Background: Endophytic fungi play an important role in balancing the ecosystem and boosting host growth. In the present study, we investigated the endophytic fungal diversity of healthy Panax notoginseng and evaluated its potential antimicrobial activity against five major phytopathogens causing root-rot of P. notoginseng. Methods: A culture-dependent technique, combining morphological and molecular methods, was used to analyze endophytic fungal diversity. A double-layer agar technique was used to challenge the phytopathogens of P. notoginseng. Results: A total of 89 fungi were obtained from the roots, stems, leaves, and seeds of P. notoginseng, and 41 isolates representing different morphotypes were selected for taxonomic characterization. The fungal isolates belonged to Ascomycota (96.6%) and Zygomycota (3.4%). All isolates were classified to 23 genera and an unknown taxon belonging to Sordariomycetes. The number of isolates obtained from different tissues ranged from 12 to 42 for leaves and roots, respectively. The selected endophytic fungal isolates were challenged by the root-rot pathogens Alternaria panax, Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Phoma herbarum, and Mycocentrospora acerina. Twenty-six of the 41 isolates (63.4%) exhibited activity against at least one of the pathogens tested. Conclusion: Our results suggested that P. notoginseng harbors diversified endophytic fungi that would provide a basis for the identification of new bioactive compounds, and for effective biocontrol of notoginseng root rot.
Lee, Sun Keun;Lee, Dong Hyeon;Lee, Kyoung-Tae;Park, Yong Bae;Seo, Sang-Tae;Lee, Jong Kyu
Journal of Forest and Environmental Science
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v.31
no.4
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pp.312-316
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2015
Rhizina undulata, the causal agent of Rhizina root rot, is a soil-borne fungus occurring on coniferous trees. The destruction of coastal forests caused by R. undulata infection has been mainly associated with bonfires at camping sites. However, Rhizina root rot was observed in the western coastal forests without fire. It was hypothesized that Rhizina root rot in this area might be closely related to the soil salinity, which can facilitate the growth and survival of R. undulata. So, the variation in sodium chloride (NaCl) resistance among isolates of Rhizina undulata was compared using liquid media containing different concentrations of NaCl ranging from 0 mM to 300 mM. Our results showed that, albeit of no growth at a higher concentration of NaCl (300 mM), most of R. undulata isolates were capable of germinating and grew at up to 100 mM, indicating that NaCl resistance varies among R. undulata isolates. It was further found that isolates from coastal areas seemed to be more tolerant to NaCl than those further away the coast. We demonstrated that R. undulata could be possible to survive in coastal areas, but was lower NaCl tolerance than other fungi.
Seo, Mun Won;Song, Jeong Young;Kim, Sun Ick;Oh, Sang Keun;Kim, Hong Gi
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.26
no.4
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pp.302-307
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2018
Background: A soil-borne pathogenic fungus, Ilyonectria radicicola (Cylindrocarpon destructans) causes root rot on ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) and is known to attack many other plants. The Nectria/Neonectria radicicola complex has been renamed as the I. radicicola complex after analysis of its multi-gene relatedness and morphological characteristics. The fungi in this complex have been reclassified into 16 species under the genus Ilyonectria based on characteristics analysis Methods and Results: To obtain useful data from the Korean ginseng root rot, I. radicicola was isolated from the rhizosphere soils of the chestnut tree. They were identified through a pathogenicity test and a survey of the morphological features. The existence of I. radicicola in soil samples was confirmed by PCR detections using nested PCR with species-specific primer sets. These were subsequenctly isolated on semi-selective media from PCR-positive soils. Genetic analysis of the I. radicicola complex containing these pathogens was done by comparing the DNA sequences of the histone h3 region. These isolates originating from the rhizosphere soils of chestnut constituted a clade with other closely related species or I. radicicola isolates originating from ginseng or other host plants, respectively. Additionally, the pathogenicity tests to analyze the characteristics of these I. radicicola isolates revealed that they caused weakly virulent root rot on ginseng. Conclusions: This is the first study reporting that I. radicicola isolates from chestnut rhizosphere soils can attack ginseng plant in Korea. Thus, these results are expected to provide informations in the selection of suitable fields for ginseng cultivation.
Lu, Xiao H.;Zhang, Xi M.;Jiao, Xiao L.;Hao, Jianjun J.;Zhang, Xue S.;Luo, Yi;Gao, Wei W.
