The effects of estrogen and androgens on Vg gene expression were examined in primary hepatocyte culture and livers of the immature male trout. Specific primers of Vg cDNA were designed with already reported Vg gene nucleotide sequences. PCR product was sequenced and verified with Vg cDNA of rainbow trout. Total RNA was extracted from the cultured hepatocytes and livers of steroid-treated rainbow trout and then it was analyzed by reverse transcriptase- polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis. The Vg mRNA and Vg protein synthesis were increased in rainbow trout in vivo and in vitro with E$_2$ and methyltestosterone (MT) There were dose and time-related effects of E$_2$ and MT on vitellogesis. Androgens such as progesterone androsterone and testosterone also stimulated Vg mRNA expression in vitro. The results show that androgens as well as E$_2$ can induce expression of Vg mRNA in trout in vivo and in vitro.
Yan, Sheng;Yim, Lok Yan;Lu, Liwei;Lau, Chak Sing;Chan, Vera Sau-Fong
IMMUNE NETWORK
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v.14
no.3
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pp.138-148
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2014
MicroRNAs (miRNAs) are endogenous small RNA molecules best known for their function in post-transcriptional gene regulation. Immunologically, miRNA regulates the differentiation and function of immune cells and its malfunction contributes to the development of various autoimmune diseases including systemic lupus erythematosus (SLE). Over the last decade, accumulating researches provide evidence for the connection between dysregulated miRNA network and autoimmunity. Interruption of miRNA biogenesis machinery contributes to the abnormal T and B cell development and particularly a reduced suppressive function of regulatory T cells, leading to systemic autoimmune diseases. Additionally, multiple factors under autoimmune conditions interfere with miRNA generation via key miRNA processing enzymes, thus further skewing the miRNA expression profile. Indeed, several independent miRNA profiling studies reported significant differences between SLE patients and healthy controls. Despite the lack of a consistent expression pattern on individual dysregulated miRNAs in SLE among these studies, the aberrant expression of distinct groups of miRNAs causes overlapping functional outcomes including perturbed type I interferon signalling cascade, DNA hypomethylation and hyperactivation of T and B cells. The impact of specific miRNA-mediated regulation on function of major immune cells in lupus is also discussed. Although research on the clinical application of miRNAs is still immature, through an integrated approach with advances in next generation sequencing, novel tools in bioinformatics database analysis and new in vitro and in vivo models for functional evaluation, the diagnostic and therapeutic potentials of miRNAs may bring to fruition in the future.
Breast cancer is one of the leading causes of cancer in women all over the world and accounts for ~25% of newly observed cancers in women. Epigenetic modifications influence differential expression of genes through non-coding RNA and play a crucial role in cancer regulation. In the present study, epigenetic regulation of gene expression by in-silico analysis of histone modifications using chromatin immunoprecipitation sequencing (ChIP-Seq) has been carried out. Histone modification data of H3K4me3 from one normal-like and four breast cancer cell lines were used to predict miRNA expression at the promoter level. Predicted miRNA promoters (based on ChIP-Seq) were used as a probe to identify gene targets. Five triple-negative breast cancer (TNBC)-specific miRNAs (miR153-1, miR4767, miR4487, miR6720, and miR-LET7I) were identified and corresponding 13 gene targets were predicted. Eight miRNA promoter peaks were predicted to be differentially expressed in at least three breast cancer cell lines (miR4512, miR6791, miR330, miR3180-3, miR6080, miR5787, miR6733, and miR3613). A total of 44 gene targets were identified based on the 3'-untranslated regions of downregulated mRNA genes that contain putative binding targets to these eight miRNAs. These include 17 and 15 genes in luminal-A type and TNBC respectively, that have been reported to be associated with breast cancer regulation. Of the remaining 12 genes, seven (A4GALT, C2ORF74, HRCT1, ZC4H2, ZNF512, ZNF655, and ZNF608) show similar relative expression profiles in large patient samples and other breast cancer cell lines thereby giving insight into predicted role of H3K4me3 mediated gene regulation via the miRNA-mRNA axis.
