• Title/Summary/Keyword: skin vivo and vitro

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Assessment of Inactivation for Salmonella spp. on Chicken Meat using Confocal Laser Microscopy and Flow Cytometry (공초점 현미경 및 유세포 분류기를 이용한 계육에서의 Salmonella균 불활성화 평가)

  • Jang, Keum-Il;Chung, Duck-Hwa;Ha, Sang-Do;Kim, Keun-Sung;Lee, Kyu-Ho;Kim, Min-Gon;Kim, Cheorl-Ho;Kim, Kwang-Yup
    • Korean Journal of Food Science and Technology
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    • v.38 no.2
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    • pp.290-294
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    • 2006
  • Inactivation rates of Salmonella enteritidis in vitro and in vivo were assessed using confocal microscopy and flow cytometry. S. enteritidis was inactivated with 1% (w/v) trisodium phosphate (TSP) and live cells, and inactive cells were distinguished by staining with fluorescent probe, LIVE/DEAD BacLight Bacteria Viability stain. After TSP treatment for 1 min, most of Salmonella cells changed from green (live cells) fluorescence to red (inactive cells) fluorescence, indication of effective sanitizing. Inactivation efficiency and contamination sites of S. enteritidis on chicken skin by TSP treatment were assessed using confocal laser microscopy. Precise flow cytometry histograms for viability changes of S. enteritidis. after TSP treatments were obtained. Efficiency of various sanitizer treatments on foodborne pathogens could be assessed using this method.

Recent Advances in Understanding the Mechanisms of Particulate Matter-mediated Ocular Diseases (미세먼지에 의한 안구질환 발병 연구 동향)

  • Lee, Hyesook;Choi, Yung Hyun
    • Journal of Life Science
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    • v.30 no.8
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    • pp.722-730
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    • 2020
  • As one of the most serious health risk factors, air pollution can no longer be ignored. Particulate matter (PM) is an important and harmful component of air pollution that originates from a variety of sources. Numerous recent studies have linked PM to a range of conditions including cancer, cardiovascular, respiratory, and skin disease. The eye, despite being directly exposed to air pollution, has been investigated in very few of these studies. In this review, we describe the evidence from in vitro and in vivo studies, as well as epidemiological investigations, that supports the association between exposure to PM and the development of ocular conditions such as surface and retinal disease and glaucoma. Based on the results of previous studies, we suggest that PM exposure can lead to oxidative stress, inflammation, autophagy, and, ultimately, ocular surface disease. Nevertheless, almost no studies focus on ocular surface damage from PM while some epidemiological and clinical studies report on the posterior of the eye. However, the underlying pathological mechanisms in the posterior following PM exposure have yet to be identified, and further studies are therefore warranted of the ocular surface as well as the posterior part of the eye.

Antimelanogenic Effect and Whitening of Anthocyanin Rich Fraction from Seeds of Liriope platyphylla (맥문동 종실 안토시아닌 분획물의 멜라닌 생성 억제 및 미백 효과)

  • Choung, Myoung Gun;Hwang, Young Sun;Kim, Gi Ppeum;Ahn, Kyung Geun;Shim, Hoon Seob;Hong, Seung Beom;Choi, Jae Hoo;Yu, Chang Yeon;Chung, Ill Min;Kim, Seung Hyun;Lim, Jung Dae
    • Korean Journal of Medicinal Crop Science
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    • v.21 no.5
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    • pp.361-371
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    • 2013
  • This study was performed to determine the antimelanogenic effect and tyrosinase inhibitory activities of anthocyanin rich fraction (AN-SLP) from Liriope platyphylla Wang et Tang seeds. Anthocyanins isolated from L. platyphylla seeds revealed the presence of four major anthocyanin components, which were tentatively identified as delphinidin-3-Oglucoside, delphinidin-3-O-rutinoside, petunidin-3-O-rutinoside, and malvidin-3-O-rutinoside using semipreparative HPLC, $^1H$-NMR, $^{13}C$ NMR, FAB-MS and LC/ES-MS. The inhibitory effect of AN-SLP on tyrosinase activity was studied using in vitro (against mushroom tyrosinase) and ex vivo (against B16 melanoma cell tyrosinase) models. Cellular tyrosinase activity was decreased by AN-SLP treatment in B 16 melanoma cells through dose dependent manner, but AN-SLP did not inhibit mushroom tyrosinase and L-DOPA oxidation directly. AN-SLP showed melanin inhibition by 53.2% at 50 ${\mu}g/m{\ell}$ which was 0.7 times more efficient than the antimelanogenic effect of commercial arbutin and kojic acid (36.5%) also did not show cell toxicity. Additionally, AN-SLP inhibited the activity of ${\alpha}$-glucosidase and the glycosylation of tyrosinase in melanoma cell. The resulting unsaturated glycosylation of tyrosinase makes it unstable and disturb correct transportation. From theses results, we conclude that AN-SLP could be used as anti-melanogenic agent for skin whitening.

