The complex enzyme pool secreted by the phytopathogenic fungus Fusarium graminearum in response to glucose or hop cell wall material as sole carbon sources was analyzed. The biochemical characterization of the enzymes present in the supernatant of fungal cultures in the glucose medium revealed only 5 different glycosyl hydrolase activities; by contrast, when analyzing cultures in the cell wall medium, 17 different activities were detected. This dramatic increase reflects the adaptation of the fungus by the synthesis of enzymes targeting all layers of the cell wall. When the enzymes secreted in the presence of plant cell wall were used to hydrolyze pretreated crude plant material, high levels of monosaccharides were measured with yields approaching 50% of total sugars released by an acid hydrolysis process. This report is the first biochemical characterization of numerous cellulases, hemicellulases, and pectinases secreted by F. graminearum and demonstrates the usefulness of the described protein cocktail for efficient enzymatic degradation of plant cell wall.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.34
no.10
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pp.1633-1637
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2005
Five different plant cell wall degrading enzymes were tested for their ability to release p -hydroxybenzoic acid from carrot alcohol insoluble residue (AIR) and cellulose fraction. Phenolics of AIR from cell wall materi민 (CWM) in carrot were found to consist primarily of p-hydroxybenzoic acid (1,977 $\mu$g/g AIR) with minor contribution from vanillin (55.9 $\mu$g/g AIR), ferulic acid (13.6 $\mu$g/g AIR) and p-hydroxybenzaldehyde (10.6 $\mu$g/g AIR). The contents of ferulic acid in Driselase, Cellulase, Macerozyme R-200, Macerozyme R-10 and Sumyzyme MC were 2,319, 2,060, 391, 95.2, 34.1 $\mu$g/g, respectively. Incubation of Driselase with AIR released only 2.8$\%$ of the total 4 M NaOH extractable p-hydroxybenzoic acid. These results indicate that commercial five plant cell wall dograding enzymes can not release P-hydroxybenzoic acid from carrot AIR and cellulose fraction.
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) is a gram-negative, broad host range bacterial pathogen which causes soft rot disease in potatoes as well as other vegetables worldwide. While Pectobacterium infection relies on the production of major cell wall degrading enzymes, other virulence factors and the mechanism of genetic adaptation of this pathogen is not yet clear. In the present study, we have performed an in-depth genome-wide characterization of Pcc strain ICMP5702 isolated from potato and compared it with other pathogenic bacteria from the Pectobacterium genus to identify key virulent determinants. The draft genome of Pcc ICMP5702 contains 4,774,457 bp with a G + C content of 51.90% and 4,520 open reading frames. Genome annotation revealed prominent genes encoding key virulence factors such as plant cell wall degrading enzymes, flagella-based motility, phage proteins, cell membrane structures, and secretion systems. Whereas, a majority of determinants were conserved among the Pectobacterium strains, few notable genes encoding AvrE-family type III secretion system effectors, pectate lyase and metalloprotease in addition to the CRISPR-Cas based adaptive immune system were uniquely represented. Overall, the information generated through this study will contribute to decipher the mechanism of infection and adaptive immunity in Pcc.
Ruminant animals develop a diverse and sophisticated microbial ecosystem for digesting fibrous feedstuffs. Plant cell walls are complex and their structures are not fully understood, but it is generally believed that the chemical properties of some plant cell wall compounds and the cross-linked three-dimensional matrix of polysaccharides, lignin and phenolic compounds limit digestion of cell wall polysaccharides by ruminal microbes. Three adaptive strategies have been identified in the ruminal ecosystem for degrading plant cell walls: production of the full slate of enzymes required to cleave the numerous bonds within cell walls; attachment and colonization of feed particles; and synergetic interactions among ruminal species. Nonetheless, digestion of fibrous feeds remains incomplete, and numerous research attempts have been made to increase this extent of digestion. Exogenous fibrolytic enzymes (EFE) have been used successfully in monogastric animal production for some time. The possibility of adapting EFE as feed additives for ruminants is under intensive study. To date, animal responses to EFE supplements have varied greatly due to differences in enzyme source, application method, and types of diets and livestock. Currently available information suggests delivery of EFE by applying them to feed offers the best chance to increase ruminal digestion. The general tendency of EFE to increase rate, but not extent, of fibre digestion indicates that the products currently on the market for ruminants may not be introducing novel enzyme activities into the rumen. Recent research suggests that cleavage of esterified linkages (e.g., acetylesterase, ferulic acid esterase) within the plant cell wall matrix may be the key to increasing the extent of cell wall digestion in the rumen. Thus, a crucial ingredient in an effective enzyme additive for ruminants may be an as yet undetermined esterase that may not be included, quantified or listed in the majority of available enzyme preparations. Identifying these pivotal enzyme(s) and using biotechnology to enhance their production is necessary for long term improvements in feed digestion using EFE. Pretreating fibrous feeds with alkali in addition to EFE also shows promise for improving the efficacy of enzyme supplements.
