Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.25
no.4
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pp.287-296
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2005
To investigation protein expression pattern in rice leaves exposed to cold stress, the soluble proteins extracted from leaf tissue were fractionated with $15\%$ PEG and separated by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE). Differentially expressed proteins were identified by peptide mass fingerprinting using matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Eight proteins up-regulated and 10 down-regulated were found in $15\%$ PEG supernatant fraction. In addition, 13 proteins up-regulated and 14 down-regulated were found in $15\%$ PEG pellet fraction. It was identified the differentially expressed proteins in $15\%$ PEG supernatant fraction as pimerase/dehydratase fructokinase, ribose-5-phosphate isomerase (Rpi), chaperonin 21 precursor, probable photosystem II oxygen-envolving complex (PS II OEC) protein 2 precursor and thioredoxin h-type (Trx-h) and those in $15\%$ PEG pellet fraction as OSINBb0059K02.15, hypothetical protein, putative mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK), beta 7 subunit of 205 proteasome, ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) small subunit. These proteins are involved in metabolism, energy, protein synthesis, disease/defense and signal transduction-related proteins.
Korean Journal of Agricultural and Forest Meteorology
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v.2
no.4
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pp.167-174
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2000
A glass chamber experiment was conducted to evaluate the impact of ozone (O$_3$) on the physiology of two soybean, Glycine max L. cultivars, 'Hwanggum' and 'Jangyub'. Thirty-day old plants with 1-2 nodes were exposed to $O_3$ of <10 and 150 n1 1$^{-1}$ in the chambers for 8 h d$^{-1}$ for 3 days. Net photosynthesis, stomatal conductance, chlorophyll a, chlorophyll b and total chlorophyll contents, and foliar injury (% injured leaves) were measured. Although foliar damage was more severe on Jangyub than on Hwanggum, net photosynthesis was decreased by 60% on Hwanggum and 13% on Jangyub due to the $O_3$ treatment. Stomatal conductance on Jangyub was twice higher than that on Hwanggum and it was not changed by the $O_3$ treatment. Whereas, stomatal conductance on Hwanggum was 60-80% decreased by $O_3$, Chlorophyll contents did not change due to the $O_3$ treatment or variety. We can conclude that the reduction of net photosynthesis by $O_3$ was mainly due to the decreases of stomatal conductance and Rubisco (ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase) activity on dark reaction. And foliar injury and chlorophyll content did not contribute to the net photosynthetic decrease. The gas-exchange variables measured 24 h after the termination of $O_3$ fumigation showed that there was no significant recovery within a day. Since the physiological responses on Jangyub were not much affected by the $O_3$ treatment, this variety could be $O_3$ resistant.
Carbon concentrating mechanisms play a vital role in photosynthesis in microalgae and cyanobacteria especially in the proper functioning of Rubisco and assimilation of carbon via the Calvin cycle. This study evaluates the role of carbon dioxide on carbon concentrating mechanism (CCM) in a cynaobacteria, Spirulina platensis and a microalga, Chlorella sp. 786. The study organisms were grown in both atmospheric (control sample, 0.035%) and high (exposed sample, 10%) $CO_2$ concentrations. Second dimension (2D) electrophoresis revealed a huge difference in the protein profiles of both organisms suggesting the induction of CCM related proteins in the sample maintained at atmospheric $CO_2$ concentration and the repression of CCM related proteins in the sample maintained at 10% $CO_2$. Liquid chromatography-mass spectroscopy analysis revealed the presence of two important $C_i$ transporter proteins in the control sample of S. platensis, namely ferredoxin-$NADP^+$ reductase and ATP binding cassette (ABC) transport system protein. These proteins were only expressed in the control sample and were downregulated or not expressed at all in the exposed sample. Consequently, this study conclusively proves that CCMs are only inducted at low $CO_2$ concentrations and are not functional at high $CO_2$ concentration.
Kang, S. M;Kang, N. J;Cho, J. L;Kim, Z. H;Kwon, Y. W
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.38
no.4
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pp.350-359
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1993
The effect of gibberellic acid ($GA_3) and abscisic acid (ABA) on KCl-enhanced proteolysis of senescing leaves of rice(Oryza sativa L. cv. Chilsung) was studied. Emphasis was given to their effects on KCI-enhanced efflux of amino acids and proteinase activity. When treated singly, $GA_3 affected leaf proteolysis little, while ABA increased proteolysis, the rate of amino acid efflux, and ribulose -1,5 -bisphosphate carboxylase / oxygenase (Rubisco)-degrading endoproteinase activity. An additive increase in all three parameters mentioned above was observed when leaves were treated with ABA and KCl. No such an additive effect was found when $GA_3 was treated with KCl. Both $GA_3 and ABA helped to alleviate the KCI-suppressed activity of Rubisco-degrading exoproteinases. The additive increase in proteolysis of rice leaves in the presence of both ABA and KCl could thus be ascribed to a further increase in the efflux of protein hydrolyzates and Rubisco-degrading endoproteinase activity. An increase in proteolysis was accompanied by a decrease in water absorption, and the combined treatment of ABA with KCl resulted in a further reduction of water absorption.
Hamlet (PI549276) possessing 2RL was obtained by cross between a wheat cultivar ND7532 (Froid/Centurk) and a rye cultivar Chaupon. Chaupon was known to have resistant gene to biotype L of Hessian fly [Mayetiola destructor (Say)] larvae. The wheat-rye translocation line (Coker797*4/Hamlet) was also known to be resistant to biotype L of Hessian fly larvae. We analysed a set of 96 ESTs from the wheat-rye translocation line (2BS/2RL). ESTs were classified by various physiological processings, such as primary metabolism, secondary metabolism, transcription, translation, transport, signal transduction, defense, transposable element, and others. Three sequences encoding thioredoxin peroxidase, 26S rRNA, and rubisco small subunits were homologous to registered genes in rye. Although limited number of clones were used to develop ESTs, these clones and their sequence information may be useful for researchers studying general physiology and molecular biology on the translocation line.