Anti-oxidant Activities of Punica granatum Extracts (석류 추출물의 항산화 작용)

  • Roh, Bo-Kyung;Kim, Jee-Young;Kim, Ju-Yon
    • Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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    • v.31 no.2 s.51
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    • pp.207-212
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    • 2005
  • Pomegranate (Punica granatum L.) which is very rich in Polyphenols and tannins was recently reported its anti-oxidant activities and phytoestrogenic activities in vivo test and many clinical studies, but the effects of them on the skin have not been reported. The experiments were tarried out in vitro to determine anti-oxidant activities of pomegranate extracts on DPPH radical scavenging assay, NBT/Xanthine Oxidase-superoxide scavenging assay, silica-induced intracellular $H_2O_2$, hydroperoxide and superoxide generation assay in RAW 264.7 cells. It showed that the methanolic extract of dried pomegranate peels have the most significant anti-oxidant activities on free radical scavenging assay and inhibitory activities on silica-induced intracellular free radical generation in RAW 264.7 cells. The concentrated juice of pomegranate showed only DPPH radical scavenging activities and inhibited hyaluronidase activity. Moreover, pomegranate seed oil inhibited specially silica-induced intracellular hydroperoxide generation in RAW 264.7 cells. These results suggest that the methanolic extract of dried pomegranate peels and pomegranate seed oil have more anti-oxidant activity than concentrated juice of pomegranate. Thus the extracts of pomegranate peels and seed oil could be developed cosmetic ingredients for anti-aging.

Anti-inflammatory Effects of Illicium verum Hook. f. via Suppression of NFκB Pathway (NF-κB 억제를 통한 대회향(大茴香)의 항염증효능)

  • Keum, Soo Yeon;Park, Sang Mi;Jegal, Kyung Hwan;Hwangbo, Min;Cho, Il Je;Park, Chung A;Kim, Sang Chan;Jee, Seon Young
    • Herbal Formula Science
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    • v.24 no.4
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    • pp.243-257
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    • 2016
  • Objectives : Illicium verum Hook. f. has been known to possess antimicrobial, antioxidant, antifungal, anti-inflammatory, insecticidal, analgesic, sedative, convulsive activities, it has been rarely conducted to evaluate the immuno-biological activity. The present study was examined to evaluate the anti-inflammatory effects of the Illicium verum Hook. f. water extracts (IVE) in vivo and in vitro. Methods : Cell viability was measured by MTT assay. The relative levels of NO were measured with Griess reagent. iNOS, COX-2, $NF-{\kappa}B$ and target proteins were detected by immunoblot analysis, and levels of cytokines were analyzed by ELISA kit. Anti-edema effect was determined in the carrageenan (CA)-induced paw edema model in rats. Results : All dosages of IVE used in MTT assay had no significant cytotoxicity. The increases of NO production and iNOS expression were detected in LPS-treated cells compared with control. However, these increases were attenuated by treatment with IVE. Also, IVE reduced the elevated production of $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$ and IL-6 by LPS. IVE inhibited the $p-I{\kappa}B$ and translocation of $NF-{\kappa}B$ to nuclear. Furthermore, IVE significantly inhibited the increases of hind paw swelling, skin thicknesses and inflammatory cell infiltrations induced by CA injection. Therefore, IVE will be favorably inhibited the acute edematous inflammations. Conclusion : These results provide evidences that anti-inflammatory effect of IVE is partly due to the reduction of some inflammatory mediators by suppression of $NF-{\kappa}B$ pathway.