Tissue-specific transcription is critical for normal development, and abnormalities causing undesirable gene expression may lead to diseases such as cancer. Such highly organized transcription is controlled by enhancers with specific DNA sequences recognized by transcription factors. Enhancers are associated with chromatin modifications that are distinct epigenetic features in a tissue-specific manner. Recently, super-enhancers comprising enhancer clusters co-occupied by lineage-specific factors have been identified in diverse cell types such as adipocytes, hair follicle stem cells, and mammary epithelial cells. In addition, noncoding RNAs, named eRNAs, are synthesized at super-enhancer regions before their target genes are transcribed. Many functional studies revealed that super-enhancers and eRNAs are essential for the regulation of tissue-specific gene expression. In this review, we summarize recent findings concerning enhancer function in tissue-specific gene regulation and cancer development.
The coat protein gene of Korean isolate of Ricer stripe virus (RSV-Kr) was cloned and its nucleotide sequence was determined. Total RNA was extracted from infected leaves and RSV viral RNA was detected by using RT-PCR with specific primer of coat protein gene. The result of RT-PCR showed a specific band. Purified RT-PCR products of coat protein gene were ligated into the pGEM-T Easy plasmid vector and cloned cDNA was obtained for nucleotide sequence determination. Coat protein gene of RSV-Kr consisted of 969 bp long encoding a protein of 322 amino acids. RSV-Kr showed 94%-99% sequence identities to that of Japanese- and Chinese isolates.
Nuclear bodies are subnuclear, spheroidal, and membraneless compartments that concentrate specific proteins and/or RNAs. They serve as sites of biogenesis, storage, and sequestration of specific RNAs, proteins, or ribonucleoprotein complexes. Recent studies reveal that a subset of nuclear bodies in various eukaryotic organisms is constructed using architectural long noncoding RNAs (arcRNAs). Here, we describe the unifying mechanistic principles of the construction and function of these bodies, especially focusing on liquid-liquid phase separation induced by architectural molecules that form multiple weakly adhesive interactions. We also discuss three possible advantages of using arcRNAs rather than architectural proteins to build the bodies: position-specificity, rapidity, and economy in sequestering nucleic acid-binding proteins. Moreover, we introduce two recently devised methods to discover novel arcRNA-constructed bodies; one that focuses on the RNase-sensitivity of these bodies, and another that focuses on "semi-extractability" of arcRNAs.
There is no reliable indicator available for the diagnosis of horse laminitis, although the disease is common and costly. This study was performed to develop a specific diagnostic biomarker for laminitis. We have identified 33 differentially expressed proteins in plasma of a horse suffering laminitis that is experimentally induced by an overdose of oligofructose, in comparison with normal horse plasma. Among the proteins, myosin-9 mRNA was found in RNA sequencing analysis to be expressed specifically in laminitis tissues compared to other horse tissues. It is thus suggested that expression of plasma myosin-9 may be used for the diagnosis of equine laminitis.
microRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that regulate gene expression by targeting the 3'-untranslated region of multiple target genes. Pathogenesis results from defects in several gene sets; therefore, disease progression could be prevented using miRNAs targeting multiple genes. Moreover, recent studies suggest that miRNAs reflect the stage of the specific disease, such as carcinogenesis. Cystic diseases, including polycystic kidney disease, polycystic liver disease, pancreatic cystic disease, and ovarian cystic disease, have common processes of cyst formation in the specific organ. Specifically, epithelial cells initiate abnormal cell proliferation and apoptosis as a result of alterations to key genes. Cysts are caused by fluid accumulation in the lumen. However, the molecular mechanisms underlying cyst formation and progression remain unclear. This review aims to introduce the key miRNAs related to cyst formation, and we suggest that miRNAs could be useful biomarkers and potential therapeutic targets in several cystic diseases.
Functional interpretation of noncoding genetic variants associated with complex human diseases and traits remains a challenge. In an effort to enhance our understanding of common germline variants associated with lung cancer, we categorize regulatory elements based on eight major cell types of human lung tissue. Our results show that 21.68% of lung cancer-associated risk variants are linked to noncoding regulatory elements, nearly half of which are cell type-specific. Integrative analysis of high-resolution long-range chromatin interactome maps and single-cell RNA-sequencing data of lung tumors uncovers number of putative target genes of these variants and functionally relevant cell types, which display a potential biological link to cancer susceptibility. The present study greatly expands the scope of functional annotation of lung cancer-associated genetic risk factors and dictates probable cell types involved in lung carcinogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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