1999년부터 2004년 사이에 벼흰잎마름병의 원인균인 Xanthomonas oryzae pv. oryzae를 전국적으로 분리하여 Biolog와 지방산 분석법을 이용하여 동정하였다. 한국의 벼 판별품종을 기준으로 분류한 결과 1999년도와 2002에 각각 분리된 벼흰잎마름병균은 모두 K1 레이스에 속하였다. 2003년도에 분리된 벼흰잎마름병균의 경우는 50% 이상이 K3 레이스에 속하였으며 대부분 전라도 지역에서 분리된 균주였다. 분리 년도 별로 단인자 벼 저항성 품종에 대한 균들의 반응을 보았을 때 많은 K1 레이스로 분류된 균주들이 단인자 저항성 품종에 대해 달리 반응을 보였다. Southern bolt 결과, 동일한 레이스에서도 다양한 비병원성 유전자들을 가지고 있었다. 이러한 결과들은 하나의 레이스가 여러 개의 벼 저항성 유전자와 반응한다는 것을 제시한다. 전남과 전북에서 분리된 모든 K3 레이스들은 Xa3 단인자 저항성 품종을 침해하였는데 이러한 결과는 전남과 전북에 Xa3 저항성원을 지닌 벼 품종의 과다한 재배로 인하여 Xa3 침해 균주의 선별적 증식이 유도된 것으로 추측된다. 이러한 다양한 비병원성 유전자 패턴 및 단인자 저항성 유전자에 대한 반응을 고려하여 국내 분리된 벼흰잎마름병균들을 19개의 병원형으로 분류하였다. 새롭게 분류된 병원형들은 국내의 새로운 저항성 품종을 육종하는데 도움이 될 것이다.
Near-isogenic lines (NILs) carrying bacterial blight resistance genes (Xa4, xa5 and Xa21) were developed in japonica rice using Suweon345 as genetic background. NILs were selected by gene specific DNA markers and inoculation of K1 or K3a race. NILs conferring Xa4 were resistant to K1, K2, K3, and moderately resistant to K3a. NILs conferring xa5 were resistant to K1, K2, K3, and K3a. NILs having Xa21 were susceptible to K1, while resistant to K2, K3 and K3a. Target genes of NILs with the genetic background of Suweon345 were also confirmed by using eleven Philippines races and International Rice Bacterial Blight (IRBB) NILs carrying Xa4, xa5 and Xa21. All NILs had no significant difference from their recurrent parents in the major agronomic traits except for panicle length and brown rice 1,000 grain weight. Heading date of NILs ranged from Aug. 10 to Aug. 11, which was similar to that of recurrent parent, Suweon345. Culm length, number of grains per panicle and ratio of ripened grain of NILs were similar to those of Suweon345. Milled rice of NILs was ranged from 4.82 to 4.93MT/ha. These NILs will be useful for improving resistance to K3a race of bacterial blight pathogens in Korean japonica cultivars.
Molecular typing of pathogenic microorganisms is important for epidemiological investigation of infectious disease outbreaks. In this study, we applied Universal Rice Primers (URP) that were originated from repetitive sequences in rice chromosomal DNA to random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis of pathogenic bacteria such as Escherichia coli, Listeria monocytogenes, and Salmonella sp. Of the twelve URP primers examined to date, seven primers (URP-2, -3, -4, -5, -6, -8, and -9) generated reproducible and polymorphic PCR products ranging from 1 to 13 bands. One of them, URP-6 was very effective in differentiating seven E. coli serotypes, seven L. monocytogenes clinical isolates, and eight Salmonella subspecies (ssp.) serovars. The results thus indicate that RAPD analysis using URP primers might be useful in typing bacterial pathogens including E. coli, L. monocytogenes, and Salmonella strains.
쌀은 세계에서 가장 중요한 작물 중의 하나이지만 충분한 비타민을 제공하지 않고, 벼 도열병과 흰잎마름병은 전 세계적으로 가장 큰 피해를 주고 있는 병해이다. 리보플라빈, 비타민 B2는 인간의 건강에 필수적인 영양소이며, 식물의 병원균에 대한 식물의 방어 활성화로 알려져 있다. 본 연구에서는 BioDoctor (Hyunnong Co., Ltd., Gokseong, Korea)라는 리보플라빈 기반 제품을 벼에 경엽살포했을 때, 주요 병해에 대한 저항성 유도 및 벼 체내에 비타민 함량이 증가되는지에 대한 가능성을 조사하였다. 온실검정에서 BioDoctor 제품 500배와 1,000배로 희석하여 경엽처리 결과 벼 도열병과 흰잎마름병에 대해 현저한 병 저항성을 유도하였다. 또한, BioDoctor를 처리한 알곡과 잎에서 통계적으로 유의한 수준으로 리보플라빈 함량이 검출되었다. 본 연구는 비타민인 리보플라빈이 함유된 BioDoctor가 벼 도열병과 흰잎마름병에 대해 병 저항성을 유도할 뿐만 아니라 쌀 곡류 내에 비타민 함량을 증가시키는 큰 잠재력을 가지고 있는 것으로 나타났다.
