially available ELISA were as follows: SAG1 (93.6% and 92.9%), SAG2 (100.0% and 89.4%), and SAG3 (95.4% and 91.2%), respectively. A high degree of agreement (96.9%) was observed between recombinant SAG2 and commercial ELISA in terms of detecting IgG anti-Toxoplasma antibodies. P22 had the best performance in detecting anti-Toxoplasma IgM in comparison with the other 2 recombinant antigens. Recombinant SAG1, SAG2, and SAG3 could all be used for diagnosis of IgG-specific antibodies against T. gondii.
Achyranthes japonica Nakai (AJN) water extract has a variety of physiological properties, including anti-diabetic, anti-cancer, anti-inflammatory, anti-microbial, and anti-oxidative activities. In the present study, the inhibitory effects of AJN extract were investigated in high affinity immunoglobulin E receptor ($Fc{\varepsilon}RI$)-mediated KU812F cells activation. AJN extract showed suppressive effects on histamine release and intracellular calcium [$Ca^{2+}$]i elevation from anti$Fc{\varepsilon}RI$ antibody (CRA-1)-stimulated cells in a dose-dependent manner. Flow cytometric analysis showed that AJN extract treatment caused a dose-dependent decrease in the cell surface $Fc{\varepsilon}RI$ expression and the binding between the cell surface $Fc{\varepsilon}RI$ and the IgE antibody. Moreover, reverse transcription-polymerase chain reaction analysis showed that levels of the mRNA for the $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$ chain was decreased by treatment with AJN extract. These results indicate that AJN extract may exert anti-allergic effects via the inhibition of calcium influx and histamine release, which occurs as a result from the downregulation of the binding of IgE antibody to cell surface $Fc{\varepsilon}RI$. This mechanism may occur through $Fc{\varepsilon}RI$ expression inhibition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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