In order to clarify effects of phytohormones on the viability and the cell wall regeneration of protoplasts isolated from Nicotiana tobacum L. var. BY4, protoplasts isolated from mesophyll tissue were cultured on the Murashige-Skoog liquid media supplemented with auxin(2, 4-D, NAA, IAA) and/or cytokinin (kinetin, BAP, 2ip). Viability of protopplasts was higher in the culture medium containing auxin and cytokinin, especially in the combination of 2, 4-D and BAP. The effectual cell wall regeneration of protolasts was observed when theprotoplasts were cultrued on the medium supplemented with auxin alone, especially with IAA. Cell wall regernation started from 2-3 days after culture and was not detected at budding regions. When the protoplasts were cultured on the phytohormone-free medium, the viability of protoplasts dramatically decreased 4 days after culture.
Effects of IAA on the elongation and cell wall hlysocidase activities were investigated in excised rape (Brassica napus L. cv. Yongdang) hypocotyl segments. IAA promoted the elongation of rape hypocotyl segments. In rape hypocotyls, the first 10-mm segments from the hook exhibited maximal elongation and the capacity of elongation was gradually decreased with increasing distance of each 10-mm from the hook. A good correlation has been obtained between the magnitude of endogenous growth and the activities of $\alpha$, $\beta$-glucosidase and $\alpha$, $\beta$-galactosidase. However, exogenous application of IAA did not seem to enhance the tissue with IAA resulted in acidification of the incubation medium. From these data, we can conclude that IAA seems to enhance elongation of the tissue segments, at least in part, by releasing hydrogen ion into cell wall, some of which may participate in the cell wall extension process, but does not seem to trigger the activation of $\alpha$, $\beta$-glucosidase and $\alpha$, $\beta$-galactosidase.
Kim Suk-Weon;Ban Sung-Hee;Yoo Ook-Joon;Liu Jang-Ryol
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.11
no.1
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pp.38-42
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2006
When whole cells are subjected to pyrolysis gas chromatography/mass spectrometry (Py-GC/MS) analysis, it provides biochemical profiles containing overlapping signals of the majority of compounds. To determine marker compounds that discriminate embryogenic calluses from nonembryogenic calluses, samples of embryogenic and nonembryogenic calluses of five higher plant species were subjected to Py-GC/MS. Genetic programming of Py-GC/MS data was able to discriminate embryogenic calluses from nonembryogenic calluses. The content ratio of 5-meyhyl-2-furancarboxaldehyde and 5-(hydroxymethyl)-2-furancarboxaldehyde was greater in nonembryogenic calluses than in embryogenic calluses. However, the content ratio of phenol, p-cresol, and $^1H-indole$ in embryogenic calluses was 1.2 to 2.4 times greater than the ratio in nonembryogenic calluses. These pyrolysates seem to be derived from the components of the cell walls, which suggests that differences in cell wall components or changes in the architecture of the cell wall playa crucial role in determining the embryogenic competence of calluses.
Pectic materials, which are widely spread in the plant cell wall as plant carbohydrates, plays a great role in food Industry that acts as a softening agent of fruits and vegetables, and gel forming agents. To study physiochemical properties and industrial applications of pectic enzymes that hydrolyzes pectin, classification, assay method and Industrial application are reviewed based on previous results.
Effects of putrescine, spermidine and spermine on the activity of D-glucose-6-phosphate cyclohydrolase in the Daucus carota L. protoplast cultured for 4 days and effects of polyamines on the incorporation of D-[u-14C]-glucose treated to protoplasts in culture-medium were investigated. The activity of D-glucose-6-phosphate cyclohydrolase was increased by polyamines and among them spermine was the most effective. Polyamiens increased protein synthesis and this due to the increasing effect of the polyamines on the synthesis of glycoprotein which is one of cell wall components. The synthesis of cell polysaccharides, such sa pectic substances, hemicelluloses and cellulose was increased by polyamines, which stimulated synthesis of pectin substances, and hemicellulose more greatly than that of cellulose, and spermidine was the most effective. In the light of the above results it seems that the polyamines increase cell wall regeneration by the stimulation of enzyme activities which synthesize cell wall components.