Ranjani, Pandurangan;Gowthami, Yaram;Gnanamanickam, Samuel S;Palani, Perumal
한국미생물·생명공학회지
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제46권4호
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pp.346-359
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2018
Xanthomonas oryzae, a bacterial pathogen causing leaf blight disease (BLB) in rice, can cause widespread disease and has caused epidemics globally, resulting in severe crop losses of 50% in Asia. The pathogen is seed-borne and is transmitted through seeds. Thus, control of BLB requires the elimination of the pathogen from seeds. Concern about environment-friendly organic production has spurred improvements in a variety of biological disease control methods, including the use of bacteriophages, against bacterial plant pathogens. The present study explored the potential of bacteriophages isolated from diseased plant leaves and soil samples in killing the bacterial pathogen in rice seeds. Eight different phages were isolated and evaluated for their bacteriolytic activity against different pathogenic X. oryzae strains. Of these, a phage designated ${\varphi}XOF4$ killed all the pathogenic X. oryzae strains and showed the broadest host range. Transmission electron microscopy of ${\varphi}XOF4$ revealed it to be a tailed phage with an icosahedral head. The virus was assigned to the family Siphoviridae, order Caudovirales. Seedlings raised from the seeds treated with $1{\times}10^8pfu/ml$ of ${\varphi}XOF4$ phage displayed reduced incidence of BLB disease and complete bacterial growth inhibition. The findings indicate the potential of the ${\varphi}XOF4$ phage as a potential biological control agent against BLB disease in rice.
Thu Thi Hieu Nguyen;Cristina Bez;Iris Bertani;Minh Hong Nguyen;Thao Kim Nu Nguyen;Vittorio Venturi;Hang Thuy Dinh
The Plant Pathology Journal
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제40권2호
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pp.225-232
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2024
The microbiomes of two important rice cultivars in Vietnam which differ by their susceptibility to the bacterial leaf blight (BLB) disease were analyzed through 16S rRNA amplicon technology. A higher number of operational taxonomic units and alpha-diversity indices were shown in the BLB-resistant LA cultivar than in the BLB-susceptible TB cultivar. The BLB pathogen Xanthomonas was scantly found (0.003%) in the LA cultivar, whereas was in a significantly higher ratio in the TB cultivar (1.82%), reflecting the susceptibility to BLB of these cultivars. Of special interest was the genus Acholeplasma presented in the BLB-resistant LA cultivar at a high relative abundance (22.32%), however, was minor in the BLB-sensitive TB cultivar (0.09%), raising a question about its roles in controlling the Xanthomonas low in the LA cultivar. It is proposed that Acholeplasma once entered the host plant would hamper other phytopathogens, i.e. Xanthomonas, by yet unknown mechanisms, of which the triggering of the host plants to produce secondary metabolites against pathogens could be a testable hypothesis.
Species belonging to the genus Fusarium are widely distributed and cause diseases in many plants. Isolation of fungal strains from air or cereals is necessary for disease forecasting, disease diagnosis, and population genetics [1]. Previously we showed that Fusarium species are resistant to toxoflavin produced by the bacterial rice pathogen Burkholderia glumae while other fungal genera are sensitive to the toxin, resulting in the development of a selective medium for Fusarium species using toxoflavin [2]. In this study, we have tried to elucidate the resistant mechanism of F. graminearum against toxoflavin and interaction between the two pathogens in nature. To test whether B. glumae affects the development of F. graminearum, the wild-type F. graminearum strains were incubated with either the bacterial strain or supernatant of the bacterial culture. Both conditions increased the conidial production five times more than when the fungus was incubated alone. While co-incubation resulted in dramatic increase of conidial production, conidia germination delayed by either the bacterial strain or supernatant. These results suggest that certain factors produced by B. glumae induce conidial production and delay conidial germination in F. graminearum. To identify genes related to toxoflavin resistance in F. graminearum, we screened the transcriptional factor mutant library previously generated in F. graminearum [3] and identified one mutant that is sensitive to toxoflavin. We analyzed transcriptomes of the wild-type strain and the mutant strain under either absence or presence of toxoflavin through RNAseq. Expression level of total genes of 13,820 was measured by reads per kilobase per million mapped reads (RPKM). Under the criteria with more than two-fold changes, 1,440 genes were upregulated and 1,267 genes were down-regulated in wild-type strain than mutant strain in response to toxoflavin treatment. A comparison of gene expression profiling between the wild type and mutant through gene ontology analysis showed that genes related to metabolic process and oxidation-reduction process were highly enriched in the mutant strain. The data analyses will focus on elucidating the resistance mechanism of F. graminearum against toxoflavin and the interaction between the two pathogens in rice. Further evolutionary history will be traced through figuring out the gene function in populations and in other filamentous fungi.
