국내산 곡류의 에탄올 및 메탄올 추출물로부터 콜레스테롤 생합성계에서 가장 중요한 율속효소로 알려져 있는 HMG-CoA reductase 저해활성을 검색하였다. HMG-CoA reductase activity 측정용 효소원은 cholestyramin을 급여하여 사육 한 후 밤 12시경에 간율 적출하여 얻어진 microsome을 freeze-thaw방법으로 조제하였고 효소활성은 spectrophotometric assay로 측정하였다. 그 결과 각 시료 추출물을 $100{\;}{\mu}g/assay$ 되게 첨가한 경우 HMG-CoA reductase 억제활성은 에탄올 추출물에서는 수수가 가장 높은 활성을 보였고 다음은 흑임자였으며 나머지는 활성이 미미하거나 전혀 없는 것으로 나타났다. 메탄올 추출물에서는 기장이 가장 높은 활성을 나타내었고 다음은 수수였으며 그 다음은 메밀, 흑미의 순으로 나타났다. 또한 추출물에서 높은 억제활성을 나타내었던 수수와 기장 메탄올 추출물을 각종 용매로 분획하여 활성을 검토한 결과 수수와 기장 모두 헥산 획분에서 가장 높은 활성을 나타내었다.
Objective: The present investigation was aimed to explore the potential of lactobacilli for conjugated linoleic acid (CLA) production, isolated from rumen fluid samples of lactating goats. Methods: A total of 64 isolates of lactobacilli were obtained using deMan-Rogosa-Sharpe (MRS) agar from rumen fluid of goats and further subjected to morphological and biochemical characterizations. Isolates found as gram-positive, catalase negative rods were presumptively identified as Lactobacillus species and further confirmed by genus specific polymerase chain reaction (PCR). The phylogenetic tree was constructed from the nucleotide sequences using MEGA6. Results: Out of the 64 isolates, 23 isolates were observed positive for CLA production by linoleate isomerase gene-based amplification and quantitatively by UV-spectrophotometric assay for the conversion of linoleic acid to CLA as well as gas chromatography-based assay. In all Lactobacillus species cis9, trans11 isomer was observed as the most predominant CLA isomer. These positive isolates were identified by 16S rRNA gene-based PCR sequencing and identified to be different species of L. ingluviei (2), L.salivarius (2), L. curvatus (15), and L. sakei (4). Conclusion: The findings of the present study concluded that lactic acid bacteria isolated from ruminal fluid samples of goat have the potential to produce bioactive CLA and may be applied as a direct fed microbial to enhance the nutraceutical value of animal food products.
Objectives : Ligustri Fructus has been used since ancient times as a medicinal usages in folk medicines against antitumor purpose. Many biological active constituents have been identified from this biomass such as several terpenoids and lignans. In current study, the properties of antioxidant and anti-diabetic complications using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)($ABTS^+$) radicals scavenging, and advanced glycation end products (AGEs) inhibition assays were evaluated by different extraction methods of Ligustri Fructus. Methods : In present continuing research for development of bioactive natural ingredients, antioxidant and AGEs formation inhibitory capacities of Ligustri Fructus extracts using different organic solvents were prepared and the biological potentials were investigated using in vitro bioassays. Antioxidant properties were evaluated employing radical scavenging assays using DPPH and $ABTS^+$ radicals. In addition, the anti-diabetic complications effects of Ligustri Fructus extracts were tested via AGEs formation inhibitory assay. The total phenolic contents were determined using a spectrophotometric method. Results : All the tested extracts exhibited dose-dependent radical scavenging and AGEs formation inhibitory activities. Among the tested samples, hot water extract of Ligustri Fructus was showed the most potent activity with $IC_{50}$ value of $494.8{\pm}6.7{\mu}g/m{\ell}$ against DPPH radical scavenging assay. Also, $ABTS^+$ radical scavenging activity of hot water extract was higher than those of other extracts. In addition, AGEs formation inhibitory effects of each extacts and total phenolic contents were evaluated. Conclusions : These results suggested that Ligustri Fructus can be considered as a new effective source of natural antioxidant and anti-diabetic complications resources.