Journal of Ginseng Research
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v.44
no.3
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pp.506-518
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2020
Background: Red-skin root of Asian ginseng (Panax ginseng) significantly reduces the quality and limits the production of ginseng in China. The disease has long been thought to be a noninfectious physiological disease, except one report that proved it was an infectious disease. However, the causal agents have not been successfully determined. In the present study, we were to reveal the pathogens that cause red-skin disease. Methods: Ginseng roots with red-skin root symptoms were collected from commercial fields in Northeast China. Fungi were isolated from the lesion and identified based on morphological characters along with multilocus sequence analyses on internal transcription spacer, β-tubulin (tub2), histone H3 (his3), and translation elongation factor 1α (tef-1α). Pathogens were confirmed by inoculating the isolates in ginseng roots. Results: A total of 230 isolates were obtained from 209 disease samples. These isolates were classified into 12 species, including Dactylonectria sp., D. hordeicola, Fusarium acuminatum, F. avenaceum, F. solani, F. torulosum, Ilyonectria mors-panacis, I. robusta, Rhexocercosporidium panacis, and three novel species I. changbaiensis, I. communis, and I. qitaiheensis. Among them, I. communis, I. robusta, and F. solani had the highest isolation frequencies, being 36.1%, 20.9%, and 23.9%, respectively. All these species isolated were pathogenic to ginseng roots and caused red-skin root disease under appropriate condition. Conclusion: Fungal complex is the causal agent of red-skin root in P. ginseng.
Kim, Jong-Tae;Park, In-Hee;Ryu, Kyoung-Yul;Cheon, Jeong-Uk;Yu, Seung-Hun
The Plant Pathology Journal
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v.19
no.3
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pp.181-183
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2003
Corky root symptoms caused by Pyrenochaeta lycopersici were observed on the roots and stem base of tomato plants in Korea. Symptoms on infected plants typically appeared as stunting and generally lacking vigor, and infected plants die back from the foliage tips after fruits have set. Brown lesions appearing with bands around the roots were characteristic symptoms of the disease. The lesions become swollen and cracked along the length of the root with corky appearance. Based on cultural and morphological characteristics, the fungus from the diseased plants was identified as Pyrenochaeta lycopersici. Pycnidia were solitary, globose to subglobose, brown to black, darker around the neck region, and measured 173-215 $\mu\textrm{m}$ in diameter with septate setae up to 102-132$\times$6.5 $\mu\textrm{m}$. Conidia were hyaline, unicellular, and 4.2-4.7$\times$l.5-2.0 $\mu\textrm{m}$ long. Optimum temperature for mycelial growth of the p. lycopersici isolates ranged from $20^{\circ}C$ to $25^{\circ}C$. Fifteen isolates off lycopersici were tested for pathogenicity to susceptible and tolerant cultivars of tomato plants by artificial inoculation. Three isolates of P. lycopersici induced typical corky root discoloration on susceptible tomato cultivars but not on tolerant tomato. This is the Erst report in Korea of tomato corky root disease caused by P. lycopersici.
This study was conducted to select rhizobia from hairy vetch (Vicia villosa Roth) with nodulation and excellent nitrogen-fixing ability. Hairy vetch root was collected from 7 of cultivation region of all over the country, rhizobia were isolated from the root nodules. Isolates were re-inoculated into a hairy vetch separately and studied nodulation and nitrogen-fixing ability. As a result, total of 52 Rhizobium isolates were isolated from the hairy vetch root nodules, among these, 16 isolates were Rhizobium which show good growth at more than 0.5% NaCl concentration. These 16 isolates were re-inoculated separately, 8 weeks after, good root nodule formation was observed from Rhizobium sp. RH1, RH3, RH81, RH82, RH84, and RH93 strain treated samples. Six isolates were positive for nitrogen fixing ability, the highest acetylene reduction activity was shown by Rhizobium sp. RH84. Results suggest that the Rhizobium sp. RH84 could be used as the possibility of its application as a green manure crop of hairy vetches in nonuniform salt distribution reclaimed land.
In 2003 to 2005, the root rot of Japanese angelica (Aralia elata) was surveyed in nursery beds of Korea, where incidence of the disease often reached up to 100%. Three isolates were obtained from the infected roots, and identified as Phytophthora cactorum on the basis of cultural, morphological characteristics and molecular analysis. The isolates were characterized by having markedly papillate and broadly ovoid deciduous sporangia. The optimum temperature for mycelium growth was at $25^{\circ}C$ on V8 juice agar. Pathogenicity of the isolates was confirmed by soil mixture inoculation. Approximately 900 bp of ITS rDNA was amplified from all 3 isolates and band pattern of restriction fragments observed by Alu I, Msp I, and Taq I digestion also supported the result of the morphological identification when compared with PhytID database.
