• 제목/요약/키워드: poly[I:C]

검색결과 333건 처리시간 0.025초

오돈토글로썸 윤문 바이러스 Cy계통 게놈 RNA의 cDNA 구축 및 유전자 크로닝 (Construction of Complementary DNA Library and cDNA Cloning for Cy Strain of Odontoglossum Ringspot Virus Genomic RNA)

  • 류기현;박원목
    • 한국식물병리학회지
    • /
    • 제10권3호
    • /
    • pp.228-234
    • /
    • 1994
  • Genomic RNA was extracted from Cy strain of odontoglossum ringspot tobamovirus (ORSV-Cy) isolated from infected leaves of tobacco cv. Samsun. Size of the genomic RNA was about 6.6 kb in length. The genomic RNA was fractionated using Sephadex G-50 column chromatography into 2 fractions. They were polyadenylated at their 3'-end using E. coli poly(A) polymerase. Polyadenylated viral RNA was recovered by oligo (dT) primer adapter containing NotI restriction site and Moloney murine leukemia virus SuperScript reverse transcriptase (RNase H-). Second-strand cDNA was synthesized by using E. coli DNA ligase, E. coli DNA polymerase I and E. coli RNase H. Recombinant plasmids containing cDNAs for ORSV-Cy RNA ranged from about 800 bp to 3,000 bp. Among the selected 238 recombinants, pORCY-124 clone was the largest one covering 3'-terminal half of the viral RNA. This clone contained two restriction sites for EcoRI and XbaI and one site for AccI, AvaI, BglII, BstXI, HindIII, PstI, and TthIII 1. respectively. The clone contained partial viral replicase, a full-length movement protein and a complete coat protein genes followed by a 3' untranslated region of 414 nucleotides based on restriction mapping and nucleotide sequencing analyses. Clones pORCY-028, -068, -072, -187 and -224 were overlapped with the pORCY-124. Clones pORCY-014 and -095 covered 5' half upstream from the middle region of the viral RNA, which was estimated based on restriction mapping and partial sequence analysis. Constructed cDNA library covered more than 90% of the viral genome.

  • PDF

(感光性 高分子에 關한 硏究 VII) Cinnamoylated Polymers의 光增感 硬化反應機構 ((Photosensitive Polymers VII) Mechanism of Photosensitized Curing Reaction of Cinnamoylated Polymers)

  • 김광섭;심정섭
    • 대한화학회지
    • /
    • 제10권4호
    • /
    • pp.166-174
    • /
    • 1966
  • cinnamoylated photosensitive polymer의 광증감 경화반응기구를 반응속도론적으로 연구했다. Cinnamic acid(C)와 증감제(S)의 first excited singlet and lowest triplet energy level diagram과 증감제의 농도증가에 따른 sensitivity의 포화 등의 사실로부터 이 반응의 주요과정은 C와 S의 광 energy흡수에 의한 $C^{*(1)}$$S^{*(1)}$로의 여기, $S^{*(1)}{\to}S^{*(3)}$ intersystem crossing, S의 excimer 형성, $S^{*(3)}{\to}C^{*(3)}$ energy transfer 그리고 $C^{*(3)}$와 C의 termination 등임을 가정하고 다음 반응속도를 구했다. $-\frac{d[C]}{dt} = \frac{K_1[C]}{K_2 + [C]}[\frac{I^c_{abs}}{K_3 + [S]} + \frac{K_4[C]}{(K_5 + [C])(K_6 + [S])}(I^s_{abs} + \frac{K_7I^c_{abs}[S]}{K_8 + [S]})]$ $I^c_{abs}$$I^s_{abs}$ ;C 및 S의 광흡수율 $K_n$;상수 적외선 흡수스펙트럼 분석의 결과, Cinnamoyl 에스테르화도와 sensitivity의 관계 및 증감제의 농도와 sensitivity의 관계에 대하여 발표된 실험 data는 윗식을 만족시키므로 가정한 반응기구에 대한 뒷받침을 얻었다.

