It has been known that the proteome profiles in the period of growth and development of rice are changed by the growth conditions including temperature, soil, and fertilization. In this study, the proteome profiles of Odae polished white rice grown in Chulwon and Chilgog were compared on 2-dimensional(D) gels. The differentially expressed proteins were selected from the 112 identified total proteins and classified into functional groups. The most significantly differentially expressed proteins were stress responsive proteins; Ent-kaur-16-ene synthase, which is responsible for synthesizing a plant hormone gibberellin, was expressed in Chulwon rice and heat shock proteins were in Chilgog rice, respectively. Xylanase inhibitor protein, which inhibits the enzyme xylanase produced by pathogenic fungi and Bacilli, was expressed significantly high in Chilgog rice grown at high temperature. Differential expressions of transporter proteins were observed both in Chulwon and Chilgog rice. Regarding the facts that Chilgog rice contained relatively higher amount of proteins than Chulwon rice and Chulwon rice showed large number of proteins were differentially expressed, it can be concluded that different cultivation conditions could change the protein expression profiles in rice in various ways, including elevation of protein amount or differential expressions of specific proteins, etc. The results suggest that the characteristics of the profiles of the proteome in the polished white rice are definitely changed by the environmental factors including high temperature. The results can be utilized for the development of the proper cultivation conditions for the production of high quality rice with good palatability.
Development of the fourth-instar larvae of Chironomus riparius has a sensitive to ecdysteroid hormones. The 2D/E gel analysis for polypeptide expression reflecting early-ecdysterone inducible gene has conducted the emerged female from larval phase exposure to bisphenol A (BPA). In the 2D/E gel 1108 protein spots were identified. The visualized protein spots allowed extraction of 17 protein spots differed more than 3 fold in BPA treated animals, which was approximately $1.6\%$ of the total protein spots. However, polypeptide expression reflecting early-ecdysterone inducible gene didn't change after treatments. In addition, detection for the damages or changes in mitogenome level was observed. The conserved cytochrome oxidase I in DNA level affected exposure to BPA $(1{\mu}gL^{-1})$ in this preliminary study.
Ghosh, Ritesh;Choi, Bosung;Kwon, Young Sang;Bashir, Tufail;Bae, Dong-Won;Bae, Hanhong
The Plant Pathology Journal
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v.35
no.6
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pp.609-622
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2019
Sound vibration (SV) treatment can trigger various molecular and physiological changes in plants. Previously, we showed that pre-exposure of Arabidopsis plants to SV boosts its defense response against Botrytis cinerea fungus. The present study was aimed to investigate the changes in the proteome states in the SV-treated Arabidopsis during disease progression. Proteomics analysis identified several upregulated proteins in the SV-infected plants (i.e., SV-treated plants carrying Botrytis infection). These upregulated proteins are involved in a plethora of biological functions, e.g., primary metabolism (i.e., glycolysis, tricarboxylic acid cycle, ATP synthesis, cysteine metabolism, and photosynthesis), redox homeostasis, and defense response. Additionally, our enzyme assays confirmed the enhanced activity of antioxidant enzymes in the SV-infected plants compared to control plants. Broadly, our results suggest that SV pre-treatment evokes a more efficient defense response in the SV-infected plants by modulating the primary metabolism and reactive oxygen species scavenging activity.
The reproduction of animals is a means to maintain their species. The golden hamsters are seasonal breeders, and their reproduction is regulated by the photoperiod. The shifts of the sexual functions imply the changes of the protein expression, and those are reflected by the proteome. Thus the present study was to examine via two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2d PAGE), the physiological changes and the alterations of protein expressions in hypothalamus upon the reproductive situation related to the pineal gland. Among the pineal intact animals, the reproductive functions were sustained in animals housed in long photoperiod (LP) but regressed in animals housed in short photoperiod. And those pinealectomized animals showed high sexual activities regardless of photoperiod. Ultimately they were branched into dichotomy, sexually active and inactive animals. Apart from the changes of physiological parameters upon the reproductive conditions, there were obvious differences in proteins extracted from the hypothalamus. The hypothalamus of LP animals presented high levels of enzymes which are involved in the production of energy, glycolysis and Krebs cycle. The increased energy might be related to the GnRH synthesis in hypothalamus and indirectly to the constant cell divisions in spermatogenesis. Taken together, the impacts of the photoperiodic information controlling reproduction could be observed through 2d PAGE. Therefore, the present results suggest the potential of biomarkers collectively to diagnose the fertility and the infertility by way of proteomics in organs with regard to the reproductive system, further could be applied to diagnose various diseases.