Effect of target cell nitric oxide synthesis on the sensitivity to lymphokine-activated killer cell cytotoxicity (표적세포의 Nitric oxide 합성이 LAK 세포의 세포독성에 대한 예민도에 미치는 영향)

  • Park, Sung Il;Park, Ju Hyung;Lee, Chi Kug;Kim, Shin Chae;Choi, Bo Geum;Kwak, Jae Yong;Yim, Chang Yeol
    • IMMUNE NETWORK
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    • v.1 no.2
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    • pp.162-169
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    • 2001
  • Background: Nitric oxide (NO), a cytotoxic molecule is produced in various tissues including tumor cells during interleukin-2 (IL-2) therapy . Lymphokine-activated killer (LAK) cells are induced during IL-2 therapy, and have cytotoxic activity against tumor cells. The current study investigated the effects of NO synthesized in target cells or exposure of target cells to NO on the sensitivity of target cells to LAK cell cytotoxicity. Methods: Cytotoxicity was measured using 4 h chromium release assays. LAK cells which were induced by a 4 day incubation of BALB/c mouse splenocytes with IL-2 (6,000 IU/mL) were employed as effector cells. RD-995 skin tumor cells originated from a C3H/HeN mouse were employed as target cells. NO synthesis in target cells was induced by a 24 h incubation of RD-995 cells with $IFN{\gamma}$ (25 U/mL), TNF (50 U/mL) and IL-1 (20 U/mL). S-nitrosyl acetylpenicillamine (SNAP), an NO donor, was used to expose target cells to NO. $N^G$-monomethyl-L-arginine (MLA) and carboxy-PTIO were added during cytotoxicity assays to inhibit NO synthesis, and to scavenge NO produced by target cells, respectively. Results: Sensitivity of NO-producing RD-995 cells to LAK cell cytotoxicity was decreased by addition of MLA and carboxy-PTIO during cytotoxicity assays. However, the two reagents had no effect on the sensitivity of non-NO-producing RD-995 cells. Pretreatment of RD-995 target cells with SNAP increased the sensitivity in comparison with untreated cells. Conclusions: Sensitivity of target cells to LAK cell cytotoxicity is increased by target cell NO synthesis or exposure to NO. Further studies are needed to evaluate whether these in vitro results have relevance to in vivo phenomena.

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식품과 알레르기: 유전자 재조합 식품의 알레르기 위험성