El_Komy, Mahmoud H.;Saleh, Amgad A.;Eranthodi, Anas;Molan, Younes Y.
The Plant Pathology Journal
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v.31
no.1
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pp.50-60
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2015
The use of novel isolates of Trichoderma with efficient antagonistic capacity against Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL) is a promising alternative strategy to pesticides for tomato wilt management. We evaluated the antagonistic activity of 30 isolates of T. asperellum against 4 different isolates of FOL. The production of extracellular cell wall degrading enzymes of the antagonistic isolates was also measured. The random amplified polymorphic DNA (RAPD) method was applied to assess the genetic variability among the T. asperellum isolates. All of the T. asperellum isolates significantly reduced the mycelial growth of FOL isolates but the amount of growth reduction varied significantly as well. There was a correlation between the antagonistic capacity of T. asperellum isolates towards FOL and their lytic enzyme production. Isolates showing high levels of chitinase and ${\beta}$-1,3-glucanase activities strongly inhibited the growth of FOL isolates. RAPD analysis showed a high level of genetic variation among T. asperellum isolates. The UPGMA dendrogram revealed that T. asperellum isolates could not be grouped by their antagonistic behavior or lytic enzymes production. Six isolates of T. asperellum were highly antagonistic towards FOL and potentially could be used in commercial agriculture to control tomato wilt. Our results are consistent with the conclusion that understanding the genetic variation within Trichoderma isolates and their biochemical capabilities are required for the selection of effective indigenous fungal strains for the use as biocontrol agents.
Pokkah Boeng is a serious disease of sugarcane, which can lead to devastating yield losses in crop-producing regions, including southern China. However, there is still uncertainty about the causal agent of the disease. Our aim was to isolate and characterize the pathogen through morphological, physiological, and molecular analyses. We isolated sugarcane-colonizing fungi in Fujian, China. Isolated fungi were first assessed for their cell wall degrading enzyme capabilities, and five isolates were identified for further analysis. Internal transcribed spacer sequencing revealed that these five strains are Fusarium, Alternaria, Phoma, Phomopsis, and Epicoccum. The Fusarium isolate was further identified as F. verticillioides after Calmodulin and EF-$1{\alpha}$ gene sequencing and microscopic morphology study. Pathogenicity assay confirmed that F. verticillioides was directly responsible for disease on sugarcane. Co-inoculation of F. verticillioides with other isolated fungi did not lead to a significant difference in disease severity, refuting the idea that other cellulolytic fungi can increase disease severity as an endophyte. This is the first report characterizing pathogenic F. verticillioides on sugarcane in southern China.
Microscopic study of chili pepper (Capsicum annuum L.) infected with Phytophthora capsici, causing Phytophthora blight of chili pepper, was conducted to compare histological and cytological characteristics in the root and stem of susceptible (C. annuum cv. Bugang) and resistant (C. annuum cv. CM334) pepper cultivars. The susceptible pepper roots and stems were extensively penetrated and invaded by the pathogen initially into epidermal cells and later cortical and vascular cells. Host cell walls adjacent to and invaded by the infecting hyphae were partially dissolved and structurally loosened with fine fibrillar materials probably by cell wall-degrading enzymes of the pathogen. In the resistant pepper, the pathogen remained on root epidermal surface at one day after inoculation, embedded and captured in root exudation materials composed of proteins and polysaccharides. Also the pathogen appeared to be blocked in its progression at the early infection stages by thickened middle lamellae. At 3 days after inoculation, the oomycete hyphae were still confined to epidermal cells of the root and at most outer peripheral cortical cells of the stem, resulting from their invasion blocked by wound periderms formed underneath the infection sites and/or cell wall appositions bounding the hyphal protrusions. All of these aspects suggest that limitation of disease development in the resistant pepper may be due to the inhibition of the pathogen penetration, infection, invasion, and colonization by the defense structures such as root exudation materials, thickened middle lamellae, wound peridems and cell wall appositions.
Mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades are conserved signaling modules in the eukaryotic cells. They are involved in many major cell processes in fungi such as stress responses, vegetative growth, pathogenicity, secondary metabolism and cell wall integrity. In this review, we summarized the advances of research on the MAPK signaling pathways in Alternaria species. As major phytopathogenic fungi, Alternaria species reduce crop production. In contrast to the five MAPK pathways known in yeast, only three MAPK pathways as Fus3/Kss1-type, Hog1-type, and Slt2-type have been characterized in Alternaria. The Fus3/Kss1-type MAPK pathway participates in regulation of vegetative growth, conidiation, production of some cell-wall-degrading enzymes and pathogenicity. The Hog1-type pathway is involved in osmotic and oxidative stress, fungicides susceptibility and pathogenicity. The Slt2-type MAP kinases play an important role on maintaining cell wall integrity, pathogenicity and conidiation. Although recent advances on the MAPK pathways in Alternaria spp. reveal many important features on the pathogenicity, there are many unsolved problems regarding to the unknown MAP kinase cascade components and network among other major signal transduction. Considering the economic loss induced by Alternaria spp., more researches on the MAPK pathways will need to control the Alternaria diseases.
Pectobacterium, which causes soft rot disease, is divided into 18 species based on the current classification. A total of 225 Pectobacterium strains were isolated from 10 main cultivation regions of potato (Solanum tuberosum), napa cabbage (Brassica rapa subsp. pekinensis), and radish (Raphanus sativus) in South Korea; 202 isolates (90%) were from potato, 18 from napa cabbage, and five from radish. Strains were identified using the Biolog test and phylogenetic analysis. The pathogenicity and swimming motility were tested at four different temperatures. Pectolytic activity and plant cell-wall degrading enzyme (PCWDE) activity were evaluated for six species (P. carotovorum subsp. carotovorum, Pcc; P. odoriferum, Pod; P. brasiliense, Pbr; P. versatile, Pve; P. polaris, Ppo; P. parmentieri, Ppa). Pod, Pcc, Pbr, and Pve were the most prevalent species. Although P. atrosepticum is a widespread pathogen in other countries, it was not found here. This is the first report of Ppo, Ppa, and Pve in South Korea. Pectobacterium species showed stronger activity at 28℃ and 32℃ than at 24℃, and showed weak activity at 37℃. Pectolytic activity decreased with increasing temperature. Activity of pectate lyase was not significantly affected by temperature. Activity of protease, cellulase, and polygalacturonase decreased with increasing temperature. The inability of isolated Pectobacterium to soften host tissues at 37℃ may be a consequence of decreased motility and PCWDE activity. These data suggest that future increases in temperature as a result of climate change may affect the population dynamics of Pectobacterium.
Subhashini Wijeysingha;Buddhi C. Walpola;Yun-Gu Kang;Min-Ho Yoon;Taek-Keun Oh
Korean Journal of Agricultural Science
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v.50
no.4
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pp.759-771
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2023
Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) are naturally occurring bacteria that intensively colonize plant roots and are crucial in promoting the crop growth. These beneficial microorganisms have garnered considerable attention as potential bio-inoculants for sustainable agriculture. PGPR directly interacts with plants by providing essential nutrients through nitrogen fixation and phosphate solubilization and accelerating the accessibility of other trace elements such as Cu, Zn, and Fe. Additionally, they produce plant growth-promoting phytohormones, such as indole acetic acids (IAA), indole butyric acids (IBA), gibberellins, and cytokinins.PGPR interacts with plants indirectly by protecting them from diseases and infections by producing antibiotics, siderophores, hydrogen cyanide, and fungal cell wall-degrading enzymes such as glucanases, chitinases, and proteases. Furthermore, PGPR protects plants against abiotic stresses such as drought and salinity by producing 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) deaminase and modulating plant stress markers. Bacteria belonging to genera such as Bacillus, Pseudomonas, Burkholderia, Pantoa, and Enterobacter exhibit multiple plant growth-promoting traits, that can enhance plant growth directly, indirectly, or through synergetic effects. This comprehensive review emphasizes how PGPR influences plant growth promotion and presents promising prospects for its application in sustainable agriculture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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