Ruminant animals develop a diverse and sophisticated microbial ecosystem for digesting fibrous feedstuffs. Plant cell walls are complex and their structures are not fully understood, but it is generally believed that the chemical properties of some plant cell wall compounds and the cross-linked three-dimensional matrix of polysaccharides, lignin and phenolic compounds limit digestion of cell wall polysaccharides by ruminal microbes. Three adaptive strategies have been identified in the ruminal ecosystem for degrading plant cell walls: production of the full slate of enzymes required to cleave the numerous bonds within cell walls; attachment and colonization of feed particles; and synergetic interactions among ruminal species. Nonetheless, digestion of fibrous feeds remains incomplete, and numerous research attempts have been made to increase this extent of digestion. Exogenous fibrolytic enzymes (EFE) have been used successfully in monogastric animal production for some time. The possibility of adapting EFE as feed additives for ruminants is under intensive study. To date, animal responses to EFE supplements have varied greatly due to differences in enzyme source, application method, and types of diets and livestock. Currently available information suggests delivery of EFE by applying them to feed offers the best chance to increase ruminal digestion. The general tendency of EFE to increase rate, but not extent, of fibre digestion indicates that the products currently on the market for ruminants may not be introducing novel enzyme activities into the rumen. Recent research suggests that cleavage of esterified linkages (e.g., acetylesterase, ferulic acid esterase) within the plant cell wall matrix may be the key to increasing the extent of cell wall digestion in the rumen. Thus, a crucial ingredient in an effective enzyme additive for ruminants may be an as yet undetermined esterase that may not be included, quantified or listed in the majority of available enzyme preparations. Identifying these pivotal enzyme(s) and using biotechnology to enhance their production is necessary for long term improvements in feed digestion using EFE. Pretreating fibrous feeds with alkali in addition to EFE also shows promise for improving the efficacy of enzyme supplements.
According to the mode of development of antheridia and antheridial mother cells, the antheridium formation of Rhodymeniales is divided into two types. I. Separate Type; Antheridial mother cells are separate one another. Antheridia and the mother cell are surrounded by the common wall. The superficial gelatinous wall covering antheridial sori disappears during the antheridium formation. Spermatia are comparatively large. Halosaccion saccatum, H. firmum, Rhodymenia palmata and Rh. marginicrassa. II. Seriate Type; Antheridial mother cells, originated from the same epidermal cell, are seriate one another with a pit-connection. Antheridia and the mother cell do not have the common wall. The superficial gelatinous wall remains during the antheridium formation. Spermatia are comparatively small. Rhodymenia intricata, Rh. pertusa, Chrysymenia wrightii, Lomentaria hakodatensis, L. catenata, Binghamia californica and Champia parvula.
The distribution of RNA in the anther wall of Brassica napus during male gametogenesis was followed by 3H-uridine autoradiography. Silver grain(SG) density was not above background in the anther wall just after microspore was released from tetrad callose wall. Significant accumulation of SGs occurred in tapetum, endothecium, and epidermis before microspore vacuolation. Accumulation of RNA in the tapetal cells was peak before the vaculation occurred in the microspore. With the onset of tapetal senescence at the partially vacuolated microspore stage, SGs decreased and they completely disappeared in the tapetum at the bicelled pollen stage. Accumulation of RNA in the endothecial cells was peak after the microspore mitosis and continued just after the generative cell mitosis. Appreciable SGs also occurred in cells of epidermis from nonvacuolate microspore stage to bicelled pollen stage. During this period, SG density was almost same and was not high as compared with tapetum or endothecium. At tricelled mature pollen stage, no incorporation occurred in anther wall. SGs were found mostly over the nucleouls and chromation of the cell nuclei.
Lee Dong-Hoon;Bae Han-Hong;Kang In-Kyu;Byun Jae-Kyun;Kang Sang-Gu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.8
/
pp.1192-1200
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2006
An apple polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP), which specifically inhibits endopolygalacturonase (PG, EC 3.2.1.15) from Botryosphaeria dothidea, was purified from Botryosphaeria dothidea-infected apple (Malus domestica cv. Fuji) fruits. The purified apple PGIP had a molecular mass of 40 kDa. The N-terminal amino acid sequence of the purified protein showed high homologies to those of PGIP from pear (100%), tomato (70%), and bean (65%). We also purified polygalacturonase (PG) from B. dothidea. The PG hydrolyzes pectic components of plant cell walls. When the extracted apple pectic cell wall material was treated with purified apple PGIP and B. dothidea PG, the amount of uronic acid released was lower than that treated with B. dothidea PG alone. This result demonstrates that PGIP functions specifically by inhibiting cell wall maceration of B. dothidea PG Furthermore, we characterized the de novo function of the PGIP against PG on the solubilization and depolymerization of polyuronides from cell wall of apple fruits inoculated with B. dothidea. This result demonstrated that the PGIP of plants exhibits one of the direct defense mechanisms against pathogen attack by inhibiting PGs that are released from pathogens for hydrolysis of cell wall components of plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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