Root and stem rot caused by Phytophthora palmivora is one of the most serious diseases affecting durian production in Thailand where metalaxyl, an effective fungicide against oomycetes, has been used extensively for a long period to control this disease. Although field isolates of P. palmivora resistant to metalaxyl exist in Thailand, a molecular basis for P. palmivora has not yet been elucidated regarding metalaxyl resistance. The current study tested whether P. palmivora RPA1 (the DNA-directed RNA polymerase I subunit gene), a homolog gene of RPA190 associated with metalaxyl resistance in some isolates of Phytophthora infestans, had a role in the resistance mechanism toward metalaxyl. In total, 40 durian-derived isolates of P. palmivora were assessed for metalaxyl sensitivity using a mycelial growth inhibition assay. The effective concentrations for 50% mycelial growth inhibition values for all isolates tested were in the range 0.01-872.88 mg/L. The isolates were clustered into three groups: sensitive (n=23), moderately resistant (n=11), and resistant (n=6) groups. No polymorphism was revealed based on multiple alignment analysis of the amino acid sequences translated from the corresponding DNA sequences in the region of RPA1 of the metalaxyl-sensitive (n=5), moderately resistant (n=2), and resistant isolates (n=6). Furthermore, investigation of the RPA1 expression among these representative isolates (n=3, each group) indicated that RPA1 expression may not be involved in the regulation of P. palmivora resistance to metalaxyl. Based on this line of evidence, there was no detected relationship regarding metalaxyl resistance and P. palmivora RPA1.
Many plant growth-promoting rhizobacteria (PGPRs) have been known for beneficial effects on plants including biological control of soilborne pathogens, induced systemic resistance to plant pathogens, phytohormone production, and improvement of nutrient and water uptake of plants. We developed a simple and rapid method for screening potential PGPR, especially phytohormone producing rhizobacteria, or for analyzing their functions in plant growth using cucumber seedling cuttings. Surface-sterilized cucumber seeds were grown in a plastic pot containing steamed vermiculite. After 7 days of cultivation, the upper part 2 cm in length of cucumber seedling, was cut and used as cucumber cuttings. The base of cutting stem was then dipped in a microcentrifuge tube containing 1.5ml of a bacterial suspension and incubated at $25^{\circ}C$ with a fluorescent light for 10 days. Number and length of developed adventitious roots from cucumber cuttings were examined. The seedling cuttings showed various responses to the isolates tested. Some isolates resulted in withering at the day of examination or in reduced number of roots developed. Several isolates stimulated initial development of adventitious roots showing more adventitious root hair number than that of untreated cuttings, while some isolate had more adventitious root hair number and longer adventitious roots than that of untreated control. Similar results were obtained from the trial with rose cuttings. Our results suggest that this bioassay method may provide a useful way for differentiating PGPR's functions involved in the development of root system.
Park Myung Soo;Jung Se Ra;Lee Myoung Sook;Kim Kyoung Ok;Do Jin Ok;Lee Kang Hyun;Kim Seung Bum;Bae Kyung Sook
Journal of Microbiology
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v.43
no.3
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pp.219-227
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2005
Little is known about the bacterial communities associated with the plants inhabiting sand dune ecosystems. In this study, the bacterial populations associated with two major sand dune plant species, Calystegia soldanella (beach morning glory) and Elymus mollis (wild rye), growing along the costal areas in Tae-An, Chungnam Province, were analyzed using a culture-dependent approach. A total of 212 bacteria were isolated from the root and rhizosphere samples of the two plants, and subjected to further analysis. Based on the analysis of the 16S rDNA sequences, all the bacterial isolates were classified into six major phyla of the domain Bacteria. Significant differences were observed between the two plant species, and also between the rhizospheric and root endophytic communities. The isolates from the rhizosphere of the two plant species were assigned to 27 different established genera, and the root endophytic bacteria were assigned to 21. Members of the phylum Gammaproteobacteria, notably the Pseudomonas species, comprised the majority of both the rhizospheric and endophytic bacteria, followed by members of Bacteroidetes and Firmicutes in the rhizosphere and Alphaproteobacteria and Bacteroidetes in the root. A number of isolates were recognized as potentially novel bacterial taxa. Fifteen out of 27 bacterial genera were commonly found in the rhizosphere of both plants, which was comparable to 3 out of 21 common genera in the root, implying the host specificity for endophytic populations. This study of the diversity of culturable rhizospheric and endophytic bacteria has provided the basis for further investigation aimed at the selection of microbes for the facilitation of plant growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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