  • PDF

Expression Analysis of the Mx Gene and Its Genome Structure in Chickens

  • Yin, C.G.;Du, L.X.;Li, S.G.;Zhao, G.P.;Zhang, J.;Wei, C.H.;Xu, L.Y.;Liu, T.;Li, H.B.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
    • /
    • 제23권7호
    • /
    • pp.855-862
    • /
    • 2010
  • Among the known interferon-induced antiviral mechanisms, the Mx pathway is one of the most powerful pathways. The Mx protein has direct antiviral activity and inhibits a wide range of viruses by blocking an early stage of the viral replication cycle. Cloning, characterization, and expression of Mx in vivo and in vitro have been conducted. The chicken Mx gene spans 21 kb and is made up of 14 exons and 13 introns, of which the promoter region was analyzed. The real-time PCR results showed that Mx expression was increased in chicken embryo fibroblasts (CEF) after 12- and 24-h induction with polyI: C. Induction of Mx expression by poly I: C in vivo revealed tissue-specific patterns among the chicken tissues tested. A trace expression of Mx was detected in healthy chicken liver tissues from adult chickens without inducement; the expression levels in the liver, heart, and gizzard were higher than in the muscle and kidney. This is the first report to demonstrate the expression of a glutathione-S-transferase-tagged-Mx fusion protein of 75 KDa, as well as the biological activity tested by SDS-PAGE and western blotting.

Expression of phospholipase C β1 in olive flounder (Paralichthys olivaceus) following external stress stimulation

  • Woo, Soo Ji;Jang, Hee Young;Lee, Hyung Ho;Chung, Joon Ki
    • Fisheries and Aquatic Sciences
    • /
    • 제19권4호
    • /
    • pp.18.1-18.10
    • /
    • 2016
  • In this study, to clarify the function of $PoPLC-{\beta}1$, in response to stress challenge, we examined the $PoPLC-{\beta}1$ expression pattern in response to external stress (pathogen-associated molecular pathogen challenge and environmental challenge including temperature and salinity). $PoPLC-{\beta}1$ expression analysis of tissue from olive flounder showed that the messenger RNA (mRNA) was predominantly expressed in the brain, heart, eye, liver, spleen, and stomach. We also tested the mRNA expression of the $PoPLC-{\beta}1$ in the spleen and kidney of olive flounder by RT-PCR and real-time PCR following stimulation with lipopolysaccharide (LPS), concanavalin A (ConA), or polyinosinic:polycytidylic acid (PolyI:C) and compared with the inflammatory cytokines IL-1b and IL-6 in the stimulated flounder tissues. Each of the spleen and kidney and mRNA transcripts of $PoPLC-{\beta}1$ were increased 30- and 10-fold than normal tissue at 1-6 h post injection (HPI) with PolyI:C when the expression of $PoPLC-{\beta}1$ transcript was similar to LPS and ConA. We also tested the expression of $PoPLC-{\beta}1$ in response to temperature and salinity stress. The expression of $PoPLC-{\beta}1$ also was affected by temperature and salinity stress. Our results provide clear evidence that the olive flounder $PLC-{\beta}1$ signal pathways may play a critical role in immune function at the cellular level and in inflammation reactions. In addition, $PLC-{\beta}1$ appears to act as an oxidative-stress suppressor to prevent cell damage in fish.

Chloroform-Chloroethanol 용매중에서 Poly(cis-5-methylproline)의 평형 및 열역학적연구 (Equilibrium Studies and Thermodynamics for the Mutarotation of Poly(cis-5-methylproline) in Chloroform-Chloroethanol)

  • 한만정
    • 대한화학회지
    • /
    • 제23권4호
    • /
    • pp.187-197
    • /
    • 1979
  • ChIoroform과 chloroethanol 혼합용매속에서 Poly(cis-5-methylproIine)의 광회전을 측정하였다. 이 혼합용매속에 chloroethanol이 0.5∼10부피%일때 형태 A와 B사이에는 평형상태가 이루어졌다. 광회전을 이용하여 5, 25 및 45$^{circ}$C에서 평형정수를 측정하고 자유엔탈피, 엔탈피 및 엔트로피 변화를 계산하였다. 같은 몰수의 형태 A와 B에서 출발하면 chloroethanol이 3부피% 이상일때는 정방향 변광회전이 일어나고 이하일때는 역방향 회전이 일어났다. 엔탈피와 엔트로피 변화는 정방향 변광회전일때는 양수이고 역방향 변광회전일 때는 음수였다. 반응 추진역은 정방향 회전일때는 엔트로피의 증가이고 역방향 회전일때는 엔탈피의 감소였다. 측정된 열역학적 자료들은 폴리머와 용매사이의 상호작용 즉 용매중의 chloroethanol이 형태 B분자내의 카보닐기와 선택적으로 수소결합을 형성하며, 형태 A와 B의 헝태 에너지 차이에 있다는것을 설명한다

