The effect of some phytohormones and light on the growth, ADC activity and polyamine content in ginseng was studies. In seedlings, the growth, ADC activity and putrescine content were in creased by Ghs treatment. ADC activity ann putrescine content were slightly slightly derreased by ABA, but not changed by kinetin. Light treatment increased ADC activity and putrescine content greatly. In two year ginseng leaves treated by GA3, the ADC actin$.$its reached maximum and the spermidine content reached maximum 2 days faster than in the control. Thtse results suggest the possibility that these regulators are closely related to growth and polyamine cotent. UeVo'ordsEPanaxgineng C.A. Meyer, Polyamine, Putrescine spermidine, arginine decarboxylose, GA3 kiiletin , ABA.
Garcia-Fernandez, Antonio J.;Rodriguez, Rosa A.;Perez-Pertejo, Yolanda;Balana-Fouce, Rafael
Molecules and Cells
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제20권1호
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pp.127-135
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2005
The uptake of putrescine, spermidine and spermine by Fortner's hamster amelanocytic melanoma AMEL-3 cells was observed in this study to be time-dependent, temperature-sensitive, pH-dependent and saturable. Metabolic poisons nullified polyamine uptake, an indication that this is an energy-requiring mechanism. The presence of $Na^+$ ions was found to be requisite to full activity. Valinomycin, gramicidin, monensin and the calcium ionophore calcimycin were also observed to inhibit the process substantially. The transporter active site would seem to contain sulfhydryl groups. Other diamines and polyamine analogues, as well as cationic diamidines, suppressed putrescine uptake. The presence of the ornithine decarboxylase inhibitor DFMO in the culture medium induced putrescine inflows. Putrescine, in turn, induced the negative expression of the carrier, thus suggesting that this influx mechanism is governed by up/down regulation. The cationic diamidine CGP 40215A and its analogue CGP039937A competitively inhibited putrescine transport, with Ki values of 1.9 and $15{\mu}M$, respectively. The role of polyamine uptake in these cultures is discussed.
To study the compensatory aspect of putrescine biosynthetic enzyme n tobacco suspension cultured cells, we examined the contents of the cellular polyamines and the activities of arginine decarboxylase (ADC, EC 4.1.1.19) and ornithine decarboxylase (ODC, EC 4.1.1.17) in the tobacco suspension cells treated with $\alpha$-difluoromethyl arginine (DFMA) or $\alpha$-difluoromethyl ornithine (DFMO). In the untreated cells, the content of the cellular putrescine was decreased during the first 3 hours and then subsequently increased. However, the content of the cellular spermidine and spermine remained constant during the incubation time. While ADC activity increased after 6 hours, ODC activity decreased following the rapid increase until 6 hours. DFMA induced the decrease in the contents of putrescine and spermidine, and the increase in that of spermine. It also caused the inhibition of ADC and ODC activities throughout the incubation time. DFMO produced the stimulation of ADC activity about 2 times of untreated cells and the decrease in the content of putrescine about 50% of them at 12 hour. The application of putrescine or cycloheximide prevented the increase of ADC activity by DFMO but that of actinomycin-D did not show any detectable effect. The stimulation of ADC activity by DFMO in tobacco suspension cultured cells was probably due to the enhancement of de novo synthesis for ADC protein, which might be regulated in the translation step by the content of the cellular putrescine.
The effects of two natural polyamines (putrescine and spermidine) on the synthesis of ArcA, a response regulator of the Arc two-component signal transduction system, were studied using an E. coli mutant deficient in polyamine biosynthesis. Endogenous polyamine deficiency of the mutant resulted in marked reduction in the ArcA level determined by Western blot analysis. Putrescine supplement to the growth medium effectively increased the ArcA level of the mutant in a concentration-dependent manner. Spermidine also stimulated the ArcA level in the mutant to a greater degree than putrescine. Expression of arcA'::lacZ operon fusion in the mutant was stimulated 6-fold and 10-fold by putrescine and spermidine at a 1mM concentration, respectively, indicating that the stimulatory effect of the polyamines on ArcA synthesis is due to transcriptional induction, and that spermidine is a more potent arcA inducer than putrescine. The polyamine-dependent arcA'::lacZ induction was growth-phase-dependent and independent of either arcA or fnr which are two regulators involved in anaerobic stimulation of the Arch level. These results suggested that putrescine and spermidine polyamines may be potential intracellular signal molecules in the control of arcA expression, and thereby may play an important role in cellular metabolism.
Exogenous polyamines are able to induce life span and improve glucose homeostasis and insulin sensitivity. However, the effects of exogenous polyamines on adipocyte differentiation and which polyamine transporters mediate them have not been elucidated yet. Here, we identified for the first time that exogenous polyamines can clearly stimulate adipocyte differentiation through polyamine transporters, solute carrier family 3 member A2 (SLC3A2) and SLC7A1. Exogenous polyamines markedly promote 3T3-L1 adipocyte differentiation by increasing the intracellular lipid accumulation and the expression of both adipogenic and lipogenic genes in a concentration-dependent manner. In particular, exogenous putrescine mainly regulates adipocyte differentiation in the early and intermediate stages. Moreover, we have assessed the expression of polyamine transporter genes in 3T3-L1 preadipocytes and adipocytes. Interestingly, the putrescine-induced adipocyte differentiation was found to be significantly suppressed in response to a treatment with a polyamine transporter inhibitor (AMXT-1501). Furthermore, knockdown experiments using siRNA that specifically targeted SLC3A2 or SLC7A2, revealed that both SLC3A2 and SLC7A2 act as important transporters in the cellular importing of exogenous putrescine. Thus, the exogenous putrescine entering the adipocytes via cellular transporters is involved in adipogenesis through a modulation of both the mitotic clonal expansion and the expression of master transcription factors. Taken together, these results suggest that exogenous polyamines (such as putrescine) entering the adipocytes through polyamine transporters, can stimulate adipogenesis.
