Hamzah, Haider M.;Salah, Reyam F.;Maroof, Mohammed N.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권10호
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pp.1654-1663
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2018
Finding a safe and broad-spectrum medication is a goal of scientists, pharmacists, and physicians, but developing and fabricating the right medicine can be challenging. The current study describes the formation of silver nanoparticles (AgNPs) by Fusarium mangiferae. It involves the antibiofilm activity of the nanoparticles against Staphylococcus aureus. It also involves cytotoxic effect against mammalian cell lines. Well-dispersed nanoparticles are formed by F. mangiferae. The sizes of the nanoparticles were found to range from 25 to 52 nm, and UV-Vis scan showed absorption around 416-420 nm. SEM, TEM, and AFM results displayed spherical and oval shapes. Furthermore, the FTIR histogram detected amide I and amide II compounds responsible for the stability of AgNPs in an aqueous solution. AgNPs were observed to decrease the formation of biofilm at 75% (v/v). DNA reducing, smearing, and perhaps fragmentation were noticed after treating the bacterial cells with 50% (v/v). Additionally, cell lysis was detected releasing proteins in the supernatant. It was also observed that the AgNPs have the ability to cause 59% cervical cancer cell line (HeLa) deaths at 25% (v/v), however, they showed about 31% toxicity against rat embryo fibroblast transformed cell lines (REF). The results of this study prove the efficiency of AgNPs as an antibiofilm against S. aureus, suggesting that AgNPs could be an alternative to antibiotics. It must also be emphasized that AgNPs displayed cytotoxic behavior against mammalian cell lines. Further studies are needed for assessing risk in relation to the possible benefit of prescribing AgNPs.
Lee, Se Jeong;Kim, Hyun-Wook;Na, Ji Eun;Kim, DaSom;Kim, Dai Hyun;Ryu, Jae Ryun;Sun, Woong;Rhyu, Im Joo
Applied Microscopy
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제48권3호
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pp.55-61
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2018
The synaptic vesicle is a specialized structure in presynaptic terminals that stores various neurotransmitters. The actin filament has been proposed for playing an important role in mobilizing synaptic vesicles. To understand the role of actin filament on synaptic vesicle pooling, we characterized synaptic vesicles and actin filament after treatment of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) or Latrunculin A on primary cultured neuron from rat embryo hippocampus. Western blots revealed that BDNF treatment increased the expression of synapsin I protein, but Latrunculin A treatment decreased the synapsin I protein expression. The increased expression of synapsin I after BDNF disappeared by the treatment of Latrunculin A. Three-dimensional (3D) tomography of synapse showed that more synaptic vesicles localized near the active zone and total number of synaptic vesicles increased after treatment of BDNF. But the number of synaptic vesicle was 2.5-fold reduced in presynaptic terminals and the loss of filamentous network was observed after Latrunculin A application. The treatment of Latruculin A after preincubation of BDNF group showed that synaptic vesicle number was similar to that of control group, but filamentous structures were not restored. These data suggest that the actin filament plays a significant role in synaptic vesicles pooling in presynaptic terminals.
인간의 태반성 성선자극 호르몬(HCG) 또는 성선자극 호르몬-방출 호르몬 유도체(GnRH-a) 단독 주사와 HCG+GnRH-a, GnRH-a+prostaglandin E sub(2) (PGF sub(2)), GnRH-a+pimozide를 복합적으로 주사하여 성숙한 암컷 쏘가리에서 배란 유도 실험을 하였다. 호르몬과 유도체의 반응 효과는 배란후 인공 수정하여 수정율과 배체형성율을 측정하여 결정하였다. 일반적으로 GnRH-a 실험군이 HCG 실험군에 비해서 수정율과 배체형성율 및 부화율이 높았다. HCG(5,000 IU/kg)+(GnRH-a(10 ${\mu}$g), GnRH-a(10 ${\mu}$g/kg)+PG$F^2$(500 ng/kg) 및 GnRH-a(10 ${\mu}$g/kg)+pimozide(1-5 mg/kg)에서 89% 이상의 높은 부화율을 보였다. 본 연구에서 사용된 성성숙 호르몬과 자극물질로 처리된 모든 암컷에서 배란이 유도되었지만, HCG+GnRH-a+dopamine과 GnRH-a+PG$F_2$+indometacin 처리군에서는 배란이 억제되었다. 이들의 결과는 산란시기에 여러 가지 성성숙 호르몬과 관련된 호르몬과 성성숙 억제물질(GRIF)이 분비된다는 점을 시사한다.