  • PDF

열가역적인 Poly(vinylidene fluoride)/Propylene Carbonate(PC) 겔 시스템에서의 Pregea 상태 : 1. Core-Shell 모델 (Preset State of Thermoreversible Poly(vinylidene fluoride)/propylene Carbonate Gel System: 1. Core-Shell Model)

  • 박일현
    • 폴리머
    • /
    • 제26권2호
    • /
    • pp.227-236
    • /
    • 2002
  • 열가역적인 polyvinylidene fluoride (PVDF)/propylene carbonate (PC) 의 매우 묽은 농도에서의 pregel 상태의 구조를 레이저 광산란법으로 조사한 결과 겔형성농도의 100배 이상 묽은 농도 조건에서도 PVDF 사슬은 낱개로 용해되어 있는 것이 아니라 많은 PVDF 사슬들이 응집된 거대한 구형 상태로 존재하며 이때의 응집체의 분산도는 상당히 낮으며 용액온도 $40^{\circ}C$에서 회전반경$R_G$ 는 232 nm, 동력학적 반경 $R_H$는 407 nm로 측정되었다. $R_H/R_G$=1.75의 커다란 비 값, 극소점을 갖는 정적 광산란 패턴 등으로부터 예측하건대 이 응집체의 구조는 core-shell 형태의 구형이며, 이때 내부 core의 반지름은 대략 215 nm, 외부 shell의 두께는 192 nm가 되며, shell 부분에서의 PVDF의 단량체 밀도는 core 부분의 단량체 밀도의 약 75% 수준에 머무르는 것으로 판명되었다.

실리카와 니페디핀을 함유한 Poly(ε-caprolactone) 마이크로캡슐의 제조와 방출 거동 (Preparation and Release Behaviors of Poly(ε-caprolactone) Microcapsules Containing SiO2 and Nifedipine)

  • 박수진;이윤목;한미정
    • 공업화학
    • /
    • 제16권4호
    • /
    • pp.588-593
    • /
    • 2005
  • 본 실험에서는 화학적으로 표면처리된 실리카와 니페디핀을 함유하는 PCL 마이크로캡슐을 O/W 액중건조법을 이용하여 제조하였다. 마이크로캡슐에 대한 심물질의 함입은 FT-IR을 사용하여 측정하였고, 마이크로캡슐의 표면 형태는 주사전자현미경을 통하여 관찰하였다. 또한, 마이크로캡슐의 니페디핀 방출 거동은 UV/Vis. 흡광광도법으로 흡광도를 측정하여 살펴보았다. 실험 결과, 니페디핀의 C=O 결합에 의한 $1682cm^{-1}$ 신축진동 피크가 마이크로 캡슐에서 나타나는 것을 확인할 수 있었다. 마이크로캡슐의 평균 입자크기는 교반 속도가 증가함에 따라 감소하였다. 그리고 실리카를 염기성 용액으로 처리한 경우 니페디핀의 흡착량과 방출 속도가 감소하였음을 확인할 수 있었으며, 이는 표면 염기도의 증가로 인해 실리카 표면의 비표면적이 감소되고 산-염기 상호작용이 증가되었기 때문으로 판단된다.

유전공학적 방법에 의한 토끼 글로빈 유전자의 재조합과 대장균에서의 발현 (Molecular Cloning and Expression in Escherichia coli of a Rabbit Globin Gene)