Rice blast caused by Magnaporthe oryzae is a major disease. In the present study, we aimed to identify and evaluate the novel bacterial isolates from rice rhizosphere for biocontrol of M. oryzae pathogen. Sixty bacterial strains from the rice plant's rhizosphere were tested for their biocontrol activity against M. oryzae under in vitro and in vivo. Among them, B. amyloliquefaciens had significant high activity against the pathogen. The least disease severity and highest germination were recorded in seeds treated with B. amyloliquefaciens UASBR9 (0.96 and 98.00%) compared to untreated control (3.43 and 95.00%, respectively) under in vivo condition. These isolates had high activity of enzymes in relation to growth promoting activity upon challenge inoculation of the pathogen. The potential strains were identified based on 16S rRNA gene sequencing and dominance of these particular genes were associated in Bacillus strains. These strains were also confirmed for the presence of antimicrobial peptide biosynthetic genes viz., srfAA (surfactin), fenD (fengycin), spaS (subtilin), and ituC (iturin) related to secondary metabolite production (e.g., AMPs). Overall, the results suggested that application of potential bacterial strains like B. amyloliquefaciens UASBR9 not only helps in control of the biological suppression of one of the most devastating rice pathogens, M. grisea but also increases plant growth along with a reduction in application of toxic chemical pesticides.
Koo, Sung Cheol;Choi, Man Soo;Chun, Hyun Jin;Shin, Dong Bum;Park, Bong Soo;Kim, Yul Ho;Park, Hyang-Mi;Seo, Hak Soo;Song, Jong Tae;Kang, Kyu Young;Yun, Dae-Jin;Chung, Woo Sik;Cho, Moo Je;Kim, Min Chul
Molecules and Cells
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제27권5호
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pp.563-570
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2009
We previously isolated the OsCBT gene, which encodes a calmodulin (CaM)-binding protein, from a rice expression library constructed from fungal elicitor-treated rice suspension cells. In order to understand the function of OsCBT in rice, we isolated and characterized a T-DNA insertion mutant allele named oscbt-1. The oscbt-1 mutant exhibits reduced levels of OsCBT transcripts and no significant morphological changes compared to wild-type plant although the growth of the mutant is stunted. However, oscbt-1 mutants showed significant resistance to two major rice pathogens. The growth of the rice blast fungus Magnaporthe grisea, as well as the bacterial pathogen Xanthomonas oryzae pv. oryzae was significantly suppressed in oscbt-1 plants. Histochemical analysis indicated that the hypersensitive-response was induced in the oscbt-1 mutant in response to compatible strains of fungal pathogens. OsCBT expression was induced upon challenge with fungal elicitor. We also observed significant increase in the level of pathogenesis-related genes in the oscbt-1 mutant even under pathogen-free condition. Taken together, the results support an idea that OsCBT might act as a negative regulator on plant defense.
Panicle blight and seed rot disease caused mainly by Burkholderia glumae and Burkholderia gladioli is threatening rice cultivation worldwide. The bacteria have been reported as seed-borne pathogens from rice. Accurate detection of both pathogens on the seeds is very important for limiting the disease dissemination. Novel primer pairs targeting specific molecular markers were developed for the robust detection of B. glumae and B. gladioli. The designed primers were specific in detecting the target species with no apparent cross-reactions with other related Burkholderia species at the expected product size. Both primer pairs displayed a high degree of sensitivity for detection of B. glumae and B. gladioli separately in monoplex PCR or simultaneously in duplex PCR from both extracted gDNA and directly preheated bacterial cell suspensions. Limit of detection was as low as 0.1 ng of gDNA of both species and $3.86{\times}10^2cells$ for B. glumae and $5.85{\times}10^2cells$ for B. gladioli. On inoculated rice seeds, the designed primers could separately or simultaneously detect B. glumae and B. gladioli with a detection limit as low as $1.86{\times}10^3cells$ per rice seed for B. glumae and $1.04{\times}10^4cells$ per rice seed of B. gladioli. The novel primers maybe valuable as a more sensitive, specific, and robust tool for the efficient simultaneous detection of B. glumae and B. gladioli on rice seeds, which is important in combating rice panicle blight and seed rot by early detection and confirmation of the dissemination of pathogen-free rice seeds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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