• 미생물학회지
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• 제47권2호
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• pp.130-136
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• 2011

러시아의 바이칼에 존재하는 고유종인 Baikalospongia과 Lubomirskia의 sponge로부터 방선균을 분리하였다. 분리된 방선균은 16S rRNA gene 분석 결과, Streptomyces griseoplanus, S. halstedii, S. violascens, S. flavovirens, S. microflavus에 각각 속하였다. 이 방선균들은 온도, 탄소이용, enzyme 활성, fatty acid 조성 등의 실험 결과에서, 각각 서로 다른 특징을 나타냈었다. 분리된 방선균의 배양온도는 30-37, pH는 8-9, 염분농도는 0-1.5에서 가장 잘 자라는 것으로 확인되었다. 주요 cellular fatty acid는 anteiso-$C_{15:0}$, iso-$C_{15:0}$ and iso-$C_{16:0}$로 나타났다. 특히 ATS-BA-19는 DNase와 chitinase 활성을 나타내었고, ATS-BA-16는 cellulase와 protease 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 또 두개의 분리된 방선균에서 그람음성 균주인 Pseudomonas aeruginosa에서 생장을 저해함을 확인하였다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제22권2호
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• pp.97-104
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• 1992

The purpose of this study was (i) to determine whether protease inhibition by medium chain fatty acids such as sodium caprate, sodium caprylate and sodium laurate led to suppression of insulin proteolysis over a range of insulin concentrations and (ii) elucidate preventing effect of the enhancers on molecular self-association of insulin in pH 7.4 phosphate buffer isotonic solution. To this end, the rate of insulin proteolysis in nasal tissue supernatants of the albino rabbits was determined in the presence of $0.1{\sim}2%$ sodium caprylate, sodium caprate and sodium laurate at insulin concentrations ranging from $5\;to\;100\;{\mu}M$. At fatty acid salts concentration lower than 0.5%, insulin proteolysis was accelerated but the enhancers of high concentration (>1%) reduced the rate of insulin proteolysis. These effects were dependent upon insulin concentration and chain length of fatty acid salts. Circular dichroism spectra of insulin solutions were then determined. Monomer fraction of insulin was increased with increasing sodium caprate. Therefore, half-life decrease of insulin at low concentrations of the enhancers was attributed to deaggregation of insulin by the enhancers, increasing the proportion of monomers available for nasal proteolysis. And the increase of half-life at high concentration of the enhancers was attributed to inhibitory effect on protease rather than the effect of monomer fraction.

• The Plant Pathology Journal
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• 제34권3호
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• pp.208-217
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• 2018

In this study, samples were collected from the leaves and stems of healthy wild Pistachio trees (Pistacia atlantica L.) from various locations of Baneh and Marivan regions, Iran. In total, 61 endophytic bacteria were isolated and grouped according to phenotypic properties. Ten selected isolates from each group were further identified by partial sequencing of the 16S rRNA gene. Based on the results, isolates were identified as bacteria belonging to Pseudomonas, Stenotrophomonas, Bacillus, Pantoea and Serratia genus. The ability of these isolates was evaluated to phytohormone production such as auxin and gibberellin, siderophore production, phosphate solubilization, atmospheric nitrogen fixation, protease and hydrogen cyanide production. All strains were able to produce the plant growth hormone auxin and gibberellin in different amounts. The majority of strains were able to solubilize phosphate. The results of atmospheric nitrogen fixation ability, protease and siderophore production were varied among strains. Only Ba66 could produce a low amount of hydrogen cyanide. The results of biocontrol assay showed that Pb78 and Sp15 strains had the highest and lowest inhibition effects on bacterial plant pathogens, Pseudomonas syringae pv. syringae Pss20 and Pseudomonas tolaasii Pt18 under in vitro condition. Pb3, Pb24 and Pb71 strains significantly promote root formation on carrot slices. To our knowledge this is the first report of the isolation of endophytic bacterial strains belonging to Pantoea, Bacillus, Pseudomonas, Serratia and Stenotrophomonas genus from wild pistachio trees with plant growth promoting potential and biocontrol activity.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제33권9호
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• pp.1487-1496
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• 2020