  • Jang, Sung-Key;Park, Hyune-Mo
    • 한국동물학회지
    • /
    • 제27권2호
    • /
    • pp.103-116
    • /
    • 1984
  • 유전자 구조 및 유전정보 흐름의 차이로 인하여 고등생물의 유전자를 미생물에 직접 cloning하면 원하는 유전자 산물을 얻지 못하는 경우가 많다. 이것을 극복하기 위해서는 화학적인 방법으로 유전자를 합성하든지, 또는 역제효소를 사용하여 고등생물의 mRNA로부터 유전자를 합성하여 cloning하는 방법을 사용한다. 본 연구에서는 oligo(dT)-cellulose column 방법으로 순수분리한 plasmid pBR322의 Pst I site에 cloning하였다. 우선 AMV reverse transcriptase로 primary cDNA를 합성하고, 알칼리를 처리하여 주형 RNA를 제거했다. 이번에는 이 primary cDNA를 주형으로 Klenow enzyme과 reverse transcriptase를 차례로 처리하여 double stranded DNA를 합성하고, 이 때 5' end 근처에 형성되는 hairpin loop을 Sl nuclease로 제거했다. Terminal deoxynucleotidyl transferase를 사용하여, 합성된 dsDNA에는 poly(dC) track을, Pst I endonuclease를 처리한 plasmid DNA에서는 poly(dG) track을 각각 붙인다음 이들을 서로 annealing시키고 E. coli에 transformation시켜서 크기가 큰 plasmid를 갖는 clone을 cracking 방법으로 일처 선별하였다. 이렇게 선별된 clone을 in 냐셔 hybridization 방법으로 조사하여 globin DNA가 들어간 colony를 이차 선별하고 여러 restriction enzyme으로 잘라보아 globin DNA가 cloning된 것을 확인하였다. 토끼 hemoglobin으로 immunize한 rat (Wistar)에서 뽑은 제일차 혈청과 염소에서 뽑은 제이차 혈청의 antibody를 사용한 radioimmunoassay방법으로, cloning된 globin gene이 대장균내에서 발현되는 지의 여부를 살펴 보았는데, 박테리아의 $\\beta$-lactamase와 토끼의 globin이 결합된 chimeric protein이 대장균 내에서 다량 합성되며, 이 단백질은 토끼 hemoglobin의 antigenic determinant를 가지고 있음을 알 수 있었다.

  • PDF

Vapor Transport Epitaxy에 의한 GaN의 성장과 특성 (Growth and Properties of GaN by Vapor Transport Epitaxy)

  • 이재범;김선태
    • 한국재료학회지
    • /
    • 제16권8호
    • /
    • pp.479-484
    • /
    • 2006
  • Highly c-axis oriented poly-crystalline GaN with a dimension of $1{\sim}3\;{\mu}m$ was deposited on $c-Al_2O_3$ substrate by vapor transport epitaxy (VTE) method at the temperature range of $900{\sim}1150^{\circ}C$. XRD intensities from (00'2) plane of grown GaNs were increased with reaction conditions which indicate the improvement of the crystal quality. In the PL spectra measured at 10 K, the spectrum composed with the neutral-donor bound exciton-related emission at 3.47 eV, crystal defect-related emission band at 3.42 eV and with its phonon replicas. The fact that intensity of $I_2$ were increased and FWHM were decreased with growth conditions means that the quality of GaN crystals were improved. With this simple VTE technology, we confirm that the GaNs were simply deposited on sapphire substrate and crystal quality related to optical properties of GaN grown by VTE were relatively good. PL emission without deep level emission in spite of polycrystalline structure can be applicable to the fabrication of large area and low cost optical devices using poly-GaN grown by VTE.

Characterization of a Low Molecular Weight Heat-Shock Protein cDNA Clone from Nicotiana tabacum

  • Park, Soo-Min;Joe, Myung-Kuk;Hong, Choo-Bong
    • 한국식물학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국식물학회 1999년도 춘계학술발표대회:발표논문요지록
    • /
    • pp.18-18
    • /
    • 1999
  • We characterized a cDNA clone for a low molecular weight heat-shock protein (LMW HSP) from tobacco named TLHS-l. Nucleotide sequence determination of TLHS-1 identified an open reading frame for 159 amino acids. To the upstream of the open reading frame, a sequence of 124 nucleotides was determined. To the 3' downstream of the open reading frame, 212 nucleotides were identified which carried poly(A)-tail. Comparison of the open reading frame and hydropathy plot of TLHS-1 with the previously reported class I LMW HSPs showed high identity which classified TLHS-1 as a class I LMW HSP cDNA clone. We proposed that there are six consensus regions in class I LMW HSPs. RNA blot hybridization for TLHS-1 showed a typical expression pattern of heat-shock-inducible gene from three common tobacco cultivars. The open reading frame of TLHS-1 was overexpressed in Escherichia coli. TLHS-1 protein confers thermal protection of other proteins in vitro and in vivo. Thermal induced aggregation of citrate synthase was reduced by purified TLHS-1 protein, and thermal death rate at $50^{\circ}C$ was reduced in E. coli expressing TLHS-l. From these data, we can expect that TLHS-1 acts as a molecular chaperone.perone.

  • PDF