Kim, Young-Hee;Ryoo, In-Ja;Choo, Soo-Jin;Xu, Guang-Hua;Lee, Sang-Ku;Seok, Soon-Ja;Bae, Ki-Hwan;Yoo, Ick-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권10호
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pp.1139-1141
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2009
Clitocybin D, a novel human neutrophil elastase inhibitor, was isolated from the culture broth of Clitocybe aurantiaca. This compound was purified by solvent extraction, silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, and preparative HPLC. The compound was determined to be 4-(4,6-dihydroxy-3-methoxy-3H-isoindol-1-yl)-benzoic acid on the basis of 1D and 2D NMRs and MS spectroscopic analysis. Analysis of the human neutrophil elastase (HNE) inhibitory activity of the isolated compound revealed that it showed significant HNE inhibitory activity with an $IC_{50}$ value of $17.8{\mu}M$.
During the screening for the antifungal compounds against Phytophthora capsici causing phytophthora blight of red pepper, we isolated a strong active compound, bafilomycin $C_1$, produced by strain 3D3. The producing organism was identified as Streptomyces sp. based on taxonomic studies. The antifungal compound was purified from culture broth by HP-20 column chromatography, ethylacetate extraction, silica gel column chromatography and HPLC, and was identified as bafilomycin $C_1$ by color reaction, UV and $^{1}H$-NMR spectral data analysis. Bafilomycin $C_1$ showed strong antifungal activity against various phytopathogenic fungi.
Bacillus sp. RH-5로 배양한 배양액을 silica gel column (8.0cmX100cm)chromatography를 행하여 chloroform : methanol = 90 : 10인 항산화 분획층을 얻어 TLC 법에 의해 활성이 있는 물질을 분리하여 thiocyanate method로 활성을 측정하여 본 결과 Vit. E($10^{-2}$ mol)보다 좋았으며 BHA, BHT와는 비슷한 결과를 나타내었다. 한편 $5_\muM$$CuSO_4$ 촉매 사람 Low Density Lipoprotein(LDL)의 산화에 항산화 활성이 알려진 Fraction 3의 band 4를 각각 100 및 200$\mu$g/$m\ell$ 농도로 $37^{\circ}C$에서 18시간 배양한 결과 LDL의 산화에 대한 억제효과가 좋았다. Fraction 3의 band 4를 HPLC로 정제한 후 IR. NMR 및 GC/MASS.로 확인한 결과 5-hydroxyndole로 확인되었다.
점액세균의 대사산물을 대상으로 새로운 항암활성물질을 탐색하는 과정에서 해양퇴적물에서 분리한 균주 JW111의 균체 추출액이 인체유래의 각종 암세포에 대해 강한 활성을 나타냄을 발견하고, 먼저 생산균주인 JW111이 Myxococcus stipitatus임을 확인한 후 그 대사산물을 분리, 정제하여 구조결정한 결과, Phenalamide $A_1$, $A_2E, $A_3$임을 밝혔다. 이들은 공시된 감수성 암세포에 대해 모두 우수한 활성을 나타내었으며, $IC_50$의 값은 $0.23{\sim}0.50{\mu}g/ml$이었다. 또한 이들은 Adriamycin의 내성 세포주에 대해서도 감수성 세포주와 동일한 활성을 나타내어 내성을 나타내지 않음이 확인되었다.
The antibiotic-producing strain HW-003 was screened from soil and found to be effective against the multidrug-resistant Staphylococcus aureus. The spore chain of HW-003 was retinaculiaperti, and the spore surface was spiny. Strain HW-003 has a LL-diaminopimelic acid isoform in the cell wall. The aerial mass color of the strain was gray, and the reverse side was yellow-brown. The strain produced melanin, but did not produce soluble pigments. According to the Taxon program, HW-003 showed best match with Streptomyces cyaneus. Antibiotic production reached a maximum after 72-h cultivation. The antibiotic was purified with silica gel column chromatography, octadecylsilyl column chromatography, and HPLC. The purified antibiotic, AMRSA1, showed strong inhibitory activity against multidrug-resistant Staphylococcus aureus and gram-positive bacteria. The molecular weight of AMRSA1 was about 1, 100. AMRSA1 was a peptide antibiotic containing alanine and serine.