Objective: The objective of this study was to look for optimal preparation of hydrolysates of desalted duck egg white powder (DDEWP) by the three different proteases and to investigate their antioxidant and antimicrobial properties. Methods: DDEWP was hydrolyzed by three proteases, including pepsin (PEP), Bacillus spp. (BA) and natokinase (NAT) with three different enzyme concentrations (0.1%, 0.3%, and 0.5%), individually. The important key hydrolysis parameters such as hydrolysis degree, yield, antioxidant and antimicrobial activity were evaluated in this experiment. Results: The results showed that the degree of hydrolysis (DH) of all treatments increased with increasing hydrolysis time and protease concentrations. The antioxidant and antimicrobial activities of the hydrolysates were affected by type and concentration of protease as well as hydrolysis time. Hydrolysis of PEP significantly (p<0.05) obtained the highest yield of hydrolysates, however, both of BA and NAT showed substantially lower DH values and still did not exceed 5% by the end of hydrolysis. Among the different hydrolysates, PEP exhibited significantly higher 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity than BA and NAT. All DDEWP hydrolysates from PEP had low ferrous ion chelating activity (<37%) that was significantly lower than that of NAT (>37% to 92%) and BA (30% to 79%). Besides, DDEWP hydrolysates of PEP presented significantly higher reducing power than BA and NAT. In antimicrobial activities, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, and Pseudomonas aeruginosa were not effectively inhibited by any DDEWP hydrolysates of PEP except for Staphylococcus aureus. Especially, the excellent antibacterial activity against S. aureus only was displayed in DDEWP hydrolysates of PEP 0.1%. Conclusion: DDEWP hydrolysates from PEP demonstrated significantly better DH, yield, DPPH radical scavenging activity and reducing power, furthermore, had excellent inhibitory on S. aureus due to large clear zone and moderated inhibitory in bactericidal inhibition.

• 대한한의학회지
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• 제19권2호
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• pp.337-372
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• 1998

To evaluate the effects of Injinchunggantang-derivative on cell viability, cell cycle progression, and apoptosis, MTT assay, cell cycle analysis, Cpp32 protease assay, DNA fragnemtation assay, quantitative RT-PCR, and Western blotting were performed. The results were as followes. In MTT assay, etoposide+Injinchunggantang-derivative-treated cells as well as Injinchunggantang-derivative-treated cells showed higher viability than etoposide-treated cells with no time-concentration-dependence, which implied that Injinchunggantang-derivative has hepato-protective effect Cell cycle analysis showed that Injinchunggantang-derivative has no significant effect on the cell cycle. Cpp32 protease assav and DNA fragmentation assay Injinchunggantang-derivative carry inhibitory effects on apoptosis induction. It was suggested that Injinchunggantang-delivative might regulate the cell cycle, in particular $G_1$ checkpoint by blocking p53 and Watl pathway. Injinchunggantang-derivative inhibited the mRNA expressions of Cpp32, Fas, and Bcl-2, which could result in inhibition of apoptosis. These results imply that Injinchunggantang-derivative increases hepatocyte viability, and protects hepatocyte from damage by regulating the expression of genes associated with cell cycle and apoptosis, which explains the mechanism of the clinical effect of Injinchunggantang-derivative on liver diseases.

• 한국초지조사료학회지
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• 제43권1호
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• pp.56-61
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• 2023

The germination process is critical for plant growth and development and it is largely affected by environmental stress, especially salinity. Recently, hydrogen sulfide (H₂S) is well known to act as a signaling molecule in a defense mechanism against stress conditions but poorly understood regulating seed germination. In this study, the effects of NaHS (the H₂S donor) pretreatment on various biochemical (hydrogen peroxide (H₂O₂) content and amylase and protease activity) and physiological properties (germination rate) during seed germination of oilseed rape (Brassica napus L. cv. Mosa) were examined under salt stress. The seed germination and seedling growth of oilseed rape were inhibited by NaCl treatment but it was alleviated by NaHS pretreatment. The NaCl treatment increased H₂O₂ content leading to oxidative stress, but NaHS pre-treatments maintained much lower levels of H₂O₂ in germinating seeds under salt stress. Amylase activity, a starch degradation enzyme, significantly increased over 2-fold in control, NaHS pretreatment, and NaHS pretreatment under NaCl during seed germination compared to NaCl treatment. Protease activity was highly induced in NaHS-pretreated seeds compared to NaCl treatment, accompanied by a decrease in protein content. These results indicate that NaHS pretreatment could improve seed germination under salt stress conditions by decreasing H₂O₂ accumulation and activating the degradation of protein and starch to support seedling growth.