Southern blot analysis revealed a ubiquitous distribution and high copy number of Ty3-gypsy-like elements in the genome of Hibiscus syriacus. Comparative phylogenetic analysis of the large subunit of Rubisco and the integrase region of Ty3-gypsy elements in various plant species indicated that the retrotransposon-like sequences have different evolutionary histories and their own unique polymorphism in the H. syriacus population. Sequence-tagged site-restriction fragment length polymorphisms (STS-RFLP) analysis also indicated great variability in the numbers and sequences of Ty3-gypsy-like elements within H. syriacus varieties. Ty3-gypsy-like elements may still be active within H. syriacus, since Northern analysis of wounded leaves of H. syriacus variety Saehan with a probe for the integrase domain gave strong hybridization signals. The sequence heterogeneity and ubiquity of the Ty3-gypsy-like elements in H. syriacus genomes could provide reliable DNA markers for line identification as well for the analysis of genetic diversity in H. syriacus.
Kwon, Sun Jae;Choi, Eun Young;Seo, Jong Bok;Park, Ohkmae K.
Molecules and Cells
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v.24
no.2
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pp.268-275
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2007
Protein phosphorylation plays a key role in signal transduction in cells. Since phosphoproteins are present in low abundance, enrichment methods are required for their purification and analysis. Chemical derivatization strategies have been devised for enriching phosphoproteins and phosphopeptides. In this report, we employed a strategy that replaces the phosphate moieties on serine and threonine residues with a biotin-containing tag via a series of chemical reactions. Ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RUBISCO)-depleted protein extracts prepared from Arabidopsis seedlings were chemically modified for 'biotin-tagging'. The biotinylated (previously phosphorylated) proteins were then selectively isolated by avidin-biotin affinity chromatography, followed by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and matrix-assisted laser-desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). This led to the identification of 31 protein spots, representing 18 different proteins, which are implicated in a variety of cellular processes. Despite its current technical limitations, with further improvements in tools and techniques this strategy may be developed into a useful approach.
The DNA fragment containing ginseng ribulose-1,5-bisphosphate carboxytase/oxygenase large subunit(rbcL) gene was cloned from the ginseng chloroplast EcoRl library by colony lift hybridization with tobacco rbcL gene probe. From the screened clone, the DNA fragment containing ginseng rbcL gene was digested with several restriction enzyme and analyzed by Southern blot hybridization for the construction of restriction map. The ginseng rbcL gene fragment was subcloned in pBluescript II SK + vector and sequence analysis was performed. The nucleotide sequence of ginseng rbcL gene was compared with those of petunia, tobacco, alfalfa, rice and barley, which showed a homology of 93.1%, 95.2%, 90.5%, 85.5% and 84.3%, respectively.
We evaluated the response to salt stress of two different ginseng lines, STG3134 and STG3159, which are sensitive and tolerant, respectively, to salt treatment. Plants were exposed to a 5 dS/m salt solution, and chlorophyll fluorescence was measured. STG3134 ginseng was more sensitive than STG3159 to salt stress. To characterize the cellular response to salt stress in the two different lines, changes in protein expression were investigated using a proteomic approach. Total protein was extracted from detached salt-treated leaves of STG3134 and STG3159 ginseng, and then separated by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis(2-DE). Approximately 468 protein spots were detected by 2-DE and Coommassie brilliant blue staining. Twenty-two proteins were found to be reproducibly up- or down-regulated in response to salt stress. Among these proteins, twelve were identified using MALDI-TOF MS and ESI-Q-TOF and classified into several functional groups: photosynthesis-related proteins(oxygen-evolving enhancer proteins 1 and 2, rubisco and rubisco activase), detoxification proteins(polyphenol oxidase) and defense proteins($\beta$-1,3-glucanase, ribonuclease-like storage protein, and isoflavone reductase-like protein). The protein levels of ribonuclease-like storage protein, which was highly induced in STG3159 ginseng as compared to STG3134, correlated tightly with mRNA transcript levels, as assessed by reverse-transcription(RT)-PCR. Our results indicate that salinity induces changes in the expression levels of specific proteins in the leaves of ginseng plants. These changes may, in turn, playa role in plant adaptation to saline conditions.
Kim, Dong Eok;Kwon, Jin Kyung;Hong, Soon Jung;Lee, Jong Won;Woo, Young Hoe
Journal of Bio-Environment Control
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v.29
no.3
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pp.306-312
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2020
This study was conducted to investigate cucumber plants response to greenhouse environments by solar shading in greenhouse in the summer. In order to estimate heat stress reduction of cucumber plants by solar shading in greenhouse, we measured and analyzed physiological conditions of cucumber plants, such as leaf temperature, leaf-air temperature, rubisco maximum carboxylation rate, maximum electron transport rate, thermal breakdown, light leaf respiration, etc. Shading levels were 90% mobile shading of full sunlight, 40% mobile shading of full sunlight and no shading(full sunlight). The 90% shading screen was operated when the external solar radiation is greater than 650 W·m-2. Air temperature, solar radiation, leaf temperature, leaf-air temperature and light leaf respiration in the 90% shading of full sunlight was lower than those of 40% shading and no shading. Rubisco maximum carboxylation rate, arrhenius function value and light leaf respiration of the 90% shading were significantly lower than those of 40% shading and no shading. The thermal breakdown, high temperature inhibition, of 90% shading was significantly higher than that of 40% shading and no shading. Therefore, these results suggest that 90% mobile shading made a less stressful growth environment for cucumber crops.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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