Aldose reductase catalyzes the conversion of glucose into sorbitol. Inhibiting this enzyme in diabetes mellitus can delay or prevent pathogenic process. Aldose reductase inhibitor was screened from Korean fermented soybean pastes (Doen-jang) and purified via sequential processes of ethanol extraction, HP-20 column chromatography, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, and crystallization. Aldose reductase inhibitor was identified as genistein with molecular weight of 270 Da and molecular formula of $C_{15}H_{10}O_5$ based on UV spectrometry, $^1H$ and $^{13}C\;NMRs$, and mass spectrometry. Genistein inhibited aldose reductase of pig lens with $IC_{50}$ level of $20\;{\mu}M$. Because genistein was effective against aldose reductase of animal source, it may be a potential therapeutic agent for diabetic complications.
동부를 80% MeOH로 추출하고, 얻어진 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 $H_2O$로 용매 분획 하였다. 이 중 EtOAc과 n-BuOH 분획으로부터 silica gel과 octadecyl silica gel(ODS) column chromatography를 반복하여 4종의 sterol 화합물을 분리, 정제하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 spectrum data를 해석하여, stigmasterol(1a), $\beta$-sitosterol(1b), 7-ketositosterol(2) 및 stigmasterol 3-O-$\beta$-D-glucopyranoside(3)로 동정하였다. 화합물 1b, 2와 3은 동부에서 처음 분리되었다.
오가피(Acanthopanax sessiliflorus Seeman) 열매를 실온에서 70% ethanol (EtOH)로 추출하고 이 추출물을 ethyl acetate (EtOAc) 분획, n-butyl alcohol 분획, $H_2O$ 분획으로 나누었다. EtOAc 분획에 대하여 silica gel, octadecyl silica gel 및 Sephadex LH-20 column chromatography를 반복 실시하여 2종의 화합물을 분리, 정제하였다. NMR, infrared spectroscopy, 및 electron ionization/mass spectrometry 등의 spectrum을 해석하여, 화합물 1과 화합물 2를 각각 3,5-dihydroxycinnamic acid과 protocatechuic acid 로 구조를 결정하였다. 화합물 1은 오가자에서는 처음으로 분리된 화합물이다. 또한 이 화합물에 대한 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 및 oxygen radical absorbance capacity radical 소거능을 이용한 항산화 활성을 측정하였는데, 모두 vitamin C보다 2배 이상 활성이 높은 것으로 나타났다.
생강나무 목부를 80% methanol로 추출, 농축하였으며, 얻어진 추출물을 ethyl acetate (EtOAc), butanol (n-BuOH) 및 $H_2O$로 분배, 추출하였다. 이 중 EtOAc 분획과 n-BuOH 분획에 대하여 silica gel, octadecyl silica gel (ODS) 및 Sephadex LH-20 column chromatography를 반복 수행하여 2종의 lignan과 3종의 flavonoid 화합물을 분리하였다. 분리한 화합물의 구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여 asarinin (1), (+)-catechin (2), (-)-epicatechin (3), hyperin (4) 및 nudiposide (5)로 구조 동정하였다. Asarinin (1)과 nudiposide (5)는 생강나무에서 이번에 처음으로 분리되었다.
코스모스 꽃을 MeOH : H2O = 4 : 1 용매로 추출하여, 얻어진 추출물을 EtOAc n-BuOH 및 water로 용매 분획 하였다. 이 중 n-BuOH 분획으로부터 silica gel (SiO2)과 octadecyl silica gel(ODS) column chromatography로 정제하여 2종의 화합물을 분리하였다. NMR, MS 및 IR 등의 스텍트럼 데이터를 통해 화합물의 화학구조를 benzyl O-β-ᴅ-glucopyranoside (1)와 and 2-phenylethyl O-β-ᴅ-glucopyranoside (2)로 동정하였다. 분리한 두 화합물의 자외선(UVB)으로 광노화가 유도된 HaCaT 세포주를 이용한 항아토피 효능을 평가하기 위해 실험을 진행하였으며, 1-1,000 ㎍/mL의 농도범위에서 2종의 화합물에서 모두 독성을 나타내지 않았다. TARC생성억제활성을 통한 항아토피 활성결과에서는 2종의 화합물에서 모두 농도의존적인 TARC 억제활성이 나타났지만, 특히 화합물 1에서 낮은 농도범위인 10 ㎍/mL에서도 유의적인 활성이 나타났으며, 다른 농도범위에서도 타 화합물에 비해 억제활성이 높은 것으로 나타나, 항아토피 활성이 가장 우수한 것으로 확인되었다. 이 결과를 통해 기능성 화장품 원료로 활용이 가능할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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