Kim, Young Sook;Cho, Yong Wan;Lim, Hye-Won;Sun, Yonghua
한국응용과학기술학회지
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제39권3호
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pp.442-453
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2022
다양한 동물 모델이 인간 질병, 의약품의 효능 및 작용 메커니즘을 연구하는 데 사용되고 있다. Zebrafish(Danio rerio)는 여러 가지 장점이 있어 인간 질병에 대한 중개 연구의 모델로 점점 더 폭넓게 활용되고 있다. 본 논문은 Pubmed, Google Scholar, Scopus에서 2020년 12월까지 최근 10년간 zebrafish 모델, 천연물(한약), in vivo 스크리닝의 키워드를 사용하여 저널에 게재된 논문을 검토하여 필요한 정보를 얻었다. 이 리뷰에서 우리는 천연물(한약) 연구에 대한 다양한 제브라피쉬 질병 모델의 최근 경향에 대해 논의하였다. 특히, 암, 안질환, 혈관 질환, 당뇨병 및 합병증, 피부질환에 중점을 두었고, zebrafish 배아를 사용하여 이들 질병에 대한 의약품의 분자 작용 메커니즘에 관해 언급하였다. Zebrafish는 실험실에서 임상 연구까지의 격차를 줄이는 데 중추적 역할을 할 수 있는 중요한 동물 모델이다. Zebrafish는 의약품이나 화장품 개발, 질병의 병인론을 이해하기 위해 사용되고, 이로 인해 생의학 연구에서 설치류의 사용을 줄이는 데 크게 기여하고 있다.
포유류에서 옥시토신은 다양한 기능을 가지고 있는 신경뇌하수체 호르몬이다. 옥시토신은 주로 젖의 분비를 일으키고 분만 시 자궁의 수축 및 모성 행동과 관계가 있다. 모성 행동은 스트레스에 의해 억압을 받으며 옥시토신에 의해 촉진된다. 본 연구는 제왕절개의 스트레스와 자궁내 옥시투여에 따른 모성 행동의 변화를 알아보기 위해 수행되었다. 본 실험 결과, 자연 분만 예에서 스트레스를 준 개체와 스트레스를 주지 않은 개체에서 새끼의 생존율을 비교한 결과, 스트레스를 준 군에서 새끼의 생존율이 낮아 스트레스가 모성 행동에 영향을 미친다는 것을 확인하였다. 제왕절개 수술을 실시한 예에서 옥시토신을 투여한 군은 마취의 회복 후 일정 시간이 경과한 다음 새끼를 잡아먹는 식자증이 나타난 반면, 옥시토신을 투여한 군에서는 마취에서 회복한 다음 곧바로 새끼를 확인한 다음 살해하는 행동을 보였다. 결과적으로 새끼를 관리하고자 하는 모성 행동을 발현하기 위해서는 말초에 옥시토신을 투여하는 것은 의미가 없다는 것을 확인하였으며, 분만 시 모체에 대한 스트레스는 새끼의 관리에 좋지 않은 영향을 미친다는 것을 확인하였다. 또한, 본 실험은 랫드를 대상으로 제왕절개라는 새로운 스트레스의 실험적 이용, 임상적으로 제왕절개시 수행하는 자궁 내 옥시토신 투여의 임상적 평가, 그리고 제왕절개 수술을 실시한 다음 마취 회복 후 새끼를 탐색하는 모성 행동관찰의 요인을 추가한 새로운 실험이라는데 의의가 있다.
Objectives : this study was to access the effect of Hyeonggaeyeongyotang water extracts, a polyherbal formula has been used as folk medicine, on the fertility and early embryonic development of male and female Wistar rats when administered by oral gavage. Methods : In male rats, Hyeonggaeyeongyotang extract were dosed 4 weeks before pairing and 2 weeks after mating including the mating periods up to termination after necropsy of the majority of the females. In female rats, they were dosed 2 weeks before pairing, and from Day 0 to Day 7 of gestation. This study was conducted in accordance with the recommendations of the KFDA Guideline [2005-60] for Detection of Toxicity to Reproduction for Medicinal Products. Results: 1. No Hyeonggaeyeongyotang extract treatment-related changes on the clinical signs and mortalities, the Food consumptions, the Body weights and gains were demonstrated in all dosed levels tested in this study except for 500ml/kg-dosing male group in which a significant(p<0.05) increase of body gains was detected during day 0-7 after dosing. 2. No Hyeonggaeyeongyotang extract treatment-related changes on the pre-coital intervals, the estrus cycles, the mating index, conception rate and fertility index were demonstrated in all dosed levels tested in this study. 3. No Hyeonggaeyeongyotang extract treatment-related gross findings on reproductive organs, the weights of reproductive organs, histopathological findings on reproductive organs, the corpora lutea number, implantation site number, live fetus number, number of resorpted embryo and pre-and post-implatation loss were demonstrated in all dosed levels tested in this study. Conclusions : Base on the results, it is considered that the NOAEL (No-Observed-Adverse-Effect Level) for fertility and early embryonic development toxicity of Hyeonggaeyeongyotang extract was under 2000ml/kg/day in Wistar male and female rats because there no treatment-related changes on the fertility and early embryonic developmental index were demonstrated in all dosed levels tested.