Paenibacillus polymyxa E681 is known to be able to suppress plant diseases by producing antimicrobial compounds and to promote plant growth by producing phytohormones, and secreting diverse degrading enzymes. In spite of these capabilities, little is known regarding the flow of information from the bacterial strain to the barley roots. In an attempt to determine the flow of information from the bacterial strain to barley roots, the strain was grown in the presence and absence of barley, and two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and MALDI-TOF mass spectrometry were used. 2D-PAGE detected approximately 1,000 spots in the cell and 1,100 spots in the supernatant at a pH 4-10 gradient. Interestingly, about 80 spots from each sample showed quantitative variations. Fifty-three spots from these were analyzed by MALDI-TOF mass spectrometry and 28 proteins were identified. Most of the cytosolic proteins expressed at higher levels were found in P. polymyxa E681 cells grown in the presence of barley rather than in the absence of barley. Proteins detected at a lower level in the surpernatant of P. polymyxa E68l cells grown in the presence of barley were lipoprotein, glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase, heat-shock protein HtpG, spermidine synthase, OrfZ, ribonuclease PH, and coenzyme PQQ synthesis protein, and flagellar hook-associated protein 2 whereas proteins detected at a higher level in the surpernatant of P. polymyxa E681 cells grown in the presence of barley included D-alanyl-D-alanine ligase A, isopentenyl-diphosphate delta-isomerase, ABC transporter ATP-binding protein Uup, lipase. Many of the proteins belonging to plant-induced stimulons are associated with biosynthetic metabolism and metabolites of proteins and transport. Some of these proteins would be expected to be induced by environmental changes resulting from the accumulation of plant-secreted substances.
Lee Myoung-Ro;Bae Song-Mee;Kim Tong-Soo;Lee Kwang-Jun
Journal of Microbiology
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v.44
no.4
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pp.375-382
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2006
From its initial colonization to causation of disease, Streptococcus pneumoniae has evolved strategies to cope with a number of stressful in vivo environmental conditions. In order to analyze a global view of this organism's response to heat shock, we established a 2-D electrophoresis proteome map of the S. pneumoniae D39 soluble proteins under in vitro culture conditions and performed the comparative proteome analysis to a 37 to $42^{\circ}C$ temperature up-shift in S. pneumoniae. When the temperature of an exponentially growing S. pneumoniae D39 culture was raised to $42^{\circ}C$, the expression level of 25 proteins showed changes when compared to the control. Among these 25 proteins, 12 were identified by MALDI-TOF and LC-coupled ESI MS/MS. The identified proteins were shown to be involved in the general stress response, energy metabolism, nucleotide biosynthesis pathways, and purine metabolism. These results provide clues for understanding the mechanism of adaptation to heat shock by S. pneumoniae and may facilitate the assessment of a possible role for these proteins in the physiology and pathogenesis of this pathogen.
In the previous study, we have isolated several vaginal lactobacilli from Korean woman and selected one of them (KLB12) for further study, which was indentified as Lactobacillus fermentum by sequence analysis of 16S rRNA gene. Formulated L. fermentum KLB12 can be used for ecological treatment of bacterial vaginosis. For pharmaceutical formulation, the spray-drying process is required where stress such as high temperature is routinely applied. In this study, we found that heat stress at 60$^{\circ}C$ for 20∼30min reduced the viable cell population of KLB12 by 10$\sub$6/~10$\sub$9/. However, adaptation of KLB12 cells at 52$^{\circ}C$ made them more thermotolerant upon exposure to 60$^{\circ}C$. The level of thermal protection in RSM (reconstituted skim milk) by adaptation in acid (pH 5), cold (4$^{\circ}C$), ethanol (3%), NaCI (0.3M) was also examined. Although not as efficient as the homologous stress, adaptations in both cold and NaCI gave considerable cross protection against heat stress. When chloramphenicol was added during heat adaptation, adaptation effect was abolished. This suggests that de novo protein synthesis is necessary during the adaptation process. Important changes in proteome during heat adaptation was examined with two-dimensional gel electrophoresis.