Objectives : The heartwood of Sappan Lignum has been used since ancient times as an ingredient in folk medicines against anti-bacterial and anti-anemia purposes. Many bioactive constituents have been derived from this biomass such as chalcones and homoisoflavonoids. In the current investigation, the antioxidant and anti-diabetic properties using DPPH and $ABTS^+$ radicals scavenging, ${\alpha}-glucosidase$, and advanced glycation end products (AGEs) inhibition assays were evaluated by different extraction methods of Sappan Lignum. Methods : In our continuing investigation for bioactive natural ingredients, the antioxidant and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory properties of Sappan Lignum extracts were prepared from different extraction methods and the biological efficacies were investigated in vitro. The antioxidant properties were evaluated employing radical scavenging assays using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) ($ABTS^+$) radicals. In addition, the anti-diabetic effects of Sappan Lignum extracts were tested via ${\alpha}-glucosidase$ and AGEs formation inhibitory assay. The total phenolic contents were determined using a spectrophotometric method. Results : All the tested samples showed dose-dependent radical scavenging and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities. Among the tested extracts, the 80% methanolic extract of Sappan Lignum was showed the most potent activity with an $IC_{50}$ value of $82.3{\pm}1.7{\mu}g/m{\ell}$ against DPPH radical scavenging assay. While, $ABTS^+$ radical scavenging activity of 80% methanolic extract was higher than those of other extracts. Also, ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory and AGEs formation effects of each extacts and total phenolic contents were evaluated. Conclusions : These results suggested that Sappan Lignum can be considered as a new effective source of natural antioxidant and anti-diabetic materials.
The study aim was to investigate the antihypertensive effect after oral supplementation of dried radish leaves powder (DRLP). Angiotensin-converting enzyme (ACE) activity was measured by spectrophotometric assay. The systolic blood pressure (SBP) was measured in spontaneously hypertensive (SHR) and normotensive rats (Wistar) by the tail cuff method after a 4-week diet with DRLP at the level of 2.5% or 5%. The supplementation of DRLP decreased SBP of SHR although the 5% supplementation level did not show any more pronounced effect than the 2.5% level did. The decrease in the SBP observed for both 2.5% and 5% DRLP was accompanied by significant increases of the urinary Na and K excretion. The DRLP supplementation showed a potent ACE-inhibitory activity in pulmonary tissue from both hypertensive and normotensive rats. However, the DRLP supplementation did not affect the SBP in normotensive rats. These results indicated that DRLP exerted an antihypertensive effect in SHR due to the decreased ACE activity and increased urinary Na excretion.
화이트 클로버의 배축, 잎, 미숙배 유래의 embryogenic callus에 식물 binary vector인 pBI121을 포함하는 A. tumefaciens LBA4404를 접종하여 효과적으로 화이트 클로버를 형질전환시켰다. A. tumefaciens를 이용한 화이트 클로버의 형질전환은 acetosyringone을 사용함으로써 품종간의 차이가 없이 배발생 캘러스에서 16-19%를 보였다. 재분화 식물체의 PCR 및 Northern 분서글 통하여 형질 전환된 화이트 클로버의 염색체내에 GUS 유전자가 안정되게 도입되었고 식물체내에서 mRAN로 발현됨을 확인하였다. 또한, GUS 유전자가 식물체내에서 단백질로 발현됨을 확인하기 위하여 형질 전환되어진 화이트 클로버부터 단백질을 추출하고 분광분석법에 의하여 GUS의 활성을 측정하였으며, 시료간에 약간의 차이는 있으나 유의적인 GUS 활성을 확인하였다.
