The optimal condition for the determination of saikosaponin a and d, the major pharmacologically active saponins of the roots of Bupleurum falcatum, was studied with the conversion of these saponins into diene saponins $(saikosaponin\;b_1\;and\;b_2)$. The complete separation and quantitative analysis of these saponins were performed by the method of high performance liquid chromatography using $NH_2$ column. The conversion of saikosaponin a and d into diene saponins under gastric pH was calculated. Thirty-three percent of saikosaponin a was converted to saikosaponin $b_1$ and 63 percent of saikosaponin d was converted to saikosaponin $b_2$.
In vitro degradation of saikosaponin-a in physiological condition was conducted. Saikosaponin-a in 0.1 N-HCl of 25% 1,4-dioxane was incubated at $37^{\circ}$ and the products were analyzed and the time course of degradation was observed. Saikosaponin-a(Sa) was transformed to $saikosaponin-b_1(Sb_1)$ and saikosaponin-g(Sg) in the course of time. Sa was decreased drastically and not detected after 6 hours. $Sb_1$0 and Sg was increased with the time. After 6 hours the ratio of $Sb_1$ and Sg was about 4:1 and was maintained for 24 hours.
Choi, Jungwon;Kim, Juree;Kang, Sam Sik;Lee, Sanghyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.64
no.1
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pp.57-61
/
2021
Saikosaponin derivatives such as saikosaponins A, B1, B2, B3, B4, C, and D present in Bupleurum falcatum were analyzed by a high performance liquid chromatograph equipped with an evaporative light scattering detector, using different extraction solvents (water and 70% ethanol). The samples were injected into a YMC Pack Pro C18 column and separated using a gradient elution system with a mobile phase composed of acetonitrile and water at a flow rate of 1.1 mL/min. The content of saikosaponin derivatives was higher in 70% ethanol extract than in water extract. This study provides an efficient analytical method for determining the optimal conditions for extraction of saikosaponin derivatives, which can be used as a basis for development of functional foods and pharmaceutical products from B. falcatum.
Kim, Bo-Mi;Yoon, Kee-Dong;Han, Kyung-Reem;Kim, Jin-Woong
Journal of Pharmaceutical Investigation
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v.38
no.1
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pp.57-61
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2008
A HPLC-ELSD method was developed to determine saikosaponin derivatives from Bupleuri Radix. Eight saikosaponins, saikosaponin c, i, h, a, $b_2$, g, $b_1$ and d, were analyzed under optimized HPLC conditions [column: Eclipse XDB $C_{18}$ ($150{\times}4.6mm$ i.d., $5{\mu}m$; mobile phase: $H_2O$ with 0.1% $CH_3$COOH (v/v) for solvent A and AcCN with 0.1% $CH_3$COOH (v/v) for solvent B, gradient elution; flow rate: 1mL/min; injection volume: $20{\mu}L$]. Good linearity was achieved in the range from 62.5 to $250{\mu}g/mL$ for each compound, and intra-day precision and accuracy at each concentration level varied between 0.05 and 5.45% and between 93.9 and 109.6%, respectively, whereas those for inter-day variations were between 0.91 to 2.73% and 94.3 to 106.1%. This HPLC-ELSD method was applied for the determination of sakosaponins from Bupleuri Radix samples, and saikosaponin a $(0.79{\pm}0.20mg/g)$, c $(0.33{\pm}0.06mg/g)$ and d $(0.48{\pm}0.15mg/g)$ were observed as major compounds. The other saikosaponins were shown under limit of quantification level thus couldn't be quantified. The present study suggested that the introduced HPLC-ELSD method is selective and reliable, and not only saikosaponin a, but also saikosaponin c and d should be employed as the standard markers for Bupleuri Radix.
Various determination methods of saikosaponins in Bupleuri Radix are discussed, and the content of each saikosaponin which is original and/or artifact is rearranged. The changes of saikosaponin a and d into saikosaponin $b_1\;and\;b_2$, respectively, under gastric pH, were studied.