• 한국축산식품학회지
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• 제32권5호
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• pp.652-658
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• 2012

본 연구는 유단백질 유래 카제인염을 상업용 단백질가수분해 효소로 처리하여 효소의 종류와 가수분해 시간에 따른 ACE 저해효과를 살펴보고 주요 성인병인 고혈압의 예방을 위한 혈압강하 효과가 높은 가수분해물을 제조하고자 수행하였다. 카제인염을 6종의 단백질 분해효소로 기질대 효소비 1000:1로 첨가하여 8시간 가수분해했을 때 가수분해도는 2.54-4.25%로 나타났고, 다시 가수분해물을 기질대 효소비 500:1로 처리하여 4시간 동안 2차 가수분해하였을 때 4.30-5.22%의 가수분해가 일어났다. 효소별 가수분해물의 ACE 저해효과는 가수분해가 진행됨에 따라 $IC_{50}$의 수치는 감소하였고 저해율을 증가하였다. 1차 가수 분해시 8시간 가수분해한 가수분해물의 $IC_{50}$ 수치는 Protamex 처리군이 $516{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Flavourzyme이 $866{\mu}g/mL$로 가장 높았다. 1차 가수분해물을 Flavourzyme로 4시간 2차 가수분해를 하였을 때 1차 가수분해물 보다 $IC_{50}$ 수치가 감소되어 ACE저해 효과가 증가하였으며 Neutrase로 처리하였을 때 $282{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Protease M이 $570{\mu}g/mL$로 가장 효과가 적었다. 가장 효과가 좋은 Neutrase 2차 가수분해물을 소화효소인 pepsin, trypsin, ${\alpha}$-chymotrypsin으로 가수분해 하였을 경우 $IC_{50}$ 수치는 $597{\mu}g/mL$로 1차 가수분해물보다 저해효과가 유의적으로 감소되었다(p<0.05). Neutrase 2차 가수분해물을 MW 10,000로 한외여과하였을 때 MW 10,000 미만 permeate의 $IC_{50}$ 수치는 $273{\mu}g/mL$로 저해효과는 유의차가 없었으나, 10,000 이상의 retentate는 $IC_{50}$ 수치가 $635{\mu}g/mL$로 유의적 수준에서 저해효과가 감소하였다(p<0.05). 이에 효소의 종류와 가수분해 시간의 조합에 의한 ACE 저해활성을 측정하고 분리공정을 최적화하기 위한 추가 연구를 수행한다면 주요 유단백질인 카제인 유래 기능성 식품의 산업적 대량생산이 가능할 것으로 사료된다.

• 한국식품과학회지
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• 제26권5호
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• pp.532-538
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• 1994

Chymotrypsin, trypsin, pancreatin, 그리고 Aspergillus oryzae 유래 단백질분해효소의 in vitro 처리에 의하여 유청단백질(WPI)의 가수분해물(WPH)중 ${\beta}-LG$유래의 항원성변화를 조사하기 위하여 토끼 항${\beta}-LG$항혈청을 이용한 competitive inhibition ELISA(cELISA)와 heterologous PCA를 실시하였다. cELISA에 의하여 WPH의 monovalent항원성을 분석한 결과, 전체적으로 ${\beta}-LG$유래의 monovalent항원성은 효소처리에 의하여 $10^{-1.7}{\sim}10^{-4.1}$배 또는 그 이하로 저하되었으며, 특히 pepsin전처리후 Asp. oryzae유래의 효소로 가수분해한 경우(OUP)의 항원성은 거의 상실되었다. Guinea pig를 이용한 PCA test에 의하여 ${\beta}-LG$유래의 polyvalent항원성을 분석한 결과, WPH의 항원성은 $1/2{\sim}1/128$ 또는 그 이하로 저하되었다. 특히, WPH중에서 열변성이나 pepsin의 전처리없이 Asp. oryzae유래의 효소로 가수분해한 경우(OUN), 가수분해도(DH)가 그다지 높지 않고 monovalent항원성도 여전히 잔존하였음에도 불구하고($10^{-3.2}$배로 저하) 알레르기의 발증과 밀접한 관련이 있는 polyvalent항원성은 거의 상실되었다. 이는 OUN의 분해효율이 아주 높지는 않으나 ${\beta}-LG$상의 항원결정기가 효과적으로 파괴되어, polyvalent항원성이 제거되었기 때문으로 추측된다. 이 결과는, Asp. oryzae유래의 효소를 WPI에 처리하면 우유 알레르기의 주요 원인물질인 ${\beta}-LG$의 polyvalent항원성이 제거됨으로써 저알레르기성 infant formula용 WPH가 제조될 수 있음을 시사하고 있다.