$Capparis$$zeylanica$ Linn. a 'Rasayana' drug is used for its memory enhancing effects in the traditional Ayurvedic system of medicine. The aim of this study was to evaluate acetylcholinesterase (AChE) inhibitory and memory enhancing activities of $Capparis$$zeylanica$ Linn. The$in-vitro$ and $ex-vivo$ models of AChE inhibitory activity were used along with Morris water maze test to study the effect on memory in rats. The anticholinesterase effect of methanolic and aqueous extracts of $Capparis$$zeylanica$ was measured by spectrophotometric Ellman method at 0.1, 0.3, 1.0, 3.0, 10 and 30 mg/ml and brain monoamine oxidase (MAO-A and MAO-B) activity was assessed by Naoi's method. The results $in-vitro$ and $ex-vivo$ AChE assay revealed that methanolic and aqueous extracts of $Capparis$$zeylanica$ inhibit AChE activity, whereas these extracts did not alter MAO activity at any concentration tested as compared to moclobemide and L-deprenyl. The results indicate that $Capparis$$zeylanica$ improves scopolamine-induced memory deficits through inhibition of AChE activity, and not by direct MAO inhibition.
Amanlou, Massoud;Khosravian, Peghah;Souri, Effat;Dadrass, Orkideh Ghorban;Dinarvand, Rasoul;Alimorad, Mohammad Massoud;Akbari, Hamid
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제28권2호
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pp.183-187
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2007
A simple and sensitive extractive spectrophotometric method has been described for the determination of buprenorphine either in raw material or in pharmaceutical formulations. The developed method is based on the formation of a colored ion-pair complex (1 : 1 drug/dye) of buprenorphine and bromocresol green (BCG) in buffer pH 3 and extracting in chloroform. The extracted complex shows absorbance maxima at 415 nm. Beer's law is obeyed in the concentration range of 1.32-100.81 μ g mL-1. The proposed method has been applied successfully for the determination of drug in commercial sublingual tablets and injectable dosage form. No significant interference was observed from the excipients commonly used as pharmaceutical aids with the assay procedure.
To study the health promoting effects of medicinal plants, 30 medicinal plants commonly available in Korea have been evaluated for their antioxidant compounds and antioxidant and antiproliferative activities. Total polyphenolics and flavonoids in the methanolic extracts were measured by spectrophotometric methods and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activities and chelating effects have been determined for antioxidant activities. Moreover, the effects of medicinal plants on cell proliferation of intestinal (Caco-2) and pituitary (GH3) tumor cells were investigated using thiazolyl blue terazolium bromide (MIT) assay. The methanolic extracts of Pueraria thunbergiana and Artemisiae asiatria contained the highest total polyphenolic and flavonoid contents, respectively. P. thunbergiana exhibited the highest antioxidant activities. A. asiatria showed the strongest antiproliferative activity against Caco-2 and Ponciruc trifoliata Rafin and Lophathrum gracile Bronghiart exhibited the highest activities against GH3. Although there was positive correlation between ABTS radical scavenging activity and polyphenolic contents ($R^2=8189$), no relationship was found between antiproliferative and antioxidant activities.
Reactive oxygen species are produced under diabetic conditions and possibly cause various forms of tissue damage in patients with diabetes mellitus. The aim of this study was to examine the effects of high glucose on the alloxan-induced beta cell injury. The insulinoma (RINm5F) cells were clutured either with high glucose (22.2 mM) or normoglucose (5.6 mM) in RPMI 1460 media for 3 days. The SOD activities were determined by spectrophotometric assay and nitroblue tetrazolium (NBT) stain. The effects of high glucose on the cytotoxicity of alloxan were also investigated in RINm5F cells and the cells viability were determined by 3-(4,5-dimethylthiazolyl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) methods. Results showed that the CuZn-SOD activity was decreased but Mn-SOD activity was increased significantly in RINm5F cells cultured with high glucose (22.2 mM) media. The cytotoxicity of alloxan was increased by high glucose compared with normoglucose in RINm5F cells. Diethyl-dithiocarbarmate (DDC), as inhibitor of CuZn-SOC, also potentiate the alloxan-induced cytotoxocity in RINm5F cells. These results suggest that, in RINm5F cells, short term culture with high glucose media decreases Cu-Zn-SOD activity and the decreased activity of CuZn-SOD many one of the causative factors of beta-cell injury induced by high glucose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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