  • 손대열
    • Proceedings of the Korean Journal of Food and Nutrition Conference
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    • 2000.12a
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    • pp.29-34
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    • 2000
  • 산업 발달에 따라 날로 많은 식품들이 새롭게 개발되어지고 있다. 또한 이와 병행해서 식품으로 인한 알레르기 발생 빈도도 날로 증가하고 있으며 그 증상 또한 점차 심화되고 있는 것이 세계적인 추세이다. 우리나라도 예외는 아니어서 일반 알레르기 환자뿐 아니라 식품으로 인한 알레르기 환자들이 점차 증가됨이 보고되어지고 있다. 농산물 시장의 수입개방이후 우리나라에는 많은 해외 농산물이 수입되어지고 있으며 그 중 작년 한해의 경우 총 수입 농산물의 10%를 넘는 유전자 재조합 농산물이 우리나라에 수입되어진 것으로 통계 보고되어졌다. 이러한 관점에서 알레르기 환자의 증가와 새로운 식품 (특히 유전자 재조합 식품)의 증가에는 서로 관련성이 있을 것으로 추측되어지고 있어 (새로운) 식품에 대한 알레르기성의 예측과 관리가 필요한 실정이다. 이에 몇몇 발표된 유전자 재조합 식품에 관련된 알레르기성 검사 논문들과 실험실에서 이루어진 연구 결과들을 중심으로 유전자 재조합 식품의 알레르기 위험성에 대해 알아보고자 한다. 일반적으로 식품의 단백질이 알레르겐(allergen)으로 작용하기 위해서는 먼저 소화효소에 의해 분해되어지고 장에서 흡수되어져서 immunopotent cell에 의해 process 되어 immune system에 present 되어져야 한다. 따라서 단백질로 인한 알레르기 반응은 그 단백질의 자연적 형태 뿐만이 아니라 소화 효소에 분해된 단편들의 구조 또는 다른 알레르겐 단백질과의 유사 구조로 인한 교차 반응에 의해 발생함을 기억해야 한다. 식품 단백질 중 어떤 단백질이 알레르겐으로 작용하는가에 대한 특이성 조사에 많은 관심이 집중되어지고 있지만 아직까지는 대략 다섯 개 정도의 일반적인 특성으로서 요약되어질 수 있다. 그러나 이러한 대략의 특성에 적용되지 않는 식품 알레르겐도 많음을 잊어서는 안 될 것이다. 알레르겐으로 작용하는 식품 단백질의 일반적 특성 1. 좋은 수용성 2. 식품내에 많은 부분을 차지하는 주 단백질이 주 알레르겐으로 작용 3. 단백질내에 하나 이상의 IgE-binding site 존재 4. 위장액에 대한 저항성 5. 10~70 kDa 크기 유전자 재조합 기술이란 말 그대로 유전자를 인위적으로 새롭게 조합하는 기술로 이전의 기술로는 불가능했던 유전적 변형을 농작물과 동물에 가능하게 했으며 이로 인해 유전적으로 변형된 식용 동식물의 개발이 가능하게 되었다. 새로운 유전인자를 개체에 삽입함으로 새로운 단백질이 발현 될수 있고 그로 인해 1) 해충과 질병에 대한 저항성 증가, 2) 화학 제초제에 대한 새로운 저항성 부여, 3) 식품의 저장성 향상, 4) 식품의 영향적 보충/향상 등의 이점을 얻을 수 있다 (표 1). 세계적으로 유전자 재조합 된 새로운 농산물의 재배는 날로 증가추세에 있으며 그 중에서 가장 많은 부분을 차지하는 농산물로 soybean을 들 수 있으며 (표 2) soybean을 중심으로 그 알레르기성의 변화가 연구 조사된 몇 가지 예를 살펴보고자 한다. (표 3)에 요약된 soybean중 첫 번째 경우는 재초제에 대한 저항성을 높여주기 위해 Agrobacterium에 존재하는 EPSPS라는 단백질을 콩에서 발현하도록 찬 유전자 재조합 된 콩의 경우이다. 이 콩의 경우에는 첫째. 이전된 새로운 단백질 EPSPS가 다른 여러 식물에 이미 존재하고 있는 단백질로서 우리가 이미 이러한 식품을 섭취할 때 이 단백질도 같이 섭취해오고 있었다는 점, 둘째. 이 단백질이 소화액 분해 실험에서 짧은 시간내에 분해가 되었다는 점, 셋째. 재조합 된 콩과 자연 콩이 성분 분석에서 차이를 나타내지 않았다는 점, 네 번째. 쥐를 통한 다양섭취 실험에서 아무런 이상 반응이 없었다는 점등의 결과를 기준으로 알레르기에 대한 개별 검사 없이 안전한 콩으로 결론짓고 있다. 영양성을 높이기 위해 Brazil nut에서 methionine 함량이 풍부한 2s albumine을 콩에서 발현하도록 한 두 번째 유전자 재조합 콩의 경우 이전된 단백질 때문에 Brazil nut에 알레르기 반응을 일으키는 알레르기 환자들을 조사한 결과 역시 재조합 된 콩에도 알레르기 반응을 일으켰다는 보고이다. Brazil nut에서 콩으로 이전된 단백질이 Brazil nut에서의 알레르기성을 그대로 유지한 점을 볼 때 새로운 단백질이 어디에서 유래하는가가 중요함을 잘 보여준 연구이다 세 번째 콩의 경우 역시 영양성을 높여주기 위해 corn에서 10 kDa과 HSZ 단백질을 콩에서 발현하도록 유전자 재조합했는데 이 콩의 경우는 알레르기 환자들이 유전자 재조합 된 콩과 자연 콩에 반응의 차이를 나타내지 않았다는 결과 보고이다. 위의 세 실험 결과들을 종합해 볼 때 무엇보다도 새롭게 발현된 단백질이 원래 어떤 성질을 갖고 있으며 어디에서 유래했는지가 알레르기성 조사에 중요한 역할을 한다 할 수 있겠다. 또한 유전자 재조합된 식품들은 알레르기 환자들을 위해 표기되어져야 할 것인데 이를 위한 알레르기성 검사 실험은 공공단체를 통해 이루어져야 할 것이며 환자들마다 알레르겐으로 작용하는 단백질의 인식부위(epitope)가 다를 수 있기 때문에 적어도 10명 이상의 알레르기 환자들이 조사되어져서 검사가 이루어져야 할 것이다. 환자들의 혈청을 통한 in vitro 실험에서는 ELISA, RAST, immunoblotting과 같은 검사 방법들이 적용될 수 있고, 그 결과가 음성인 경우에 그 다음 단계로 in vivo 실험에서는 직접 환자의 피부반응검사 (skin prick test)나 DBPCFC (double-blind placebo-controlled food challenge) 검사 방법을 통해 확인되어져서 이 모든 경우가 음성인 경우와 하나라도 양성인 경우를 구별하여 식품에 표기함으로 알레르기 환자들의 유전자 재조합 식품에 대한 안전성이 보장되어져야 할 것이다.

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