This study was conducted to investigate the effect of cultural methods(cutting, flower removal) on growth and quality of B. falcatum L. Jeongseon local cultivar collected in Korea and Mishima local cultivar introduced from Japan were used. Some of the results obtained are as follows; Jeongseon local cultivar showed less stem branches and shoot weight compared to Mishima. However, Jeongseon local cultivar showed tall plant height, high root fresh and dry weight, and high levels of saikosaponin-a and total-saikosaponin, but low saikosaponin-c content than that of Mishima. Both cultivars seeded on March 20 had longer main root, bigger stem diameter, few stem branch, and high saikosaponin-c content compared with those of late seeded one, April 30. Growth characteristics such as plant height, stem diameter, stem branch number, shoot weight, root diameter, root fresh and dry weight, and root branch number were increased in a low planting $density(30{\times}15\;cm)$, but the content of saikosaponin was not affected by planting density. Jeongseon and Mishima cultivars seeded on April 10 with $30{\times}15\;cm$ planting density and April 30 with $30{\times}10\;cm$ planting density contained highest total saikosaponin levels, respectively. However, average root dry weight was not affected by planting time or density in both Bupleurum cultivars. Both cutting and flower removal increased the length of main root, fresh and root weight, and saikosaponin-a, saikosaponin-d and total-saikosaponin in Jeongseon cultivar than that of Mishima. As the harvesting time was delayed, plant height, stem diameter, shoot weight, length of main root, root fresh and dry weight were increased, but content of saikosaponin-a, saikosaponin-d and total-saikosaponin were decreased.
Seven genetic lines of Bupleurum falcatum L. from different geographical regions were analysed for saikosaponin contents and chromosomal numbers. The somatic chromosome numbers of B. falcatum originated from Euisong, Iri, Milyang, Sangnam, Taejon, and Youngchon were 2n=20 while Mishimasaiko showed 2n=26. However, chromosome features were different in plants grown in different geographical regions. Generally, Korean lines had higher saikosaponin contents than Mishimasaiko which is Japanese and Sangnam lines had highest saikosaponin contents compared to other tested lines.
The contents of saikosaponin a, c and d in the root of somaclones and wild plants of B. falcatum L. were determined. The saikosaponin contents of wild plants collected from Chongson-gun, Kangwon Province and Yongdok-gun, Kyongbuk Province were higher than those of the somaclones derived from 3-month and 2-year aged calli. The mean values of saikosaponin content in 2 year-old somaclones derived from the callus cultured three months were higher than those in 1 year-old somaclones from 2-year aged callus. Variation of saikosaponin content depending on the culture periods was not found. Four plants among 1-year old somaclones showed saikosaponin content twice as much as wild plants had. This result implies the possible use of somaclonal variation for crop improvement.
This study was conducted to determine the optimum planting dates and density of one year old Bupleurum falcatum L. to improve its productivity and quality. Two cultivars of B. falcatum, originated from Jeongseon, Korea and Mishima, Japan were used. Some of the results obtained are as follows : Jeongseon cultivar showed less stem branches and shoot weight compared to Mishima. However, Jeongseon cultivar showed tall plant height, high root fresh and dry weight, and high levels of saikosaponin, but low saikosaponin content than that of Mishima. Both cultivars seeded on March 20 had long main root, big stem diameter, few stem branch, and high saikosaponin c content compared to those of late seeded one, April 30. Growth characteristics such as plant height, stem diameter, stem branch number, shoot weight, root diameter, root fresh and dry weight, and root branch number were increased in a low planting $density(30\;{\times}\;15cm)$, but the content of saikosaponin was not affected by planting density. Jeongseon and Mishima cultivars seeded on April 10 with $30\;{\times}\;15cm$ planting density and April 30 with $30\;{\times}\;10cm$ planting density contained the highest total saikosaponin levels, respectively. However, average root dry weight were not affected by planting time or density in both Bupleurum cultivars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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