외인성 성선자극 호르몬에 의한 과배란처리는 난모세포의 질, 수정, 배발달, 착상, 임신유지 등에 해로운 영향을 수반하는 광범위한 배란전후의 호르몬 분비이상을 야기한다. 최근 본 연구에서 흰쥐에서의 IGF-1이 착상전 및 자궁의 환경적 조절에 미치는 잠재적 역할을 확인하였다. 그 결과는 IGF-1이 아마도 탈락막의 조절과 배발달에 적합한 자궁환경유지에 중요한 역할을 수행한다는 것을 보여주었다. 과배란후 배의 손실과 착상의 실패는, 본 연구에서 관찰되었듯이 부분적인 자궁내 IGF-1의 작용저해에 기인하리라 사료된다. 또한 본 연구진들은 생쥐의 배에서 염색체 이상빈도에 대한 과배란을 유도하는 성선자극 호르몬의 영향에 대한 연구를 수행하였다. PMSG 5, 10 및 15 I.U.를 투여하여 과배란된 생쥐에서 생쥐의 수정란과 8-16 세포기 배의 염색체 분석을 실시하였다. 이수체(aneuploidy), 다배체(polyploidy) 또한 염색체의 구조적 이상은 4개군에서 관찰되었따. 그러나 다배체만이 과배란과 상관관계가 있엇따. PMSG 10, 15 I.U. 처리군에서 다배체 발생율은 각각 2.9%와 10.5%였다. 더욱이 PMSG 용량에 따른 배의 다배체 발생빈도 사이에는 투여량에 따른 상관관계가 확인되었다(P<0.0001). 과배란과 성선자극호르몬은 양의 상관관계가 있었으며 염색체와 과배란의 정도에는 투여량에 따른 상관관계가 있었다. 과배란된 난모세포의 발달 잠재력은 모축의 내분비적 환경뿐만 아니라 생존에 필요한 내인성 요인들 즉 유전적 상태 그리고 난자의 전체적 성숙등에 연관되어 있다고 사료된다.
Antioxidants and antioxidants with somatic cell co-culture, bovine oviduct epithelial cells(BOEC) and buffalo rat liver cells(BRLC), were studied as a mean of increasing the development and intracellular glutathione(GSH) concnetrations of bovine embryos derived from in vitro matured(IVM) and in vitro fertilized(IVF) oocytes. Cell numbers and intracellular GSH concentrations of blastocysts were also counted. The developmental rate beyond morula stages in CRlaa containing taurine(2.5mM), superoxide dismutase(SOD, 600U) and catalase(250U) were 1%, 75.0%, 64.8% and 62.3%, respectively. The developmental rate in antioxidant groups was significantly higher than in control(P<0.05). The intracellular GSH concentrations of blastocysts cultured in 0, 2.5mM taurine, 600U SOD and 250U catalase were 33.8pM, 39.3pM, 42.3pM and 54.8pM, respectively. This result indicated that the developmental rates and intracellular GSH concentrations of catalase group was significantly higher than any other groups(P<0.05). The developmental capacity in CRlaa plus various antioxidants co-cultured with BOEC were 55.3%(control), 74.1%(2.5mM taurine), 66.7%(600U SOD) and 70.7%(250U catalase) and in CRlaa plus various antioxidants co-cultured with BRLC in control, 2.5mM taurine, 600U SOD and 250U catalase were 63.8%, 75.5%, 71.0% and 73.5%, respectveily, the intracellular GSH concentrations of blastocyst embryos co-cultured with BOEC and BRLC in CRlaa with 0.25mM taurine, 600U SOD and 250U catalase were 73.4pM and 64.4pM, 79.9pM and 67.5pM, 82.3pM and 71.7pM, and 83.0pM and 80.0pM, respectively. Cell numbers of blastocysts were not difference in all experimental groups. These studies indicate that andtioxidants and antioxidant with somatic cell co-culture can increase the proportion of embryo that developed into morula and blastocysts, and the intracellular GSH concentrations of blastocyst embryos.