본 연구는 polyamine이 쪽 모상근 배양에서 뿌리의 생장과 indigo 생합성에 미치는 영향을 조사하였다. 1. 토양미생물인 Agrobacterium rhizogenes R1000을 이용하여 쪽 자엽으로부터 모상근을 효과적으로 유도하여 배양하였다. 2. 모상근 생장과 인디고 생합성이 polyamines(putrescine, spaermidine, spermine) 처리에 의하여 향상되었으며, 그 중 putrescine이 다른 polyamines에 비하여 효과적이었다. 3. Putrescine 70 mg/l 처리가 모상근의 생육(4.4 g/flask)과 인디고 생합성(216.3 ug/g)의 향상에 최적조건으로 조사되었다.
Exogenous putrescine of 0.5 mM or higher concentratons applied during a 16 h inductive dark period could elevate putrescine content in cotyledons of Pharbitis nil Choisy cv. Violet, a short-day plant, resulting in complete blocking of photoperiodic floral induction. Titers of putrescine, spermidine and spermine in the cotyledons were traced throughout a 16 h dark period. While non-induced cotyledons under continous light slightly increased levels of polyamines, induced tissue maintaiend its putrescine, spermidine and spermine levels as low as 66.4%, 60.9% and 84.9% of non-induced levels respecitvely. Endogenous polyamines kept at lower levels in the inductive dark period were found to upsurge by a night break treatment of 10 min light in the middle of the dark and consequently the inductive dark effect was canceled. Elevation of polyamine titers could also be induced by 100 $\mu$L/L ethylene treatment which completely suppressed floral induction. Compared to untreated cotyledons, ehtylene-treated tissues increased putrescine content by as much as 136.5% in 12 h and spermidine level by up to 130.1% in 8 h. Ethylene-treated cotyledons not only increased endogenous polyamine content but also liberate ethylene in the second half of the inductive dark period accumulating up to three to fourfold level supporting a hypothesis that ethylene-treated tissues are stimulated to produce ethylene which in turn accelerates polyamine biosynthesis in the tissues. It is postulated that substantially low polyamine titers in the inductive dark period would be one of the necessary factors controlling photoperiodic induction of flowering in Pharbitis nil and the inhibitory effects of night break and exogenous ethylene treatment may be atributed to their action to stimulate endogenous polyamine production.
Specific activities of ADC and ODC from 2-4 year old ones were higher than that from seedlings whereas those activities were not changed significantly from 2 to 4 years. Generally, activity of ADC was predorminant compared to that of ODC. Free arginine content in roots was much higher than that of leaves. And arginase specific activity from roots was higher than that of leaves. Cumulative results suggest that putrscine formation from ornithine in roots may be more effective than leaves and contribute to putrescine biosynthesis to some extract.
De Las Rivas Blanca;Carrascosa Alfonso V.;Munoz Rosario
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권3호
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pp.408-413
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2007
Putrescine has a negative effect on health and is also used as an indicator of quality on meat products. We investigated the genes involved in putrescine production by Serratia liquefaciens IFI65 isolated from a spoiled Spanish dry-cured ham. We report here the genetic organization of its ornithine decarboxylase encoding region. The 5,506-bp DNA region showed the presence of three complete and two partial open reading frames. Putative functions have been assigned to several gene products by sequence comparison with proteins included in the databases. The second gene putatively coded for an ornithine decarboxylase. The functionality of this decarboxylase has been experimentally demonstrated by complementation to an E. coli defective mutant. Based on sequence comparisons of some enterobacterial ornithine decarboxylase regions, we have elaborated a hypothetical pathway for the acquisition of putrescine biosynthetic genes in some Enterobacteriaceae strains.
Recently, many researches for plant alkaloids, one of the largest groups of natural products, are reported because of their various pharmacological activity. This study was carried out to clone putrescine N-methyltransferase (PMT) gene which is a key enzyme in diverting polyamine metabolism towards the biosynthesis of nicotine and related alkaloids from Burley tobacco. To induce expression of PMT gene in tobacco plant, the floral meristem was removed and then mRNA was purified from root. cDNA encoding PMT gene was isolated by RT PCR and cloned. Three different groups of clones were screened by PCR and restriction enzyme digestion analysis and were characterized. The data of these screening revealed that three types of PMT are present in Burley tobacco. Comparison of the nucleotide sequence of this three genes encoding putative PMT with those of other tobaccos revealed that two types of PMT are newly discovered from Nicotiana tabacum cv. Br21 tobacco and they were same as PMT2, PMT3 of N. tabacum cv. Xanthi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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