Roy, Swapan Kumar;Cho, Seong-Woo;Kwon, Soo Jeong;Kamal, Abu Hena Mostafa;Lee, Dong-Gi;Sarker, Kabita;Lee, Moon-Soon;Xin, Zhanguo;Woo, Sun-Hee
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.24-24
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2017
Heavy metals at toxic levels have the capability to interact with several vital cellular biomolecules such as nuclear proteins and DNA, leading to oxidative stress in plants. The present study was performed to explore the metal tolerance mechanism in Sorghum seedling. Morpho-physiological and metal ions uptake changes were observed prominently in the seedlings when the plants were subjected to different concentrations of $CuSO_4$ and $CdCl_2$. The observed morphological changes revealed that the plants treated with Cu and Cd displayed dramatically altered shoot lengths, fresh weights, and relative water content. In addition, the concentration of Cu and Cd was markedly increased by treatment with Cu and Cd, and the amount of interacting ions taken up by the shoots and roots was significantly and directly correlated with the applied level of Cu and Cd. Using the 2-DE method, a total of 24 and 21 differentially expressed protein spots from sorghum leaves and roots respectively, 33 protein spots from sorghum leaves under Cd stress were analyzed using MALDI-TOF/TOF MS. However, the over-expression of GAPDH plays a significant role in assisting Sorghum bicolor to attenuate the adverse effects of oxidative stress caused by Cu, and the proteins involved in resistance to stress helped the sorghum plants to tolerate high levels of Cu. Significant changes were absorbed in the levels of proteins known to be involved in carbohydrate metabolism, transcriptional regulation, translation and stress responses. In addition, the up-regulation of glutathione S-transferase and cytochrome P450 may play a significant role in Cd-related toxicity and stress responses. The results obtained from the present study may provide insights into the tolerance mechanism of seedling leaves and roots in Sorghum under heavy metal stress.
Proteome analysis was performed to identify proteins differentially expressed in an Arabidopsis mutant, ntm1-D. In this mutant the NAC transcription factor NTM1 is constitutively expressed and the resultant phenotypic changes include dwarfism, serrated leaves, and altered floral structures, probably due to reduced cell division. Marked elevation of proteins mediating environmental stress responses, including annexin, vegetative storage proteins, beta-glucosidase homolog 1, and glutathione transferases was observed. Overexpression of annexin was confirmed by RT-PCR and Western blotting. These observations suggest that the reduced growth observed in the ntm1-D mutant is caused by enhancement of its stress responses, possibly resulting in a cost in fitness.
A derivative of Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin (BCG) has been used for the preparation of tuberculosis vaccines. To establish a Korean tuberculosis vaccine derived from BCG-Pasteur $1173P_2$, genome sequencing of a BCG-Korea strain was completed by Joung and coworkers. A comparison analysis of the genome sequences of the BCG-Pasteur $1173P_2$ and BCG-Korea strains showed marginal increases in the total genome length (~0.05%) and the number of genes (~4%) in the BCG-Korea genome. However, how the genomic changes affect the BCG-Korea protein expression levels remains unknown. Here, we provide evidence of the proteomic alterations in the BCG-Korea strain by using a SWATH-based mass spectrometric approach (Sequential Window Acquisition of all THeoretical mass spectra). Twenty BCG proteins were selected by top-rank identification in the BCG proteome analysis and the proteins were quantified by the SWATH method. Thirteen of 20 proteins showing significant changes were enough to discriminate between the two BCG proteomes. The SWATH method is very straightforward and provides a promising approach owing to its strong reliability and reproducibility during the proteomic analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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