Dental implants have been developed for enhancement of osseointegration. Biocompatibility, bone affinity and surface characteristics of dental implants are very important factors for osseointegration. The aim of the present study was to determine the cytotoxicity and the bone affinity of titanium phosphide(Ti-P) implant material. The Ti-P surface was obtained by vacuum sintering of titanium within compacted hydroxyapatite powder. The composition and the chemical change of the surface were determined by Auger electron spectroscopy. The in vitro cytotoxicity was evaluated by the viability of the bone cells and macrophages obtained from chicken embryo and rat,s peritonium, respectively. For the comparative evaluation, 316L stainless steel, commercially pure titanium and Ti-P materials, prepared in size of 1O.0mm in diameter and 5.0mm in height, were immersed separately in bone cells and macrophages for 10 days. For the evaluation of the in vivo bone affinity, 316L stainless steel, commercially pure titanium and Ti-P materials, prepared in size of 5.0mm in diameter and 10.0mm in length, were implanted after drilling in diameter 5.5mm in femurs of 2 dogs weighing 10Kg more or less. Six weeks after implantation the specimens were prepared for histopathological examination and were observed under light microscope. In comparison of in vitro bone cell viability, Ti-P and commercially pure titanium groups were not significantly different from control group (p>O.1), but 316L stainless steel group was significantly lower than control group(p<0.05). There was no statistical difference in the viability of macrophages between 3 different groups and control group(p>O.l). In comparison of in vivo study, 316L stainless steel and commercially pure titanium showed fibrous encapsulation, but Ti-P showed remarkable new bone formation without any fibrous tissue. The results demonstrate that Ti-P has favorable biocompatibility and bone affinity, and suggest that dental implants with Ti-P surface may enhance osseointegration.
The present study focused on establishing the effects of interferon-gamma (IFN-${\gamma}$) on interleukin-18 (IL-18) expression patterns and pregnancy outcomes in pregnant rats. Pregnant rats at the post-implantation stage were randomized into control, low IFN-${\gamma}$ (L-IFN-${\gamma}$) and high IFN-${\gamma}$ groups (H-IFN-${\gamma}$) that received normal saline, 100 IU/g of IFN-${\gamma}$ and 500 IU/g of IFN-${\gamma}$ vaginal muscular injection, respectively. The effects of IFN-${\gamma}$ on IL-18 expression and pregnancy outcomes were assessed systematically using several methods, including immunohistochemistry streptavidin-perosidase (SP), image pattern analysis, enzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA), whole blood count (WBC) count, microscopy and visual observation. IL-18 was detected in the uteri of all pregnant rats, and mainly distributed in the endometrium, decidual cells, vascular endothelium and myometrium. Immunohistochemistry and image pattern analyses revealed significantly lower IL-18 expression in the H-IFN-${\gamma}$ group compared to the L-IFN-${\gamma}$ and control groups (p<0.01), indicating that high doses of IFN-${\gamma}$ induce downregulation of IL-18 in the uterus of pregnant rats. ELISA results disclosed that IL-18 expression in peripheral blood of the H-IFN-${\gamma}$ group was lower than that of the L-IFN-${\gamma}$ group (p<0.05), and significantly reduced compared to the control group (p<0.01). Moreover, the number of peripheral leukocytes in the H-IFN-${\gamma}$ group was significantly higher than those in the control and L-IFN-${\gamma}$ groups (p<0.01). Morphology analysis showed no evident differences between the L-IFN-${\gamma}$ and control groups. However, for the H-IFN-${\gamma}$ group, uterine mucosa bleeding, necrosis and excoriation were observed using microscopy. Visual observation revealed marroon, swelling, crassitude and no embryo in the uterus, which are obvious indicators of abortion. These results indicate that IFN-${\gamma}$ plays a regulatory role in IL-18 expression in the uterus and peripheral blood of pregnant rats at the post-implantation stage. Moreover, high levels (500 IU/g) of IFN-${\gamma}$ influence normal pregnancy at the early stages in rats by downregulating IL-18 expression in the uterus and peripheral blood and increasing the number of peripheral leukocytes, consequently triggering termination of pregnancy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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