• 한국균학회지
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• 제44권1호
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• pp.36-47
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• 2016

본 연구는 식물 근권에서 분리한 유용미생물 PA1, PA2, PA4, PA5, PA12 의 식물 생장 촉진능력과 식물 병원성 진균인 Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C. gloeosporioides, C. dematium, Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Sclerotinia minor 그리고 Fusarium sp.에 대한 생장억제능력을 평가하는데 그 목적이 있다. In vitro 실험에서 유용미생물의 식물 병원성 진균의 생장억제 능력을 확인하기 위해 세균배지인 TSA 배지와 곰팡이 배지인 PDA배지, 그리고 TSA와 PDA배지를 각각 50%씩 혼합한 배지(v/v, 1:1)에서 대치배양을 실시하였다. 그 결과 PDA배지에서는 PA2가 C. coccodes에 대해 65.5%로 가장 높은 억제능력을 보였으며, TSA배지에서는 PA2가 S. minor에 대해 96.5%로 가장 높은 억제력을 보였다. 또한 PDA와 TSA를 혼합한 배지에서는 PA2가 C. acutatum에 대해 58.5%로 가장 높은 억제능력을 보였다. 분리한 5균주 모두에서 식물병원성 진균에 대하여 생물적 방제 효과가 있음을 확인하였다. 또한 식물생장 촉진능력을 유발하는 원인물질을 탐색하기 위해 siderophore, protease, chitinase, hydrogen cyanide (HCN) 생성 유무를 확인하였고, phosphate solubilizing 실험을 실시하였다. 본 연구에서 사용된 유용미생물 5균주를 16s rDNA sequencing 결과 PA1, PA2는 Bacillus subtilis, PA4, PA5, PA12 각각 Bacillus altitudinis, Paenibacillus polymyxa, Bacillus amyloliquefaciens로 동정되었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제18권2호
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• pp.171-177
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• 2011

더덕의 유용성을 입증하기 위하여 더덕의 기능성과 더덕이 첨가된 청국장의 품질을 조사하였다. 70% 에탄올에서 추출한 더덕 추출물의 DPPH radical 제거능이 물 추출물보다 높았다. Salmonella typhimurium TA 98을 이용하여 직접 변이원에 대한 항변이원성 시험을 하였다. 200, 1,000, 2000, 3,000, 4,000 ug/plate의 에탄올 더덕 추출물에 대한 항돌연변이원율이 5.75, 31.38, 34.75, 53.50과 83.75%였으며 물 추출물보다 2배 이상 높았다. 청국장 제조에 더덕 함량을 5, 10, 15 및 20% (w/w)로 달리하여 첨가 제조한 청국장에 대하여 이화학적 및 관능적 검사 등의 품질에 미치는 영향을 조사하였다. 청국장 제조에 사용한 균주는 재래식 메주에서 ${\alpha}$-amyalse, ${\beta}$-amylase 및 산성 protease 활성이 우수한 것으로 선정된 Bacillus sp. B-3이다. 숙성 중 아미노태질소 함량을 조사한 결과 10% (w/w) 더덕 함유 청국장이 다른 처리구에 비해 가장 많이 생성되고 있었다. 한편, 더덕 함량이 15% (w/w) 이상 함유된 더덕 청국장에서는 아미노태질소 함량이 감소하는 경향을 보여 더덕 함량이 된장 중의 Bacillus sp. B-3의 생육에 영향을 미치는 것으로 나타났다. 색도에서는 더덕 함량이 높을수록 L-값이 감소하는 것으로 나타났다. 더덕 10% (w/w)가 첨가된 청국장이 기호도 측면에서 다른 처리구에 비해 우수한 것으로 나타났다.